Compuestos 1H-pirazol 3,4-disustituidos y su uso como moduladores de las quinasas dependientes de ciclina (CDK) y glucógeno sintasa quinasa-3 (GSK-3).

Una combinación que comprende:

(i) un compuesto de la fórmula (II):

**Fórmula**

o sales o tautómeros o N-óxidos o solvatos de éste;

en el que

Y es un enlace o una cadena alquileno con una longitud de 1, 2 ó 3 átomos de carbono;

R1 es un grupo carbocíclico o heterocíclico que tiene de 3 a 12 miembros en el anillo, en el que los grupos carbocíclico o heterocíclico no están sustituidos o están sustituidos con uno o más grupos sustituyentes R10;

R2 es hidrógeno o metilo;

R3 se selecciona de grupos carbocíclicos y heterocíclicos no aromáticos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo, en los que los grupos carbocíclicos o heterocíclicos no están sustituidos o están sustituidos con uno o más grupos sustituyentes R10; y

R10 se selecciona de halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, mono- o di-hidrocarbilamino C1-4, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo; un grupo Ra-Rb en el que Ra es un enlace, O, CO, X1C(X2), C(X2)X1, X1C(X2)X1, S, SO, SO2, NRc, SO2NRc o NRcSO2; y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo, y un grupo alquilo C1-8 sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi, amino, mono-o di-hidrocarbilamino C1-4, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo;

Rc se selecciona de hidrógeno e hidrocarbilo C1-4; y

X1 es O, S o NRc y X2 es ≥O, ≥S o ≥NRc;

y con la condición de que cuando el grupo sustituyente R10 comprende o incluye un grupo carbocíclico o heterocíclico, dicho grupo carbocíclico o heterocíclico puede no estar sustituido o puede estar él mismo sustituido con uno o más grupos sustituyentes adicionales R10 y en el que (a) dichos grupos sustituyentes adicionales R10 incluyen grupos carbocíclicos o heterocíclicos, que no están en sí mismos sustituidos adicionalmente; o (b) los dichos sustituyentes adicionales no incluyen grupos carbocíclicos o heterocíclicos pero se seleccionan sin embargo de los grupos listados anteriormente en la definición de R10; y

(ii) uno o más agentes terapéuticos adicionales.

Compuestos 1H-pirazol 3, 4-disustituidos y su uso como moduladores de las quinasas dependientes de ciclina (CDK) y glucógeno sintasa quinasa-3 (GSK-3)

Esta invención se refiere a compuestos pirazol que inhiben o modulan la actividad de las quinasas dependientes de ciclina (CDK) y glucógeno sintasa quinasa-3 (GSK-3) , al uso de los compuestos en el tratamiento o profilaxis de estados patológicos o afecciones mediadas por quinasas dependientes de ciclinas y glucógeno sintasa quinasa-3, y a nuevos compuestos que tienen actividad inhibidora o moduladora de quinasas dependientes de ciclinas o glucógeno sintasa quinasa-3. También se proporcionan composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos e intermedios químicos nuevos.

Antecedentes de la Invención Las proteínas quinasas constituyen una gran familia de enzimas estructuralmente relacionadas que son responsables del control de una amplia variedad de procesos de transducción de señales en la célula (Hardie, G. y Hanks, S. (1995) The Protein Kinase Facts Book. I y II, Academic Press, San Diego, CA) . Las quinasas pueden clasificarse en familias por los sustratos que fosforilan (por ejemplo, proteína-tirosina, proteína-serina/treonina, lípidos, etc.) . Se han identificado restos de secuencia que corresponden generalmente a cada una de estas familias de quinasas (por ejemplo, Hanks, S.K., Hunter, T., FASEB J., 9:576-596 (1995) ; Knighton, et al., Science, 253:407414 (1991) ; Hiles, et al., Cell, 70:419-429 (1992) ; Kunz, et al., Cell, 73:585-596 (1993) ; Garcia-Bustos, et al., EMBO J., 13:2352-2361 (1994) ) .

