(24/12/2014) Un método para producir una célula eucariota genéticamente modificada que incluye una secuencia exógena insertada en un cromosoma de dicha célula eucariota, que comprende: transfectar una célula eucariota con uno o más ácidos nucleicos que incluyen (i) una primera secuencia de ácido nucleico que codifica una meganucleasa, y (ii) una segunda secuencia de ácido nucleico que incluye dicha secuencia exógena; en el que dicha meganucleasa produce un sitio de escisión en dicho cromosoma y dicha secuencia exógena se inserta en dicho cromosoma en dicho sitio de escisión; en el que dicha meganucleasa comprende un polipéptido que tiene al menos un 85 % de similitud de secuencia…

(10/12/2014) Un método para identificar un polipéptido que tiene una especificidad de unión o funcionalidad deseada, que comprende: (i) generar una colección diversa de polinucleótidos, preferentemente vectores plasmídicos o amplicones de PCR, de ADN bicatenario, que codifican polipéptidos que tienen diferentes especificidades de unión o funcionalidades, en donde dichos polinucleótidos comprenden una secuencia que codifica un polipéptido dispuesto entre una primera y una segunda secuencias de repeticiones terminales invertidas que son reconocidas por al menos una enzima transposasa y son funcionales con ella; (ii) introducir la colección diversa de polinucleótidos de (i) en las células hospedadoras; (iii) expresar en la células hospedadoras…

(16/07/2014) Procedimiento in vitro o ex vivo para expresar al menos un gen de interés que codifica para uno o más producto(s)/polipéptido(s) terapéutico(s) deseado(s) en una célula eucariota, en el que la célula eucariota no es un ovocito humano ni una célula madre embrionaria humana, que comprende a) introducir de un primer ADN que comprende una secuencia attB de SEQ ID n.º: 13, una attP de SEQ ID n.º 14, una attL de SEQ ID n.º 15 o una attR de SEQ ID n.º 16 o un derivado de la misma en el interior de una célula; b) seleccionar subclones candidatos en un biorreactor a pequeña escala que imita un proceso de producción de alimentación por lotes basado en parámetros tales como una alta viabilidad a alta densidad celular, el metabolismo y la capacidad de permitir…

(02/04/2014) Uso de una molécula de ácido nucleico donante lineal para la integración dirigida dependiente de homología de una secuencia de interés en una célula eucariota, comprendiendo la molécula de ácido nucleico donante brazos de homología de entre 50 y 100 pares de bases y la secuencia de interés, en donde los brazos de homología flanquean la secuencia de interés.

(05/03/2014) Método para la generación de una célula hospedadora productora para la obtención de productos génicos recombinantes que comprende los pasos (a) proporcionar un vector diana que comprende (i) un gen informador (RG1) enlazado operativamente a una primera secuencia de control de la expresión que comprende un promotor constitutivo (P1), (ii) un primer gen marcador de selección (SM1) enlazado operativamente a una segunda secuencia de control de la expresión (P2), (iii) un segundo gen marcador de selección no funcional (SM2) sin enlace operativo a una secuencia de control de la expresión, en donde la secuencia (i) está localizada en la posición 5', la secuencia (ii) está localizada entre (i) y (iii) y la secuencia (iii) está localizada en la posición 3'. (iv) un primer y un segundo sitio…

(13/11/2013) Un método para generar un mosaico de genes mediante recombinación somática in vivo de secuencias deADN homeólogas, que comprende a) en un procedimiento de una sola etapa, (i) transformar 5 una célula que carece de reparación de ADN con al menos un gen A que tiene unahomología de secuencia de al menos 30% y menos de 99,5% con otro gen que se va a recombinar quees una parte integral del genoma celular o está presente en el armazón de una estructura artificialgenética, empleando al menos un gen B que se va a recombinar, (ii) recombinar dichos genes, (iii) generar un mosaico génico de los genes en un sitio de integración de un genoma diana,en donde dicho al menos un gen A tiene una única secuencia diana flanqueante en el extremo 5' o elextremo 3' que se ancla…

