(17/01/2011) Método para aumentar la eficiencia de integración direccionada de un polinucleótido en un sitio predeterminado del genoma de una célula fúngica filamentosa con preferencia para NHR, en donde dicho polinucleótido tiene una región de homología con dicho sitio predeterminado, comprendiendo dicho método proporcionar un mutante de una célula fúngica filamentosa parental, en donde la relación de NHR/HR está reducida al menos en un 50% en el mutante en comparación con dicha relación en dicho organismo parental medida en las mismas condiciones, en donde el mutante es, preferiblemente de modo inducible, deficiente en al menos un componente implicado en NHR, y/o tiene…

(28/12/2010) Procedimiento para el cultivo de la cepa de producción Bacillus polymyxa caracterizado porque el cultivo es realizado a la temperatura de 28ºC en fermentador con agitación y aireación del caldo de fermentación, manteniendo el pH durante el cultivo a un rango de 5,3­5,6, la concentración de glucosa se mantiene en un rango de 0,5 a 2,5 g/l por solución de glucosa, la concentración de iones de amoniaco se mantiene en un rango de 0,3 a 0,6 g/l y la concentración de polimixina B en un rango de 1,8 a 2,8 g por 1 l de filtrado de fermentación durante un tiempo de 44 a 56 horas de cultivo medido por el método HPLC

(22/11/2010) Un procedimiento para producir un dipéptido, que comprende: cultivar en un medio un microorganismo que tiene la capacidad de producir una proteína que tiene actividad formadora del dipéptido a partir de una o más clases de aminoácidos donde la proteína que tiene actividad formadora del dipéptido a partir de una o más clases de aminoácidos es una proteína seleccionada del grupo que consiste en los siguientes apartados [1] a [11]: [1] una proteína que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en cualquiera de los SEQ ID NOS: 1 a 8; [2] una proteína que consiste en una secuencia de aminoácidos donde uno o más residuos de aminoácidos son suprimidos, sustituidos o añadidos…

(28/10/2010) Un método para la producción transitoria de una o más proteínas extracelulares no procedentes de plantas en un protoplasto de musgo, método que comprende los pasos de transformar transitoriamente el protoplasto con un constructo de ácido nucleico que comprende una o más secuencias nucleotídicas heterólogas codificantes de dicha o dichas proteínas no procedentes de plantas enlazadas operativamente a un promotor, y cultivar el protoplasto transformado a fin de producir dicha o dichas proteínas no procedentes de plantas, en donde dicho cultivo tiene lugar durante al menos 48 horas en un medio de cultivo seleccionado del grupo constituido por W5, 3M y MMS

(19/10/2010) Procedimiento para fabricar proteínas recombinantes utilizando uno o más inhibidores de la apoptosis, que comprende las etapas de: (a)provisión de un vector que comprende un gen que codifica una proteína de interés; (b)provisión de una célula huésped de ovario de hámster chino (CHO); (c)transformación o transfección de la célula huésped con el vector de la etapa (a); (d)provisión de los medios de cultivo celular; (e)provisión de una cantidad de inhibidor de caspasa z-VAD-fmk; (f)mezclar el inhibidor de caspasa en los medios de cultivo celular; (g)cultivo de la célula huésped transformada o transfectada en el medio de cultivo celular bajo las condiciones suficientes para la expresión de la proteína de interés; y, opcionalmente (f)recuperación o purificación…

(09/09/2010) Preparación que comprende una pluralidad de polipéptidos del Factor VII, en donde los polipéptidos comprenden cadenas de oligosacáridos ligadas a la asparagina y en donde entre aproximadamente un 94-99% de las cadenas de oligosacáridos comprenden al menos una fracción de ácido siálico; y en donde la preparación exhibe una biodisponibilidad que es al menos aproximadamente un 110% de la biodisponibilidad de una preparación de referencia, en donde aproximadamente un 93% o menos de las cadenas de oligosacáridos en la preparación de referencia comprenden al menos una fracción de ácido siálico

(08/09/2010) Un procedimiento para obtener una toxina botulínica biológicamente activa, que comprende las etapas de: (a)proporcionar un medio de fermentación que esté exento de un producto derivado de un animal, comprendiendo el medio de fermentación soja hidrolizada, (b)cultivar una bacteria Clostridium botulinum en el medio de fermentación en condiciones que permitan la producción de una toxina botulínica, y (c)recuperar una toxina botulínica biológicamente activa del medio de fermentación