Las proteínas quinasas pueden caracterizarse por sus mecanismos de regulación. Estos mecanismos incluyen, por ejemplo, autofosforilación, transfosforilación por otras quinasas, interacciones proteína-proteína, interacciones proteína-lípido e interacciones proteína-polinucleótido. Una proteína quinasa individual puede estar regulada por más de unmecanismo.

Las quinasas regulan muchos procesos celulares diferentes incluyendo, pero no limitado a, proliferación, diferenciación, apoptosis, motilidad, transcripción, traducción y otros procesos de señalización, mediante la adición de grupos fosfato a proteínas diana. Estos eventos de fosforilación actúan como interruptores moleculares de activación/inactivación que pueden modular o regular la función biológica de la proteína diana. La fosforilación de proteínas diana ocurre en respuesta a una variedad de señales extracelulares (hormonas, neurotransmisores, factores de crecimiento y diferenciación, etc.) , eventos del ciclo celular, estreses medioambientales o nutricionales, etc. La proteína quinasa apropiada funciona en rutas de señalización para activar o inactivar (bien directamente o indirectamente) , por ejemplo, una enzima metabólica, proteína reguladora, receptor, proteína del citoesqueleto, canal o bomba de iones o factor de transcripción. La señalización incontrolada debida a un control defectuoso de la fosforilación de proteínas se ha implicado en varias enfermedades, incluyendo, por ejemplo, inflamación, cáncer, alergia/asma, enfermedades y afecciones del sistema inmune, enfermedades y afecciones del sistema nervioso central y angiogénesis.

El proceso de la división celular eucariota puede dividirse de manera general en una serie de fases secuenciales denominadas G1, S, G2 y M. Se ha mostrado que la progresión correcta a través de las diferentes fases del ciclo celular es críticamente dependiente de la regulación espacial y temporal de una familia de proteínas conocidas como quinasas dependientes de ciclinas (CDK) y un conjunto diverso de sus equivalentes proteicos cognados denominados ciclinas. Las CDK son proteínas quinasas serina-treonina homólogas a cdc2 (también conocida como CDK1) que son capaces de utilizar ATP como un sustrato en la fosforilación de diversos polipéptidos en un contexto dependiente de la secuencia. Las ciclinas son una familia de proteínas caracterizada por una región de homología,

que contiene aproximadamente 100 aminoácidos, denominada la “caja ciclina” que se usa en la unión a, y para definir la selectividad para, proteínas equivalentes específicas de CDK.

La modulación de los niveles de expresión, velocidades de degradación, y niveles de activación de las diferentes CDK y ciclinas a lo largo del ciclo celular da lugar a la formación cíclica de una serie de complejos CDK/ciclina, en los que las CDK son enzimáticamente activas. La formación de estos complejos controla el paso a través de puntos de control del ciclo celular discretos y de esta manera permite que el proceso de la división celular continúe. El fracaso de satisfacer los criterios bioquímicos pre-requeridos en un punto de control del ciclo celular dado, es decir, fracaso para formar un complejo CDK/ciclina requerido, puede dar lugar a la parada del ciclo celular y/o a la apoptosis celular. La proliferación celular aberrante, como se manifiesta en el cáncer, puede deberse frecuentemente a la pérdida de un control correcto del ciclo celular. La inhibición de la actividad enzimática de las CDK proporciona por lo tanto un medio mediante el cual se puede parar la división de y/o eliminar las células que se dividen anormalmente. La diversidad de CDK, y complejos CDK, y sus papeles críticos en la mediación del ciclo celular, proporciona un amplio espectro de dianas terapéuticas potenciales seleccionadas tomando como base un razonamiento bioquímico definido.

La progresión de la fase G1 a la fase S del ciclo celular está regulada principalmente por CDK2, CDK3, CDK4 y CDK6 mediante la asociación con los miembros de las ciclinas de tipo D y E. Las ciclinas de tipo D parecen instrumentales para permitir el paso más allá del punto de restricción de G1, mientras que el complejo CDK2/ciclina

E es clave para la transición de la fase G1 a S. Se piensa que la progresión posterior a través de la fase S y la entrada en G2 requiere el complejo CDK2/ciclina A. Tanto la mitosis como la transición de fase G2 a M que la desencadena, están reguladas por complejos de CDK1 y lasciclinas de tipo A y B.

