(26/06/2019) Un método para remover especies de alta abundancia de una pluralidad de moléculas de ácido nucleico, que comprende: hibridar una pluralidad de primeros oligonucleótidos que comprenden un resto de unión con una primera pluralidad de moléculas de ácido nucleico, en donde la primera pluralidad de moléculas de ácido nucleico comprende al menos una especie de alta abundancia; extender la pluralidad de primeros oligonucleótidos para generar una pluralidad de cadenas complementarias de la primera pluralidad de moléculas de ácido nucleico que comprenden el resto de unión; desnaturalizar una pluralidad de moléculas de ácido nucleico de doble cadena que comprenden la pluralidad…

(19/06/2019) Un método para el aislamiento del ácido nucleico que comprende: • Recibir una disolución de resto de unión en una cámara de proceso, en donde la disolución de resto de unión comprende un tampón de recogida y un conjunto de micropartículas magnéticas recubiertas con resto de afinidad modificadas con grupos funcionales carboxilo, en donde el conjunto de micropartículas magnéticas recubiertas con resto de afinidad comprenden el dendrímero de polipropilenimina tetramina (DABAM) (Generación 1) unido por amida al conjunto de micropartículas magnéticas por medio de los grupos funcionales carboxilo; • Poner en contacto la disolución de resto de unión con una muestra biológica, en la cámara…

(18/06/2019) Una construcción de ácido nucleico, que comprende: (a) brazos dirigidos para dirigir la construcción de ácido nucleico a un gen diana de un ácido nucleico de una célula; (b) una secuencia de accionamiento que comprende un aceptor de corte y empalme 3' seguido por un reportero en orientación sentido con respecto a la transcripción del gen diana; (c) un casete de selección de fármacos en orientación sentido o antisentido; (d) una secuencia de nucleótidos de interés en orientación antisentido (e) un COIN (elemento condicional mediante inversión) en orientación antisentido; y (f) unidades recombinables que comprenden, (i) un primer par de sitios de reconocimiento de recombinasa afines, R1/ R1', y un segundo par…

(13/06/2019) Una composición que comprende un conjunto de diferentes subconjuntos de complejos mayores de histocompatibilidad multiméricos (MHC multiméricos), en la que cada subconjunto de MHC multimérico comprende i) dos o más moléculas de MHC unidas a una molécula principal, y ii) al menos una molécula de ácido nucleico unida a dicha cadena principal, dicha al menos una molécula de ácido nucleico que comprende una primera región de cebador 5', una región central (región del código de barras) y una segunda región de cebador 3', en la que dicho código de barras sirve como una etiqueta específica para una molécula péptido-MHC dada, en la que cada subconjunto de MHC multimérico presenta un péptido diferente decisivo para el reconocimiento de células T y una molécula de ácido nucleico única asociada que comprende una…

(10/06/2019) Un sistema de recogida de una muestra de ácido nucleico, comprendiendo el sistema: un receptáculo que define un volumen interno; un tapón desmontable para el receptáculo, teniendo el tapón un lado interno enfrentado al volumen interno del receptáculo y un lado externo en el lado opuesto del volumen interno, comprendiendo el tapón un puerto de ventilación que comunica el lado interno con el lado externo y un puerto de conexión de muestra que comunica el lado interno con el lado externo, comprendiendo el puerto de conexión de muestra un primer componente de enclavamiento para enclavar de forma desmontable el puerto de conexión de muestra en un segundo componente de enclavamiento de cooperación,…

(28/05/2019) Un metodo para identificar o producir un aptamero, que comprende los pasos de: (a) Preparar una mezcla candidata de acidos nucleicos, en donde la mezcla comprende al menos un nucleotido que esta modificado para comprender una funcionalizacion introducida mediante quimica clic, en donde el nucleotido modificado comprende una nucleobase modificada con alquino que se modifica adicionalmente a traves de una cicloadicion 1,3-dipolar de una azida para producir una nucleobase modificada con azida-alquino, en donde la azida comprende una molecula fotosensible, en donde la molecula fotosensible es un grupo voluminoso que inhibe la amplificacion por PCR del ligando de acido nucleico, y en…