(02/10/2013) Un procedimiento de escisión de un secuencia de reconocimiento diana de ADN bicatenario en una célulaeucariota que comprende: introducir en dicha célula eucariota un ácido nucleico que codifica una meganucleasa o una proteína meganucleasa, en el que dicha meganucleasa escinde dicha secuencia de reconocimiento diana de ADN bicatenario, y en el que dicha meganucleasa es una meganucleasa recombinante que comprende: un polipéptido que tiene al menos el 85% de similitud de secuencias con los residuos 2-153 de lameganucleasa I-CreI de SEC ID Nº: 1, y que tiene especificidad por un medio sitio de la secuencia 15 de reconocimiento que se diferencia al menos unpar de bases de un medio sitio dentro de una secuencia de reconocimiento de la meganucleasa I-CreIseleccionada del grupo…

(05/09/2013) LA INVENCION TRATA DE PROCEDIMIENTOS PARA OPTIMIZACION DE LA EXPRESION GENICA EN CELULAS. UN PRIMER ASPECTO TRATA DE UN PROCEDIMIENTO PARA VARIAR LA EXPRESION DE UN GEN DIANA QUE SE ENCUENTRA DE MANERA ENDOGENA EN UNA CELULA EUCARIOTICA MEDIANTE LA INTERRUPCION DE UNA SECUENCIA HETEROLOGA DE CONTROL DE EXPRESION EN EL GENOMA DE LA CELULA MEDIANTE UNA RECOMBINACION HOMOLOGA, ASI COMO LA SEPARACION DEL DNA EXTRAÑO INSERTADO MEDIANTE UNA RECOMBINASA ESPECIFICA DE LUGAR Y SU SUSTITUCION MEDIANTE OTRAS SECUENCIAS HETEROLOGAS DE CONTROL DE EXPRESION Y/O GENES DE AMPLIFICACION. ADEMAS TRATA LA INVENCION DE LA INTRODUCCION DE UNA O VARIAS SECUENCIAS DE ACIDO NUCLEICO, A LAS CUALES SE UNE UNA PROTEINA DE UN ACTIVADOR O UN COMPLEJO DE PROTEINA DE ACTIVADOR, P. E. UN…

(13/08/2013) Un método para aumentar la tolerancia a la sequía o la tolerancia a la sal en una planta, que comprende hacer que se sobreexprese una cofactor de molibdeno sulfurasa que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 en la planta.

(12/04/2013) Un método para aumentar la tolerancia a la sal en una planta, y el método comprende, a. introducir en la planta un polinucleótido que codifica un polipéptido transportador Na+/H+ truncado en elextremo C-terminal, que cuando se expresa confiere una tolerancia incrementada a la sal en la planta; y en elque el polipéptido transportador truncado consiste en una secuencia de aminoácidos que es: i. al menos un 80% idéntica a SEQ ID Nº:2 a lo largo de toda la longitud del polipéptido transportadortruncado; y ii. menor de una longitud de 475 aminoácidos; y b. seleccionar una planta que exhibe una tolerancia incrementada a la sal en comparación con una planta enla…

(11/03/2013) Célula huésped expresando una proteína dependiente de la vitamina K de interés, dicha célula huésped siendotransfectada con un constructo de polinucleótido para codificar la proteína dependiente de la vitamina K de interés;donde dicha célula huésped comprende: (a) un gen endógeno interrumpido codificando la proteína S; (b) un constructo de polinucleótido de siRNA apuntando a un RNAm que codifica la proteína S expresadaendógenamente por la célula huésped; o (c) un factor de transcripción siendo una proteína de dedo de zinc enlazando con un elemento de ADN del genque codifica la proteína S endógena; y donde dicha célula huésped expresa una cantidad inferior de proteína…