Durante la fase G 1 la proteína del Retinoblastoma (Rb) , y proteínas de bolsillo relacionadas tales como p130, son sustratos para los complejos CDK (2, 4, y 6) /ciclina. La progresión a través de G1 está facilitada en parte por la hiperfosforilación, y por lo tanto inactivación, de Rb y p130 por los complejos CDK (4/6) /ciclina-D. La hiperfosforilación de Rb y p130 causa la liberación de factores de transcripción, tales como E2F, y así la expresión de genes necesarios para la progresión a través de G1 y para la entrada en la fase S, tal como el gen para la ciclina E. La expresión de la ciclina E facilita la formación del complejo CDK2/ciclina que amplifica, o mantiene, los niveles de E2F mediante fosforilación adicional de Rb. El complejo CDK2/ciclina E también fosforila otras proteínas necesarias para la replicación del ADN, tales como NPAT, que se ha implicado en la biosíntesis de histona. La progresión en G1 y la transición G1/S también están reguladas mediante la ruta estimulada por mitógeno Myc, que se alimenta en la ruta CDK2/ciclina E. CDK2 también está conectada con la ruta de respuesta a daño en el ADN mediada por p53 mediante la regulación de p53 de los niveles de p21. p21 es un inhibidor de proteína de CDK2/ciclina E y es así capaz de bloquear, o retrasar, la transición G1/S. El complejo CDK2/ciclina E puede representar así un punto en el que los estímulos bioquímicos de las rutas Rb, Myc y p53 se integran en algún grado. CDK2 y/o el complejo CDK2/ciclina E representan por lo tanto buenas dianas para terapéuticos diseñados para parar, o recuperar el control de, el ciclo celular en células que se dividen deforma aberrante.

El papel exacto de CDK3 en el ciclo celular no está claro. Hasta ahora no se ha identificado ningún equivalente ciclina cognado, pero una forma negativa dominante de CDK3 retrasa a las células en G1, sugiriendo de esta manera que CDK3 tiene un papel en la regulación de la transición G1/S.

Aunque se ha implicado a la mayor parte de las CDK en la regulación del ciclo celular existe evidencia de que determinados miembros de la familia de CDK están implicados en otros procesos bioquímicos. Esto se ejemplifica por CDK5 que es necesaria para el desarrollo neuronal correcto y que también se ha implicado en la fosforilación de varias proteínas neuronales tales como Tau, NUDE-1, sinapsina1, DARPP32 y el complejo Munc18/Sintaxina1A. La CDK5 neuronal se activa convencionalmente por unión a las proteínas p35/p39. La actividad de CDK5 puede desrregularse, sin embargo, por la unión de p25, una versión truncada de p35. La conversión de p35 a p25, y la desrregulación... [Seguir leyendo]

1. Una combinación que comprende:

(i) un compuesto dela fórmula (II) :

o sales o tautómeros o N-óxidos o solvatos de éste;

en el que Y es un enlace o una cadena alquileno con una longitud de 1, 2 ó 3 átomos de carbono;

R1 es un grupo carbocíclico o heterocíclico que tiene de 3 a 12 miembros en el anillo, en el que los grupos carbocíclico o heterocíclico no están sustituidos o están sustituidos con uno omás grupos sustituyentes R10;

R2 es hidrógeno o metilo;

R3 se selecciona de grupos carbocíclicos y heterocíclicos no aromáticos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo, en los que los grupos carbocíclicos o heterocíclicos no están sustituidos o están sustituidos con uno o más grupos sustituyentes R10; y

R10 se selecciona de halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, amino, mono-o di-hidrocarbilamino C1-4, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo; un grupo Ra-Rb en el que Ra es un enlace, O, CO, X1C (X2) , C (X2) X1, X1C (X2) X1, S, SO, SO2, NRc, SO2NRc o NRcSO2; y Rb se selecciona de hidrógeno, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo, y un grupo alquilo C1-8 sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi, amino, mono-o di-hidrocarbilamino C1-4, grupos carbocíclicos y heterocíclicos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo;