(01/07/2010) Método para la unión de afinidad de un polipéptido heterólogo de interés, donde dicho polipéptido se expresa como un polipéptido de fusión de la autoproteasa pestiviral NPro o de sus derivados, y donde dicho polipéptido de fusión se pone en contacto en condiciones caotrópicas con una matriz de afinidad que comprende una fase sólida y un ligando de afinidad que comprende los enlaces peptídicos acoplados a esta fase sólida, donde el ligando de afinidad que comprende el enlace peptídico se selecciona entre el siguiente grupo de ligandos: a) péptidos que comprenden la fórmula X1X2X3X4, donde X1 a X4 son los residuos…

(29/06/2010) Un procedimiento para la preparación de proteínas de membrana incorporadas en una membrana, que comprende las etapas de: (i) proporcionar una membrana, en la que la membrana es una membrana unida a una superficie, (ii) aplicar a la membrana un sistema de expresión libre de células y un ácido nucleico que codifica las proteínas de membrana, y (iii) expresar las proteínas de membrana, que se integran en la membrana

(18/06/2010) Método para producir una proteína de fusión de receptor de factor de necrosis tumoral con región Fc de inmunoglobulina (TNFR-Fc) en un cultivo celular de producción a gran escala, que comprende las etapas siguientes: proporcionar un cultivo celular que comprende: unas células de mamíferos que contienen un gen que codifica TNFR-Fc, gen el cual es expresado en la condición de cultivo celular; y un medio que contiene glutamina y que tiene una característica del medio seleccionada de entre el grupo que consiste en: (i) una cantidad acumulativa de aminoácidos por volumen unitario mayor que alrededor de 70 mM, (ii) una relación molar de glutamina acumulativa a asparagina acumulativa menor que alrededor de 2, (iii) una relación molar de glutamina acumulativa a aminoácidos totales acumulativos menor que alrededor de 0,2, (iv) una relación molar de iones inorgánicos…

(02/06/2010) Procedimiento para el cultivo de células de mamíferos para la producción de substancias, caracterizado porque, se cultivan unas células de mamíferos que producen una substancia, con una limitación de glucosa, en donde el grado de limitación de la glucosa, DGL, es DGL = qGlc/qGlcmáx siendo qGlc = grado de consumo específico de glucosa observado en el momento, y qGlcmáx = grado de consumo máximo específico de glucosa conocido para estas células, mayor que el grado de limitación de glucosa que conduce al mantenimiento exclusivo, DGLmantenimiento, de las células, y es =q 0,5, en donde DGLmantenimiento = qGlcmantenimiento/qGlcmáx, siendo qGlcmantenimiento = en un metabolismo de mantenimiento puro, grado de…

(19/05/2010) Un método para seleccionar una tasa de crecimiento para controlar la distribución de una proteína recombinante entre el sobrenadante y el periplasma en cultivos de células hospedantes de E. coli de modo que la distribución de la proteína recombinante sea más adecuada para la recuperación primaria de la proteína recombinante, en la que la expresión de la proteína recombinante por dichas células está bajo el control de un sistema inducible, cuyo método comprende: a) proporcionar un cultivo de células hospedantes de E. coli b) cambiar la tasa de crecimiento de las células hospedantes de E. coli tal que la tasa de crecimiento esté en…

(29/03/2010) Método para producir una proteína de fusión del receptor de factor de necrosis tumoral con inmunoglobulina (TNFR-Ig) en un cultivo celular de producción a gran escala, que comprende las etapas siguientes: proporcionar un cultivo celular que comprende: unas células de mamíferos que contienen un gen que codifica TNFR-Ig, gen el cual es expresado en la condición de cultivo celular; y un medio que contiene glutamina y que tiene una característica del medio seleccionada de entre el grupo que consiste en: (i) una cantidad acumulativa de aminoácidos por volumen unitario mayor que alrededor de 70 mM, (ii) una relación molar de glutamina acumulativa a asparagina acumulativa menor que alrededor de 2, (iii) una relación molar de glutamina acumulativa a aminoácidos totales acumulativos menor que…

(29/03/2010) Microorganismo productor de anticuerpos, elementos necesarios para su obtención, anticuerpos así producidos, composiciones terapéuticas y sus aplicaciones. La presente invención describe un microorganismo productor, secretor e inyector de anticuerpos recombinantes monodominio en células eucariotas, animales o plantas, gracias a la presencia de una construcción genética que contiene una señal de secreción de tipo III. Además, estos microorganismos no patógenos o atenuados pueden utilizarse en la elaboración de composiciones farmacéuticas para el tratamiento de enfermedades humanas o veterinarias