(27/05/2019) Un procedimiento de modificar una secuencia cromosómica de una célula eucariota mediante la integración de una secuencia donadora, comprendiendo el procedimiento: a) introducir en la célula eucariota (i) al menos una endonucleasa guiada por ARN que comprende al menos una seña de localización nuclear o ácido nucleico que codifica al menos una endonucleasa guiada por ARN que comprende al menos una señal de localización nuclear, en la que la al menos una endonucleasa guiada por ARN es un sistema de proteínas repeticiones palindrómicas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas (CRISPR)/(Cas) asociado a CRISPR (CRISPR /Cas) de tipo II y el sistema de proteínas CRISPR/Cas de tipo…

(24/05/2019) Un método para la síntesis de un complejo bifuncional que comprende una parte de molécula y una parte de oligonucleótido identificador que identifica la parte de la molécula, comprendiendo dicho método los pasos de i) proporcionar un soporte sólido, ii) proporcionar un primer identificador de oligonucleótido opcionalmente protegido que comprende un sitio de reacción química capaz de reaccionar con un primer bloque de construcción de compuesto reactivo y capaz de reaccionar con otro bloque de construcción de compuesto reactivo iii) proporcionar un primer bloque de construcción de compuesto reactivo, en donde…

(20/05/2019) Un procedimiento para modificar una secuencia cromosómica en una célula eucariota, comprendiendo el procedimiento: a) Introducir en la célula eucariota dos sistemas de nickasa guiados por ARN o ácido nucleico que codifica dichos sistemas, y, opcionalmente, un polinucleótido donador, en el que cada sistema de nickasa guiado por ARN comprende (i) Una endonucleasa guiada por ARN que se modifica para escindir una cadena de una secuencia de cadena doble; y (ii) Un ARN guía que comprende una primera región que tiene complementariedad con un sitio diana en la secuencia cromosómica y una segunda región que interactúa con la endonucleasa guiada por ARN, en la que cada sitio diana está seguido inmediatamene por un motivo adyacente de protoespaciador (PAM), y los sitios diana de las dos endonucleasas guiadas por ARN están en cadenas…

(15/05/2019) Un método para el aislamiento de entidades de replicación marcadas específicamente, comprendiendo dicho método a) proporcionar en una mezcla de reacción un conjunto de entidades de replicación que despliegan variantes de una molécula receptora sobre su superficie y que tienen una primera o segunda enzima unida a dicha superficie, comprendiendo la mezcla de reacción una tercera enzima capaz de descomponer el exceso de producto de dicha primera y/o segunda enzima, siendo la primera enzima una peroxidasa, siendo la segunda enzima una oxidasa y siendo la tercera enzima una catalasa, b) añadir a la mezcla de la etapa a) moléculas de ligando que están unidas a dicha primera enzima si dichas entidades están unidas a dicha segunda enzima, o dichos ligandos están…

(14/05/2019) Un metodo para producir una biblioteca de clones de celulas eucariotas que contienen ADN que codifica un repertorio diverso de aglutinantes que reconocen dianas, que comprende proporcionar moleculas de ADN donante que codifican los aglutinantes, y celulas eucariotas, en donde los aglutinantes son anticuerpos, proteinas o peptidos, introducir el ADN donante en las celulas y proporcionar una nucleasa de sitio especifico dentro de las celulas, en donde la nucleasa escinde una secuencia de reconocimiento en el ADN celular para crear un sitio de integracion en el que el ADN donante se integra en el ADN celular, teniendo lugar la integracion a traves de mecanismos de reparacion del ADN endogenos a las celulas, creando de este modo celulas recombinantes que contienen ADN donante integrado en el ADN celular,…