Rc se selecciona de hidrógeno e hidrocarbilo C1-4; y

X1 es O, S o NRc y X2 es =O, =S o =NRc;

y con la condición de que cuando el grupo sustituyente R10 comprende o incluye un grupo carbocíclico o heterocíclico, dicho grupo carbocíclico o heterocíclico puede no estar sustituido o puede estar él mismo sustituido con uno o más grupos sustituyentes adicionales R10 y en el que (a) dichos grupos sustituyentes adicionales R10 incluyen grupos carbocíclicos o heterocíclicos, que no están en sí mismos sustituidos adicionalmente; o (b) los dichos sustituyentes adicionales no incluyen grupos carbocíclicos o heterocíclicos pero se seleccionan sin embargo de los grupos listados anteriormente en la definición de R10; y

(ii) uno omás agentes terapéuticos adicionales.

2. Una combinación según lareivindicación 1 en la que R2 es hidrógeno.

3. Una combinación según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores en la que R1 es un grupo carbocíclico o heterocíclico monocíclico no sustituido o sustituido en el que los grupos carbocíclico y heterocíclico están sustituidos con uno o más grupos sustituyentes R10º R10a; en el que R10 es como se ha definido en la reivindicación 1 y R10a se selecciona de halógeno, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxi, un grupo Ra-Rb en el que Ra es un enlace, O, CO, X3C (X4) , C (X4) X3, X3C (X4) X3, S, SO, o SO2, y Rb se selecciona de hidrógeno y un grupo alquilo C1-8 sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, halógeno, ciano, nitro, carboxi y grupos carbocíclicos o heterocíclicos monocíclicos no aromáticos que tienen de 3 a 6 miembros en el anillo.

4. Una combinación según lareivindicación 1 en la que el compuesto de fórmula (II) tiene la fórmula (IV) :

o sales o tautómeros o N-óxidos o solvatos de éste; en la que R1 y R2 son como se han definido en una cualquiera de las reivindicaciones anteriores; un segundo enlace opcional puede estar presente entre los átomos de carbono numerados 1 y 2;

uno de U y T se selecciona de CH2, CHR13, CR11R13, NR14, N (O) R15, O y S (O) t; y el otro de U y T se selecciona de NR14, O, CH2, CHR11, C (R11) 2, y C=O; r es 0, 1, 2, 3 ó 4; t es 0, 1 ó 2; R11 se selecciona de hidrógeno, halógeno, alquilo C1-3 y alcoxi C1-3;

R13 se selecciona de hidrógeno, NHR14, NOH, NOR14 y Ra-Rb; R14 se selecciona de hidrógeno y Rd-Rb;

Rd se selecciona de un enlace, CO, C (X2) X1, SO2 y SO2NRc; Ra, Rb y Rc son como se han definido en una cualquiera de las reivindicaciones anteriores; y R15 se selecciona de hidrocarbilo C1-4 saturado sustituido opcionalmente con hidroxi, alcoxi C1-2, halógeno o un grupo carbocíclico o heterocíclico monocíclico de 5 ó 6 miembros, con la condición de que U y T no pueden ser O simultáneamente.

5. Una combinación según lareivindicación 4 en la que el compuesto de fórmula (II) tiene la fórmula (Va) :

o sales o tautómeros o N-óxidos o solvatos de éste;

en la que R14a se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-4 sustituido opcionalmente con flúor, ciclopropilmetilo, fenilalquilo-C1-2, alcoxicarbonilo C1-4, fenil-alcoxicarbonilo C1-2, alcoxi-C1-2-alquilo-C1-2, y alquilsulfonilo C1-4, en el que los restos fenilo cuando están presentes están sustituidos opcionalmente con uno a tres sustituyentes seleccionados de flúor, cloro, alcoxi C1-4 sustituido opcionalmente con flúor o alcoxi C1-2, y alquilo C1-4 sustituido opcionalmente con flúor o alcoxi-C1-2;

w es 0, 1, 2 ó 3;

R2 es hidrógeno o metilo;

R11 y r son como se definen en una cualquiera de las reivindicaciones 17 a 19; y

R19se selecciona de flúor; cloro; alcoxi C1-4 sustituido opcionalmente con flúor o alcoxi-C1-2; y alquilo C1-4 sustituido opcionalmente con flúor o alcoxi-C1-2.