(06/02/2013) Un método para inducir la recombinación homóloga en una célula que comprende un ácido nucleico diana,comprendiendo el método : la introducción en una célula de un primer ácido nucleico de 5 interés que comprende una secuencia homóloga al ácidonucleico diana de longitud suficiente como para inducir la recombinación homóloga y donde el primer ácido nucleico deinterés es un ADN de cadena única o un ADN que comprende un extremo 3' protuberante, donde la célula comprendeun ácido nucleico que codifica un polipéptido de unión a ADN de cadena única que funciona en la recombinaciónhomóloga de reparación de roturas bicatenarias, operativamente unido al promotor PL, y la inducción de una expresión suficiente del ácido nucleico que codifica…

(19/09/2012) Una bacteria termófila del género Bacillus que carece de actividad de lactato deshidrogenasa y que tiene actividadde piruvato formiato liasa, caracterizada porque la bacteria termófila contiene un gen que codifica una formiatodeshidrogenasa ligada a NAD.

(22/08/2012) Un polinucleotido aislado que comprende una secuencia de nucleotidos que comprende al menos un primer sitiode recombinacion FRT que comprende la SEC ID No 21 y un segundo sitio de recombinacion FRT que comprende la5 SEC ID No 39.

(13/06/2012) NORMALMENTE LOS GENES TRANSCRIPCIONALMENTE INACTIVOS EN UNA LINEA CELULAR EUCARIOTICA PUEDEN SER ACTIVADOS PARA EXPRESION MEDIANTE LA INSERCION DE UN ELEMENTO REGULADOR DE ADN QUE ES CAPAZ DE PROMOVER LA EXPRESION DE UN PRODUCTO GENETICO NORMALMENTE EXPRESADO EN ESA CELULA, EL ELEMENTO REGULADOR SIENDO INSERTADO PARA ESTAR OPERATIVAMENTE UNIDO AL GEN NORMALMENTE INACTIVO EN CUESTION. LA INSERCION SE REALIZA POR MEDIO DE RECOMBINACION HOMOLOGA, UTILIZANDO UNA CONSTRUCCION DE ADN QUE INCLUYA UN SEGMENTO DE ADN DEL GEN NORMALMENTE INACTIVO ("ADN DIANA") Y EL ELEMENTO REGULADOR DE ADN PARA INDUCIR LA TRANSCRIPCION. LA TECNICA TAMBIEN…

(13/06/2012) Una célula o un mamífero no humano genéticamente modificado, que se caracteriza porque no comprende una secuencia de ácido nucleico que en sí misma codifique cualquiera de los polipéptidos del locus de la región constante de cadena pesada de inmunoglobulinas endógenos, y porque están presentes las secuencias de ácidos nucleicos de una o más regiones variables de IgH endógenas, de uno o más segmentos D de IgH endógenos, y de uno o más segmentos J de IgH endógenos.

(05/06/2012) Sistema de transposición de transposon Mboumar. Sistema de transposición que comprende un péptido obtenido de Messor bouviri de forma recombinante y sus usos, incluyendo un método para la generación de transgénesis y mutagénesis aleatoria en el genoma de células procariotas o eucariotas.

(22/05/2012) Procedimiento de sustitución de un gen, mediante administración dirigida de un ADN, denominado ADN de inserción, constituido por una parte de un gen, susceptible de volverse funcional o más eficaz cuando se recombina con un ADN de complemento para proporcionar entonces un gen recombinante completo en el genoma de una célula eucariota, comprendiendo dicho procedimiento: - la introducción en unas células eucariotas que no son ni células germinales humanas, ni células embrionarias humanas, de un vector que contiene una inserción que comprende a su vez el ADN de inserción, y dos secuencias denominadas "flanqueantes" a ambos lados del ADN de inserción, respectivamente homólogas a dos secuencias genómicas que lindan con el sitio de inserción deseado en un gen seleccionado, denominado gen receptor y que contiene el ADN de complemento; -…

(22/05/2012) Un ácido nucleico que codifica para la Proteína Relacionada con el Estrés de la Proteína Fosfatasa en donde el ácido nucleico que codifica para PPSRP comprende un polinucleótido seleccionado de entre el grupo que consiste de a) el polinucleótido como se define en la SEQ ID NO: 2; b) un polinucleótido que codifica para una Proteína Relacionada con el Estrés de la Proteína Fosfatasa (PPSRP), en donde la PPSRP es Proteína Fosfatas.

