Un método para determinar la capacidad de respuesta de un individuo con un trastorno psicótico al tratamiento con Iloperidona,

que comprende; (a) determinar, para las dos copias del gen del CNTF presentes en el individuo, la identidad de un nucleótido en el sitio polimórfico en CNTF 103 G > A en la secuencia GenBank con No. de referencia X55890 (Versión 1); y (b) asignar el individuo a un grupo de respondedores buenos si los nucleótidos en el sitio polimórfico del CNTF en 103 G > A son G en ambas copias del gen del CNTF, donde dicho método es realizado ex vivo

Antecedentes de la invención

Campo de la invención

La presente invención pertenece a los campos de la farmacología, la medicina y la química medicinal y proporciona métodos para tratar patologías psicóticas incluyendo la esquizofrenia y patologías relacionadas. En particular, este invento se refiere a la utilización del análisis genómico para determinar la capacidad de respuesta de un paciente a la iloperidona y métodos para determinar estrategias de tratamiento óptimas.

Descripción del arte relacionado

El factor neurotrófico ciliar (CNTF) era conocido originalmente como un factor de supervivencia para neuronas ciliares de pollo in vitro, pero más recientemente ha demostrado ser un factor de supervivencia para diferentes tipos de células neuronales. El CNTF está involucrado en la prevención de la degeneración de axones motores y pertenece a la familia de citoquinas interleucina-6. Barbin et al. emplearon un ensayo de supervivencia para neuronas obtenidas a partir de ganglios ciliares de embrión de pollo para informar sobre la actividad neurotrófica de CNTF derivado de ojo de pollo. Véase, Barbin, G et al., J. Neurochem. 43:1468-1478,1984. También se mostró en este estudio que el CNTF actúa sobre neuronas simpáticas y sensoriales.

El gen del CNTF también ofrece esperanzas para el tratamiento de la esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y otros trastornos similarmente relacionados. En ratones pmn/pmn homocigotos ocurre un trastorno en el que los miembros posteriores tienen una neuropatía motora progresiva que llega a ser evidente al final de la tercera semana posnatal. Todos los ratones mueren entre las seis y siete semanas postparto por parálisis respiratoria. Sendtner et al. trataron a los ratones con CNTF y lograron mejorar la función motora y redujeron los síntomas morfológicos de degeneración neural incluso en aquellos casos en los que ya estaban presentes alteraciones degenerativas. Véase Sendtner et al., Nature 358: 502-504, 1992.

Un mejor entendimiento se consiguió cuando la expresión del gen del CNTF fue eliminada en ratones mediante recombinación homóloga y todavía tenían lugar la atrofia progresiva y la pérdida de neuronas motoras, acompañadas de una ligera reducción de la fuerza muscular, véase Masu et al. Nature 365: 27-32, 1993. Los autores de este estudio declararon que estos resultados demuestran que la expresión del gen no es esencial para el desarrollo de neuronas motoras espinales determinado mediante criterios morfológicos, pero que es esencial para el mantenimiento de la función en neuronas motoras durante el período posnatal.

Takahashi et al. obtuvieron hallazgos similares en la falta de efectos en los ratones knockout con CNTF inactivado. Ellos hallaron que aproximadamente un 2,5% de la población japonesa son homocigotos para mutaciones que inactivan el gen del CNTF, véase Takahashi et al. Nature Genet. 7: 79-84, 1994. Los que carecen de CNTF parecen no ser afectados adversamente y no han mostrado ningún tipo de defectos neurológicos relacionados.

Las subunidades del receptor de CNTF comparten secuencias similares con el receptor de la leptina (LEP). Una serie de estudios sugieren que las citoquinas CNTF y LEP tienen la capacidad de transmitir señales a los centros de saciedad hipotalámicos. Estos resultados se consiguieron tras administración sistémica de CNTF y LEP a ratones ob/ob, lo que llevó a la inducción rápida del gen de respuesta primaria tis-11 en el núcleo arcuato. Cuando ratones ob/ob carentes de una leptina funcional fueron tratados con CNTF, la obesidad, hiperfagia e hiperinsulinemia asociadas con la deficiencia de leptina fueron reducidas. A diferencia de la leptina, el CNTF también redujo fenotipos relacionados a la obesidad en ratones db/db, que carecen de un receptor de leptina funcional, así como en ratones con obesidad inducida por dieta, que son parcialmente resistentes a las acciones de la leptina.

La proteína CNTF es almacenada en el interior de las células gliales adultas, esperando quizás su liberación mediante algún mecanismo provocado por lesiones. Puede ser que no sea esencial para el desarrollo y que, de hecho, actúe en respuesta a lesiones o cualquier otro tipo de estrés. El CNTF fue caracterizado como factor trófico para neuronas motoras en el ganglio ciliar y el cordón espinal.

Polimorfismo en el gen del CNTF

Un polimorfismo en el gen CNTF ha sido identificado. El gen del CNTF está localizado en 11q12.2 y el polimorfismo es 103 G>A en la secuencia GenBank X55890 (Versión 1) (véase PubMed: 9285965). Una mutación en un sitio aceptor de empalme causó un corte y empalme incorrecto del ARNm, suprimiendo de este modo la expresión de la proteína CNTF. El cambio de nucleótidos fue una transición de G a A en la posición -6 del sitio receptor de empalme, conduciendo a un desplazamiento del marco de lectura desde el aminoácido 39, teniendo como resultado un codón de parada 24 aminoácidos corriente abajo. Se asumía que el ARNm irregular codificaba una proteína truncada de 62 aminoácidos de largo (FS63 TER).