6. Una combinación según lareivindicación 1 en la que el compuesto de fórmula (II) tiene la fórmula (VIb) :

o sales o tautómeros o N-óxidos o solvatos de éste; en la que R20 se selecciona de hidrógeno ymetilo; R21a se selecciona deflúor y cloro; y R22a se selecciona deflúor, cloro y metoxi.

7. Una combinación según la reivindicación 6 en la que el compuesto de fórmula (II) es piperidin-4-ilamida del ácido 4- (2, 6-dicloro-benzoilamino) -1H-pirazol-3-carboxílico o una sal de éste.

8. Una combinación según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en la que el uno o más agentes terapéuticos adicionales se seleccionan de agentes anticancerososincluyendo: -inhibidores detopoisomerasa -agentes alquilantes -antimetabolitos -ligantes de ADN -inhibidores demicrotúbulos (agentes dirigidos a latubulina) -anticuerposmonoclonales

- inhibidores dela transducción de la señal -radioterapia.

9. Una combinación según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en la que el uno o más agentes terapéuticos adicionales se seleccionan de agentes anticancerosos incluyendo cisplatino, ciclofosfamida, doxorrubicina, irinotecán, fludarabina, 5FU, taxanos, y mitomicina C.

10. Una combinación según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en la que el compuesto de fórmula (II) y el uno omás agentes terapéuticos adicionales se administran bien simultáneamente o secuencialmente.

11. Una combinación según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en la que el compuesto de fórmula (II) y uno, dos, tres, cuatro o más agentes terapéuticos adicionales se formulan conjuntamente en una forma de dosificación que contiene dos, tres, cuatro omás agentes terapéuticos.

12. Una combinación según cualquiera de las reivindicaciones anteriores para uso en medicina, por ejemplo para el tratamiento de un cáncer.

13. Una composición farmacéutica (por ejemplo, formulación) que comprende al menos un compuesto de fórmula (II) como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 junto con uno o más vehículos, adyuvantes, excipientes, diluyentes, materiales de relleno, tampones, estabilizadores, conservantes, lubricantes farmacéuticamente aceptables, y otros agentes terapéuticos o profilácticos adicionales.

14. Un compuesto de fórmula (II) como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 para uso en el

tratamiento de una enfermedad que es: -infecciones virales, por ejemplo herpes virus, poxvirus, virus de Epstein-Barr, virus Sindbis, adenovirus, HIV, HPV, HCV y HCMV; prevención del desarrollo del SIDA en individuos infectados por VIH; o

-diabetes mellitus tipo II o no dependiente de insulina; o -enfermedades autoinmunes; o -traumatismo craneal; o -ictus; o -epilepsia; o -trastornos neurodegenerativos, por ejemplo enfermedad de Alzheimer, demencia relacionada con SIDA,

enfermedad de Parkinson, esclerosis lateral amiotrófica, retinitis pigmentosa, atrofia muscular espinal y degeneración cerebelar o tal como de Alzheimer, enfermedad de neuronas motoras, parálisis supranuclear progresiva, degeneración corticobasal y enfermedad de Pick; o

-enfermedades inflamatorias crónicas, por ejemplo lupus eritematoso sistémico, glomerulonefritis mediada por autoinmunidad, artritis reumatoide, psoriasis, enfermedad inflamatoria del intestino, y diabetes mellitus autoinmune; 10 o -enfermedades cardiovasculares por ejemplo hipertrofia cardiaca, restenosis, y aterosclerosis, o tal como arritmia; o -glomerulonefritis; o -síndromemielodisplásico; o -daño isquémico asociado con infartos demiocardio, ictus y daño por reperfusión; .

15. enfermedadeshepáticasinducidasportoxinasorelacionadasconelalcohol;o -enfermedades hematológicas, por ejemplo, anemia crónicay anemia aplásica; o -enfermedades degenerativas del sistemamúsculo-esquelético, por ejemplo, osteoporosis y artritis, o -rinosinusitis sensible a aspirina; o -fibrosis quística; .

20. esclerosismúltiple;o -enfermedades del riñón; o -dolor por cáncer; o -cáncer, en particular tumores RB+ve.