COMPUESTOS DE AZUFRE COMO INHIBIDORES DE LA SERINA PROTEASA NS3 DEL VIRUS DE LA HEPATITIS C.

Un compuesto, o un enantiómero, estereoisómero, rotámero, tautómero,

o racemato de dicho compuesto, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o de dicho enantiómero, estereoisómero, rotámero, tautómero, o racemato, dicho compuesto que tiene la estructura:

Campo de la invención

La presente invención se relaciona con nuevos inhibidores de la proteasa del virus de la hepatitis C (HCV); composiciones farmacéuticas que contienen uno o más de dichos inhibidores; procedimientos para la preparación de dichos inhibidores; y con procedimientos para el uso de dichos inhibidores en el tratamiento de la hepatitis C y 5 trastornos relacionados. Esta invención además desvela nuevos compuestos como inhibidores de la serina proteasa de HCV NS3/NS4a.

Antecedentes de la invención

El virus de la hepatitis C (HCV) es un virus de ARN de cadena simple sentido (+) que ha sido involucrado como el principal agente causante de la hepatitis ni A ni B (NANBH), en particular, de la NANBH asociada a sangre (BB-10 NANBH) (véase la Publicación de Solicitud de Patente Internacional Núm. WO 89/04669 y la Publicación de Solicitud de Patente Europea Núm EP 381 216). La NANBH se distingue de otros tipos de enfermedades hepáticas inducidas por virus, tales como el virus de la hepatitis A (HAV), el virus de la hepatitis B (HBV ), el virus de la hepatitis delta (HDV ), citomegalovirus (CMV) y el virus de Epstein-Barr (EBV ), así como otras formas de enfermedades hepáticas, tales como alcoholismo y cirrosis biliar primaria. 15

Recientemente, se ha identificado, clonado y expresado una proteasa de HCV necesaria para el procesamiento de polipéptidos y la replicación viral, (véase, por ejemplo, la Patente U.S Núm 5.712.145). Esta poliproteína de aproximadamente 3000 aminoácidos contiene, desde el extremo terminal amino hasta el extremo terminal carboxi, una proteína de nucleocápside (C), proteínas de envoltura (E1 y E2) y varias proteínas no estructurales (NS1; 2; 3; 4a; 5a y 5b). NS3 es una proteína de aproximadamente 68 kda, codificada por alrededor de 1893 nucleótidos del genoma de 20 HCV, y tiene dos dominios distintos: (a) un dominio de serina proteasa que consiste en aproximadamente 200 de los aminoácidos N-terminales; y (b) un dominio de ATPasa dependiente de ARN en el extremo C-terminal de la proteína. La proteasa NS3 se considera un miembro de la familia de quimiotripsinas, debido a similitudes en la secuencia de proteína, en la estructura tridimensional general y el mecanismo de catálisis. Otras enzimas del tipo quimiotripsina son elastasa, factor Xa, trombina, tripsina, plasmina, uroquinasa, tPA y PSA. La serina proteasa de HCV NS3 es 25 responsable de la proteólisis del polipéptido (poliproteína) en las uniones NS3/NS4a, NS4a/NS4b, NS4b/NS5a y NS5a/NS5b, y en consecuencia, es responsable de la generación de cuatro proteínas virales durante la replicación viral. Esto ha convertido a la serina proteasa de HCV NS3 en una diana atractiva para la quimioterapia antiviral. Los compuestos de la invención pueden inhibir dicha proteasa. Además, pueden modular el procesamiento de polipéptido de virus de la hepatitis C (HCV) 30

Se ha determinado que la proteína NS4a, un polipéptido de aproximadamente 6 kda, es un cofactor para la actividad de serina proteasa de NS3. La autoescisión de la unión NS3/NS4a por la serina proteasa NS3/NS4a se produce en forma intramolecular (es decir, cis), mientras que los otros sitios de escisión son procesados en forma intermolecular (es decir, trans).

El análisis de los sitios de escisión naturales para la proteasa de HCV reveló la presencia de cisteína en P1 y 35 serina en P1', y que estos residuos están estrictamente conservados en las uniones NS4a/NS4b, NS4b/NS5a y NS5a/NS5b. La unión NS3/NS4a contiene una treonina en P1 y una serina en P1'. Se postula que la sustitución CysThr en NS3/NS4a explica la necesidad de procesamiento cis en lugar de trans en esta unión. Véase, por ejemplo, Pizzi et al. (1994) Proc. Natl. Acad. Sci (USA) 91:888-892, Failla et al. (1996) Folding & Design 1:35-42. El sitio de escisión de NS3/NS4a, además, es más tolerante a la mutagénesis, que los otros sitios. Véase, por ejemplo, Kollykhalov 40 et al (1994): J. Virol., 68: 7525-7533. Asimismo, se ha hallado que los residuos ácidos en la región corriente arriba del sitio de escisión son necesarios para la escisión eficaz. Véase, por ejemplo, Komoda et al. (1994): J. Virol., 68: 7351-7357.

Se ha informado que los inhibidores de la proteasa de HCV incluyen antioxidantes (véase la Publicación de Solicitud de Patente Internacional Núm. WO 98/14181), ciertos péptidos y análogos peptídicos (véase la Publicación de 45 Solicitud de Patente Internacional Nro. WO 98/17679; Landro et al (1997): Biochem., 36: 9340-9348; Ingallinella et al (1998): Biochem., 37: 8906-8914, Llinàs-Brunet et al (1998): Bioorg. Med. Chem. Lett., 8: 1713-1718), inhibidores basados en el polipéptido de 70 aminoácidos eglina c (Martin et al (1998): Biochem., 37: 11459-11468), inhibidores de afinidad seleccionados del inhibidor de tripsina secretora pancreática humana (hPSTI-C3) y repertorios de minicuerpos (MBip) (Dimasi et al (1997): J. Virol., 71: 7461-7469), cVHE2 (un fragmento de anticuerpo de dominio variable 50 “camelizado”) (Martin et al (1997): Protein Eng., 10: 607-614) y 1-antiquimiotripsina (ACT) (Elzouki et al) (1997): J. Hepat., 27: 42-28). Recientemente, se ha desvalado una ribozima diseñada para destruir selectivamente el ARN del virus de la hepatitis C (véase, BioWorld Today 9 (217): 4 (10 de noviembre de 1998)).