(05/03/2010) Mezcla de reacción para transcripción in vitro de ARNm y/o la traducción de polipéptidos, comprendiendo la mezcla: un extracto de células bacterianas crecido en medio que contiene glucosa y que comprende vesículas de membrana invertida que contienen componentes de la cadena respiratoria y el F1F0ATPase; componentes de maquinaria de síntesis de polipéptidos y/o ARNm; una plantilla para la transcripción de dicho ARNm y/o la traducción de dicho polipéptido; nucleótidos y/o aminoácidos para la síntesis de dicho ARNm y/o polipéptidos; y cofactores, enzimas y otros reactivos necesarios para dicha transcripción y/o traducción; en la que dicha mezcla de reacción…

(10/02/2010) La invención se relaciona con cepas de S.cerevisiae capaces de secretar beta-galactosidasa de origen heterólogo al medio de cultivo así como a métodos para la obtención de beta-galactosidasa usando dichas cepas y métodos para la producción de glucosa/galactosa, biomasa y bioetanol mediante el cultivo de dichas cepas en medios ricos en lactosa. En otro aspecto, la invención proporciona métodos para la expresión de proteínas recombinantes usando una composición rica en lactosa como medio de cultivo para los microorganismos productores de dicha proteína

(27/01/2010) Método para la producción de un dominio kringle 2 más proteasa de serina (K2S), activo y correctamente plegado, del activador de plasminógeno tisular o una variante funcional de éste en el sobrenadante de células procarióticas, caracterizado porque la célula procariótica contiene y expresa un vector que comprende un ADN que codifica el péptido señal de la proteína de la membrana externa A (OmpA), que está fusionada secuencia abajo a un ADN que codifica un péptido corto, caracterizado por la secuencia de aminoácidos SEGNSD (SEQ ID NO:3), que por sí misma está fusionada secuencia abajo a un ADN que codifica el dominio kringle 2 más proteasa de serina del activador de plasminógeno…

(08/01/2010) Un procedimiento para producir un fragmento de anticuerpo, que comprende los pasos de: a) preparar un vector de expresión que comprende un gen que codifica una cadena ligera del fragmento de anticuerpo fusionado con la secuencia señal de la enterotoxina termoestable de E. coli y un gen que codifica una cadena pesada del fragmento de anticuerpo fusionado con la secuencia señal de la proteína A de la membrana exterior de E. coli, en el que la expresión de los genes que codifican la cadena ligera y la cadena pesada está regulada por un único promotor; b) transformar un microorganismo con el vector de expresión; c) cultivar el microorganismo transformado en un medio; y d) recoger el fragmento de anticuerpo segregado del microorganismo transformado dentro…

(16/03/2009) Una construcción de ADN caracterizada porque comprende: a) una primera secuencia de ácido nucleico que contiene la secuencia de nucleótidos que codifica para un péptido o proteína susceptible de ser expresado de forma recombinante; b) una segunda secuencia de ácido nucleico que cor tiene la secuencia de nucleótidos que codifica para un dominio de dimerización; y c) una tercera secuencia de ácido nucleico que contiene la secuencia de nucleótidos que codifica para la alfa-hernolisina (HlyA) de E. coli o para un fragmento de dicha proteína que comprende la señal de reconocimiento del mecanismo de secreción del sistema transportador de Hly de E. coli, o una secuencia de nucleótidos que codifica para un gen homólogo,…

(16/05/2007) Una célula obtenida por un método que permite a las células adquirir la capacidad de producir una proteína cuya secuencia de aminoácidos comprende al menos un aminoácido no convencional, cuyo método comprende las etapas siguientes: a) la transformación de dichas células mediante al menos la introducción de una mutación sin sentido al nivel de un codón de un gen, señalado como diana, que codifica una proteína necesaria para el crecimiento de dichas células, no siendo funcional dicha proteína sintetizada a partir del gen así mutado; b) llegado el caso, el cultivo de las células obtenidas en la etapa a) en un medio de cultivo que contiene una sustancia alimenticia que compensa la pérdida de funcionalidad…

(01/05/2007) Una molécula de ADN de la forma: Px-Sx-Bn-(ZR)-Hir (AsmR) - proteína (Y)-T en la que: Px es cualquier secuencia de ADN promotora, seleccionada de tal modo que los rendimientos óptimos de la proteína de interés sean factibles; Sx es cualquier ADN que codifique para una secuencia señal o secuencia líder que permita rendimientos óptimos; Bn es 1-15 codones de aminoácido o un enlace químico; Z es el codon de un aminoácido seleccionado a partir del grupo que comprende Lys y Arg; R es un codon Arg o un enlace químico; Asm es un enlace químico o codones de m aminoácidos, donde m = 1-10; Hir es una secuencia de ADN que codifica para hirudina o un derivado de hirudina que es al menos 40% homóloga a la hirudina natural; en el que el derivado de hirudina puede…