(16/05/2012) Un método para fabricar la proteína NGF-B humana a gran escala, caracterizado por que comprende las etapasde: 1) sustituir el gen NGF-B de un ratón por el gen NGF-B humano utilizando las técnicas de recombinaciónhomóloga, haciendo que el ratón así obtenido exprese el gen NGF-B humano y fabricando de ese modo laproteína NGF-B humana, 2) extraer proteína NGF-B humana de las glándulas submandibulares, que puede expresar la proteínaNGF-B humana, del ratón obtenido en la etapa 1).

(09/05/2012) Ratón deficiente en c-Jun y JunB en los queratinocitos debido a la deleción de los genes c-Jun y JunB en los queratinocitos.

(09/05/2012) Una variante de l-Crel, caracterizada porque uno de los dos monomeros de l-Crel tiene al menos dos sustituciones, una en cada uno de los dos subdominios funcionales del dominio del nucleo de LAGLlDADG situado respectivamente entre las posiciones 26 a 40 y 44 a 77 de l-Crel, siendo dicha variante capaz de escindir una secuencia de ADN diana procedente del locus ROSA26 de raton, y que es obtenible mediante un procedimiento que comprende al menos las etapas de: (a) construir una primera serie de variantes de l-Crel que tengan al menos una sustitucion en el primer subdominio funcional del dominio del nucleo de LAGLlDADG situado entre las posiciones 26 a 40 de l-Crel, (b) construir una segunda serie de variantes de l-Crel que tengan al menos una sustitucion en un segundo subdominio funcional del dominio del nucleo de LAGLlDADG…

(23/04/2012) Una proteína aislada que comprende: a) la secuencia de aminoácidos de Evasina-3 (SEQ ID NO: 5); b) la secuencia de aminoácidos de Evasina-3 madura (SEQ ID NO: 6); c) la secuencia de aminoácidos de Evasina-3-HIS (SEQ ID NO: 17); d) la secuencia de aminoácidos de Evasina-3-HIS madura (SEQ ID NO: 18); e) la secuencia de aminoácidos de Met-Evasina-3 madura (SEQ ID NO: 26); o f) la secuencia de aminoácidos de Evasina-3 (SEQ ID NO: 5) en la que un residuo de cisteína en la posición correspondiente a los residuos 48, 52, 59, 63, 65 ó 76 o la asparagina en la posición 51 ó 82 se ha sustituido.

(21/03/2012) Un procedimiento para humanizar un ratón para un gen de interés, que comprende: a) incorporar un par de sitios de recombinación específica de sitio en el genoma murino mediante recombinación homóloga, de manera que la secuencia diana de genes murinos que se vaya a reemplazar esté flanqueada a cada lado por un sitio de recombinación; en el que al menos uno de los dos sitios de recombinación se crean para que sean contiguos a una secuencia de genes humanos de reemplazo; y siendo dicha secuencia de genes humanos de reemplazo colocada para que dicho sitio de recombinación se encuentre entre dicha secuencia de genes humanos de reemplazo y dicha secuencia diana de genes murinos; b) realizar la recombinación entre los sitios de recombinación específica de sitio,…

(14/03/2012) Un monómero de meganucleasa recombinante que comprende: un polipéptido que tiene 85 % de similitud de secuencia con los restos 2-153 de la meganucleasa I-CreI deSEC ID Nº 1; en el que la afinidad para formación de dímeros se ha alterado por al menos una modificación correspondientea una sustitución seleccionada del grupo que consiste en: (a) sustitución de K7, K57 o K96 con D o E; o (b) sustitución de E8 o E61 con K o R.