Además, se hace referencia a las Publicaciones PCT Nros. WO 98/17679, publicada el 30 de abril de 1998 (Vertex Pharmaceuticals Incorporated); WO 98/22496, publicada el 28 de mayo de 1998 (F. Hoffmann-La Roche AG); y 55 WO 99/07734, publicada el 18 de febrero de 1999 (Boehringer Ingelheim Canada Ltd.).

El HCV se ha involucrado en la cirrosis hepática y en la inducción del carcinoma hepatocelular. El pronóstico

de pacientes que sufren de la infección de HCV actualmente es malo. La infección de HCV es más difícil de tratar que otras formas de hepatitis, debido a la falta de inmunidad o remisión asociada con la infección de HCV. La información actual indica una tasa de supervivencia inferior al 50%, a los cuatro años posteriores al diagnóstico de cirrosis. Los pacientes diagnosticados con carcinoma hepatocelular extirpable localizado tienen una tasa de supervivencia de cinco años del 10-30%, mientras que aquellos con carcinoma hepatocelular no extirpable localizado tienen una tasa de 5 supervivencia de cinco años inferior al 1%.

Se hace referencia al documento WO 00/59929 (US 6.608.027, Cesionario: Boehringer Ingelheim (Canadá) Ltd.; publicada el 12 de octubre de 2000), que desvela derivados peptídicos de la fórmula:

Se hace referencia a A. Marchetti et al: Synlett, S1, 1000-1002 (1999), que describe la síntesis de análogos 10 bicíclicos de un inhibidor de proteasa de HCV NS3. Un compuesto desvelado en dicha publicación tiene la fórmula:

Se hace referencia también a W. Han et al: Bioorganic & Medicinal Chem. Lett., (2000), 10, 711-713, que describe la preparación de ciertas -cetoamidas, -cetoésteres y -dicetonas que contienen funcionalidades alilo y etilo.

Además, se hace referencia al documento WO 00/09558 (Cesionario: Boehringer Ingelheim Limited; publicado 15 el 24 de febrero de 2000), que desvela derivados peptídicos de la fórmula:

en la que los diversos elementos se definen en este documento. Un compuesto ilustrativo de dicha serie es:

Asimismo, se hace referencia al documento WO 00/09543 (Cesionario: Boehringer Ingelheim Limited; publicado el 24 de febrero de 2000), que desvela derivados peptídicos de la fórmula:

en la que los diversos elementos se definen en este documento. Un compuesto ilustrativo de dicha serie es: 5

Se hace referencia además al documento U.S. 6.608.027 (Boehringer Ingelheim, Canadá), que desvela inhibidores de proteasa NS3 del tipo:

en la que los diversos restos se definen en este documento.

Los tratamientos actuales para la hepatitis C contemplan interferón- (INF) y terapia de combinación con 5 ribavirina e interferón. Ver, por ejemplo, Beremguer et al (1998): Proc. Assoc. Am. Physicians, 110 (2): 98-112. Estos tratamientos poseen una baja tasa de respuesta sostenida y frecuentes efectos secundarios. Véase, por ejemplo, Hoofnagle et al (1997): N. Engl. J. Med., 336: 347. Actualmente, no hay vacuna para la infección de HCV.

Aun más, se hace...

1. Un compuesto, o un enantiómero, estereoisómero, rotámero, tautómero, o racemato de dicho compuesto, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o de dicho enantiómero, estereoisómero, rotámero, tautómero, o racemato, dicho compuesto que tiene la estructura:

2. Una composición farmacéutica que comprende como ingrediente activo cantidades terapéuticamente 5 efectivas de al menos un compuesto de la reivindicación 1 y al menos un portador farmacéuticamente aceptable.

3. La composición farmacéutica de la reivindicación 2 para su uso en el tratamiento de trastornos asociados con el virus de la hepatitis C (HCV").

4. La composición farmacéutica de la reivindicación 3, que adicionalmente contiene al menos un agente antiviral. 10

5. La composición farmacéutica de la reivindicación 4, que contiene adicionalmente al menos un interferón.

6. La composición farmacéutica de la reivindicación 5, en la que dicho al menos un agente antiviral es ribavirina y dicho al menos un interferón es -interferón o interferón pegilado.

7. Uso de una composición farmacéutica que comprende cantidades terapéuticamente efectivas de al menos un compuesto de la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para tratar trastornos asociados con el HCV. 15

8. El uso de la reivindicación 7, en el que dicha composición es para uso oral o subcutáneo.

9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso como un medicamento.

10. Uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos asociados con el virus de la hepatitis C.

11. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso en el tratamiento de trastornos asociados con 20 el virus de la hepatitis C.

12. Uso de acuerdo con la reivindicación 10, dicho medicamento comprende adicionalmente al menos un agente antiviral

13. Uso de acuerdo con la reivindicación 12, dicho medicamento contiene adicionalmente al menos un interferón. 25

14. Uso de acuerdo con la reivindicación 13 en el que dicho al menos un agente antiviral es ribavirina y dicho al menos un interferón es -interferón o interferón pegilado.