Uso de anticuerpo anti-CD81 para la preparación de una composición farmacéutica para prevenir,

mejorar o tratar enfermedad inflamatoria del intestino (EII)

Campo técnico

En este documento se desvela un procedimiento para cribar una sustancia eficaz para prevenir, mejorar o tratar enfermedades inflamatorias del intestino (denominadas algunas veces en lo sucesivo “EII”), la sustancia obtenida mediante el procedimiento y un agente para prevenir, mejorar o tratar EII que contiene la sustancia obtenida mediante el procedimiento o un anticuerpo anti-CD81 como principio activo.

Adicionalmente se desvela un marcador de enfermedad útil para diagnosticar enfermedades inflamatorias del intestino (EII) y un procedimiento de detección (procedimiento de diagnóstico) de EII usando el marcador de enfermedad.

Técnica anterior

Los intestinos son órganos que digieren y absorben los nutrientes y el agua esenciales para las actividades de la vida de los organismos. Entretanto, también son órganos que tienen una acción de inmunodefensa para excluir sustancias extrañas tales como patógenos y mantener la conservación de la vida controlando cualidades contradictorias de un modo bien equilibrado. Sin embargo, se sabe que cuando el equilibrio de estas funciones se convierte en anómalo, este equilibrio dinámico se rompe para inducir diversas enfermedades del intestino. Especialmente, con respecto a las enfermedades inflamatorias del intestino (abreviadas EII) cuyos pacientes han aumentado en número en los últimos años, una farmacoterapia usando preparaciones farmacéuticas de ácido 5aminosalicílico tales como sulfasalazina, esteroides y similares no puede proporcionar efectos terapéuticos satisfactorios. Por consiguiente, las enfermedades han sido tratadas por enterectomía, leucaféresis o similares y, por tanto, se han requerido agentes más eficaces.

Las enfermedades inflamatorias del intestino (EII) se agrupan, en vista de los estados patógenos de las mismas, en colitis ulcerosa (abreviada CU) y enfermedad de Crohn (abreviada EC). En los últimos años se ha sabido que las preparaciones farmacéuticas de proteínas tales como un anticuerpo anti-TNF son eficaces como agente terapéutico de enfermedad de Crohn (Lancet. 342, 173-174, 1993). Sin embargo, son agentes costosos y sólo se aplican a pacientes con resistencia a esteroides. El efecto contra la colitis ulcerosa también es débil. Por tanto, todavía no se ha presentado un tratamiento médico satisfactorio. Las enfermedades inflamatorias del intestino son enfermedades que repiten la remisión y el recrudecimiento, son muy pobres en QOL (=calidad de vida) y todavía tienen un bajo grado de satisfacción en lo referente a la farmacoterapia. Por consiguiente, el desarrollo de un agente terapéutico eficaz tiene una gran demanda en el cuidado médico.

Además, una reacción a la farmacoterapia varía con los pacientes individuales, y hay pacientes con enfermedad inflamatoria del intestino (EII) que no reaccionan a la farmacoterapia en todos los agentes terapéuticos que han sido actualmente usados. En vista del análisis de polimorfismo de genes y la sensibilidad a enfermedad, hay casos en los que se considera que el polimorfismo de interleucina-1 o el polimorfismo del gen NOD2 son un gen causal de enfermedad. Por tanto, en estudios médicos básicos está aclarándose que hay una diferencia en los antecedentes genéticos para la afectación del estado patógeno entre pacientes individuales (Current Opinion in Anti-inflammatory & Immunomodulatory Investigational Drugs. 2, 272-274, 2000).

En el actual cuidado médico se ha requerido seleccionar exactamente un procedimiento terapéutico que se adapte a los síntomas de pacientes individuales sin limitarlo a enfermedades inflamatorias del intestino (EII). En los últimos años se ha reconocido la necesidad de mejora de la QOL (calidad de vida) en la sociedad de edad avanzada y se ha demandado de todo corazón aplicar no una terapia común a todos los pacientes, sino una terapia apropiada para adaptarse a los síntomas de pacientes individuales. Para realizar una llamada terapia confeccionada a medida es fructífero un marcador de enfermedad que refleje exactamente los síntomas de pacientes individuales o las causas (antecedentes genéticos) de los mismos, y actualmente se han realizado asiduamente estudios destinados a la búsqueda y el desarrollo de la misma.

CD81 es una molécula de superficie de 26 kDa que se expresa en una amplia gama de células, y tiene una actividad de disminuir un umbral de activación de linfocitos B formando un complejo con CD21, CD19 y Leu 13 en un linfocito

B. Un linfocito T está asociado a CD4 y CD8 para transmitir una información de estímulo a las células. En vista de estos asuntos, CD81 se considera que tiene una función significativa en una respuesta inmunitaria a un heteroantígeno. Además, participa fisiológicamente y funcionalmente en diversas integrinas para activar VLA-4 (integrina α4β1) en un linfocito B o LFA-1 (integrina αLβ2) en un timocito.