(17/05/2011) Una composición que comprende una construcción de ácido nucleico que comprende un transgén flanqueado por dos repeticiones terminales y un ácido nucleico que codifica una enzima de integración bajo el control de un elemento promotor, en la que la enzima de integración es una enzima de integración quimérica que comprende un dominio de unión al ADN específico de anfitrión y en la que el ácido nucleico que codifica el transgén y el ácido nucleico que codifica la enzima de integración quimérica son el mismo ácido nucleico, y en la que la enzima de integración quimérica es una transposasa

(28/03/2011) Un procedimiento in vitro de integración sitioespecífica de una secuencia de polinucleótidos de interés en un genoma de una célula de un organismo multicelular, comprendiendo dicho procedimiento: introducir (i) una construcción directora circular que comprende un primer sitio de recombinación y la secuencia de polinucleótidos de interés, y (ii) una recombinasa alterada sitioespecífica unidireccional en la célula, en el que el genoma de dicha célula comprende un segundo sitio de recombinación natural para el genoma y la recombinación entre el primer y el segundo sitio de recombinación se facilita por la recombinasa alterada, en el que dicho primer sitio de recombinación es un sitio de recombinación attB y dicho segundo sitio de recombinación es un pseudositio de…

(02/07/2010) Un procedimiento no terapéutico para integrar aleatoriamente un polinucleótido en un genoma de la célula huésped mediante preparación en la célula huésped de dicho polinucleótido lineal que tiene extremos 5'' y 3'' libres a partir de un vector, en el que dicho procedimiento comprende: a) Introducir en dicha célula huésped un vector que no tiene extremos 5'' y 3'' libres y que comprende dicho polinucleótido, comprendiendo dicho vector al menos un sitio de escisión que no se encuentra en el genoma de la célula huésped; b) producir la escisión de dicho(s) sitio(s) en dicha célula huésped, creando o liberando así dicho polinucleótido en una forma lineal que tiene extremos 5'' y 3'' libres a partir de dicho vector en dicha célula…

(05/05/2010) Un método para movilizar un replicón vírico de un T-ADN, que comprende: a) proporcionar un replicón Agrobacterium que comprende un T-ADN, que contiene un replicón vírico flanqueado al repetir directamente sitios objetivo para una recombinasa específica de sitio; y b) infectar una célula de una planta con un Agrobacterium que lleva dicho replicón Agrobacterium bajo condiciones que permiten la transferencia de dicho T-ADN y la expresión de dicha recombinasa específica de sitio en dicha célula; en donde dicha célula, dicho T-ADN, o dicho replicón vírico comprende una secuencia de nucleótido que codifica dicha recombinasa o un fragmento activo o una variante activa de la misma, y dicha secuencia de nucleótido se liga operablemente a un promotor que controla la expresión en dicha célula

(12/03/2010) Procedimiento para la recombinación específica de secuencia de ADN en una célula eucariota in vitro que comprende a) la introducción en una célula de una primera secuencia de ADN que comprende: una secuencia attB según SEQ ID Nº:1 o su homólogo, o una secuencia attP según SEQ ID Nº:2 o su homólogo, o una secuencia attL según SEQ ID Nº:3 o su homólogo, o una secuencia attR según SEQ ID Nº:4 o su homólogo, b) la introducción de una segunda secuencia de ADN en la célula que comprende: una secuencia attB según SEQ ID Nº:1 o su homólogo, o una secuencia attP según SEQ ID Nº:2 o su homólogo, o una secuencia attL según SEQ ID Nº:3 o su homólogo, o una secuencia attR según SEQ ID Nº:4 o su homólogo, y c) la realización…