El análisis de muestras de tejido y la transfección de minigenes CNTF en células cultivadas demostraron que el alelo mutado expresaba solamente la especie de ARNm mutada. El gen mutante homocigoto no es traducido a proteína, lo que es mostrado por el hallazgo de que los anticuerpos que reconocen tanto el CNTF normal como el mutado presentan una falta total de inmunoreactividad frente a CNTF en tejido nervioso periférico de un sujeto mutante homocigoto. Véase Takahashi et al. Nature Genet. 7: 79-84, 1994.

Tanaka Yuji et al. ('Schizophrenic psychoses and the CNTF mutation', NEUROREPORT, vol. 9, no. 6, 20 Abril 1998 (1998-04-20), páginas 981-983) revela la asociación entre una mutación nula en el gen del factor neutrófico ciliar (CNTF) y las psicosis funcionales, incluyendo la esquizofrenia y trastornos esquizoafectivos.

Trastornos psicóticos

Las psicosis causan consecuencias emocionales y económicas tremendas en los pacientes, sus familias y la sociedad en su conjunto. Las patologías psicóticas, tales como la esquizofrenia y los trastornos relacionados (p.ej. el trastorno esquizoafectivo), e incluyendo los trastornos afectivos (trastornos de estado de ánimo) con síntomas psicóticos (p.ej. el trastorno bipolar) son enfermedades complejas y heterogéneas de etiología incierta que afligen a un alto porcentaje de todas las poblaciones a escala mundial.

La esquizofrenia está caracterizada por tener tanto "síntomas positivos" (alucinaciones, delirios y desorganización conceptual) como "síntomas negativos" (apatía, aislamiento social, afecto y pobreza del habla). La actividad anormal del neurotransmisor dopamina es una característica de la esquizofrenia. La actividad dopaminérgica es reducida en el sistema mesocortical (resultando en síntomas negativos) y es aumentada en el sistema mesolímbico (resultando en síntomas positivos o psicóticos). Varios otros neurotransmisores están involucrados, incluyendo la serotonina, el glutamato y el ácido gamma-aminobutírico (GABA).

Los fármacos antipsicóticos, de una forma u otra, han sido desde hace mucho tiempo la base del tratamiento de los trastornos psicóticos. Estos fármacos a veces son usados en combinación con una medicación reguladora del estado de ánimo tales como el litio o un antidepresivo. Durante muchos años, la esquizofrenia fue tratada con fármacos antipsicóticos clásicos, los neurolépticos, que bloquean los receptores centrales de la dopamina. Los neurolépticos son efectivos para el tratamiento de los síntomas positivos de la esquizofrenia, pero tienen poco o ningún efecto sobre los síntomas negativos. La capacidad de estos fármacos para antagonizar los receptores de la dopamina se correlaciona con la eficacia antipsicótica. Los fármacos neurolépticos incluyen las fenotiazinas incluyendo los alifáticos (p.ej., la clorpromazina), las piperidinas (p.ej., la tioridazina) y las piperazinas (p.ej., la flufenazina); las butirofenonas (p.ej., el haloperidol); los tioxantenos (p.ej., el flupentixol); las oxoindolinas (p.ej. la molindona); las dibenzoxazepinas (p.ej., la loxapina) y las difenilpiperidinas (p.ej., la pimozida).

Desafortunadamente, los síntomas negativos resistentes a los neurolépticos son responsables de la mayoría de las discapacidades social y laboral causadas por la esquizofrenia. Además, los neurolépticos causan síntomas extrapiramidales, incluyendo rigidez, temblor, bradicinesia (lentitud del movimiento) y bradifrenia... [Seguir leyendo]

1. Un método para determinar la capacidad de respuesta de un individuo con un trastorno psicótico al tratamiento con Iloperidona, que comprende;

(a) determinar, para las dos copias del gen del CNTF presentes en el individuo, la identidad de un nucleótido en el sitio polimórfico en CNTF 103 G > A en la secuencia GenBank con No. de referencia X55890 (Versión 1); y

(b) asignar el individuo a un grupo de respondedores buenos si los nucleótidos en el sitio polimórfico del CNTF en 103 G > A son G en ambas copias del gen del CNTF,

donde dicho método es realizado ex vivo.

2. Un método de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el paso de determinación (a) comprende además la utilización de un kit para la identificación del patrón de polimorfismo de un paciente en el sitio polimórfico del CNTF en 103 G > A, comprendiendo dicho kit un medio para determinar un patrón de polimorfismo genético en el sitio polimórfico del CNTF en 103 G > A.

3. El método de la reivindicación 2, en el que el equipo comprende además un medio de recolección de muestras de ADN.

4. El método de la reivindicación 2 ó 3, en el que el medio para determinar un patrón de polimorfismo genético en el sitio polimórfico del CNTF en 103 G > A comprende al menos un oligonucleótido para la genotipificación del CNTF.

5. El método de acuerdo con la reivindicación 4, en el que el medio para determinar el patrón de polimorfismo genético en el sitio polimórfico del CNTF en 103 G > A comprende dos oligonucleótidos para la genotipificación del CNTF.

6. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, en el que el medio para determinar el patrón de polimorfismo genético en el sitio polimórfico del CNTF en 103 G > A comprende al menos una composición cebadora de genotipificación del CNTF que comprende al menos un oligonucleótido para la genotipificación del CNTF.

7. El método de acuerdo con la reivindicación 6, en el que la composición cebadora para la genotipificación del CNTF comprende al menos dos juegos de pares de cebadores alelo-específicos.

8. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en el que los dos oligonucleótidos para la genotipificación del CNTF están empaquetados en recipientes separados.