Como enfermedad asociada a CD81 se menciona el tipo C de hepatitis. Se ha informado que el cribado de una molécula de unión a E2 se realiza a partir de una biblioteca de expresión de ADNc derivada de un linfoma T humano (clon de células que tiene una alta afinidad con E2) usando una región de la proteína de la envuelta E2 del virus del tipo C de hepatitis (VHC) como una sonda para unir una molécula CD81 humana a E2 y que una región de unión a E2 de una molécula CD81 tal se une a un ARN del VHC y esta unión es inhibida con un anticuerpo de neutralización de la infección por el VHC (Science 282, 938-941, 1998). Es decir, se sabe que CD81 actúa de receptor del VHC para participar en el desencadenamiento del tipo C de hepatitis C.

También se sabe que una enfermedad autoinmunitaria se convierte en grave por la infección por el VHC, y se ha informado que CD81 está relacionado con un grado de gravedad en infección por el VHC crónica y CD81 está relacionado con un factor reumático (Clinical & Experimental Immunology. 128 (2): 353-8, 2000). También hay un informe que establece que la infección por el VHC puede ser un factor peligroso de enfermedades inflamatorias del intestino (Gastroenterologie Clinique et Biologique. 24(1): 77-81, 2000).

Divulgación de la invención

En el presente documento se desvela un procedimiento para cribar un agente útil para prevenir, mejorar o tratar enfermedades inflamatorias del intestino. Un objeto de la invención es proporcionar un agente para prevenir, mejorar

o tratar las enfermedades.

También se desvela un marcador de enfermedad útil para diagnosticar o tratar enfermedades inflamatorias del intestino, y un procedimiento de detección (procedimiento de diagnóstico de genes) de enfermedades inflamatorias del intestino usando el marcador de enfermedad.

Los presentes inventores han realizado asiduamente investigaciones para resolver los problemas anteriores y, por consiguiente, han encontrado que la expresión de un gen CD81 cuya relación con enfermedades inflamatorias del intestino (EII) era hasta ahora desconocida es significativamente elevada en células patógenas para EII en comparación con células no patógenas para EII. Como se describirá en los ejemplos, células patógenas para EII significa una población de células que tiene una capacidad para inducir EII por transferencia en un animal normal, y células no patógenas para EII significa una población de células que no induce EII incluso por transferencia a un animal normal. Específicamente, las células patógenas para EII incluyen células obtenidas por incubación de células linfáticas derivadas de un ratón afectado por EII mediante estimulación con enterotoxina B estafilocócica (SEB). Las células no patógenas para EII incluyen células obtenidas por incubación de células linfáticas derivadas de un ratón afectado por EII sin estimulación o mediante estimulación con SEB en presencia de 3-cloro-2-[1-(4-morfolin-4ilfenil)ciclobutil]-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidina (denominado algunas veces en lo sucesivo de forma abreviada “compuesto A”), un compuesto del documento JP-A-2002-161084 cuya actividad es conocida por inhibir una inducibilidad por EII.

Los presentes inventores han encontrado adicionalmente que el compuesto A inhibe la formación de interferón γ, una citocina inflamatoria en células positivas para CD81 de linfocitos T positivos para CD3, y han aclarado que un anticuerpo anti-CD81 es eficaz para el tratamiento de animales del modelo de enfermedad inflamatoria del intestino.

Como se ha establecido anteriormente, los... [Seguir leyendo]

1. Uso de anticuerpo anti-CD81 para la preparación de una composición farmacéutica para prevenir, mejorar o tratar enfermedad inflamatoria del intestino (EII).

2. El uso según la reivindicación 1, en el que el CD81 es un CD81 de mamífero.

3. El uso según la reivindicación 1 ó 2, en el que el anticuerpo anti-CD81 es un anticuerpo monoclonal.

4. El uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicha enfermedad inflamatoria del intestino es colitis ulcerosa.

5. El uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicha enfermedad inflamatoria del intestino es enfermedad de Crohn.

6. Un anticuerpo anti-CD81 para uso en prevenir, mejorar o tratar enfermedad inflamatoria del intestino (EII).

7. El anticuerpo anti-CD81 para uso de la reivindicación 6, en el que el CD81 es un CD81 de mamífero.

8. El anticuerpo anti-CD81 para uso de la reivindicación 6 ó 7, en el que dicho anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.

9. El anticuerpo anti-CD81 para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en el que dicha enfermedad inflamatoria del intestino es colitis ulcerosa.

10. El anticuerpo anti-CD81 para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en el que dicha enfermedad inflamatoria del intestino es enfermedad de Crohn.