(01/05/2019) Un aparato autónomo para aislar ácido nucleico a partir de al menos una muestra sin procesar, aparato para usarse con un instrumento, consistiendo dicho aparato en un componente macrofluídico, un componente microfluídico, al menos una línea de transmisión neumática y dos entradas, una primera entrada para recibir la al menos una muestra sin procesar desde un dispositivo de recogida y una segunda entrada para establecer una interfaz en el mecanismo de transmisión en dicho instrumento: (i) comprendiendo dicho componente macrofluídico: al menos una cámara para recibir dicha al menos una muestra sin procesar desde un dispositivo de recogida; al menos dos depósitos de almacenamiento de reactivos de lisis precargados formados dentro del componente macrofluídico; un depósito de almacenamiento de reactivos lavados…

(01/05/2019) Una composición de dos o más secuencias de ácidos nucleicos manipuladas que forman un andamio ("NASC"), comprendiendo la composición NASC: un primer componente de ácidos nucleicos manipulado ("NASC-PC1") que comprende, en una dirección de 5' a 3', un elemento espaciador 1 que comprende una secuencia 1 de unión a diana de ácidos nucleicos, un elemento de repetición 1 que comprende una secuencia 1 de ácidos nucleicos de repetición, y un elemento de unión a la proteína de unión a ácidos nucleicos 1 que comprende una secuencia 1 de unión a la proteína de unión a ácidos nucleicos de doble cadena, en la que el elemento…

(24/04/2019) Un método de producción de un ácido nucleico objetivo que tiene una secuencia predefinida, comprendiendo el método: proporcionar una pluralidad de fragmentos de ácido nucleico bicatenario de extremos romos que tienen una secuencia de reconocimiento de enzimas de restricción en cada extremo; en donde la pluralidad de fragmentos de ácido nucleico bicatenario de extremos romos se generan a partir de una pluralidad de oligonucleótidos monocatenarios inmovilizados sobre un soporte sólido y se amplifican usando un cebador de amplificación que se une a una secuencia de amplificación ubicada en el extremo 5' y/o el extremo 3', en donde el cebador de amplificación es un cebador universal…

(10/04/2019) Un método de purificación de ARN mensajero (ARNm), que comprende (a) sintetizar ARNm mediante transcripción In Vitro utilizando los siguientes reactivos: (i) una plantilla de ADN lineal o circular que contiene un promotor; (ii) un conjunto de trifosfatos de ribonucleósido; (iii) un sistema tampón que incluye opcionalmente DTT e iones de magnesio; y (iv) una polimerasa de ARN; y opcionalmente (v) una ADNasa I, una pirofosfatasa y/o un inhibidor de ARNasa; (b) añadir un agente desnaturalizante de proteínas a la preparación de la etapa (a), que comprende el ARNm sintetizado In Vitro, en el que el agente desnaturalizante de proteínas es un agente caotrópico o una alta concentración de sal; y (c) purificar el ARNm de la preparación de la etapa (b) mediante filtración de flujo tangencial, en donde…

(10/04/2019) Un método para seleccionar células procariotas mutantes para identificar a los productores de un agente citotóxico activo contra una célula diana, comprendiendo el método los pasos de: (a) proporcionar células de una especie procariota productora; (b) generar un conjunto de células productoras mutantes por mutagénesis de transposones de las células del paso (a) con un transposón de activación (TnA), en el que el TnA comprende un promotor orientado hacia fuera (TnAP) capaz de aumentar la transcripción de un gen en o cerca de su sitio de inserción en el ADN de dichas células productoras; (c) co-encapsular miembros individuales del conjunto del paso (b) con una o más células diana en microgotas,…

(03/04/2019) Una muteína de la lipocalina lacrimal humana, en la que la muteína comprende: (i) las siguientes sustituciones de aminoácidos Glu 27→ Arg, Phe 28→ Cys, Glu 30→ Arg, Met 31→ Ala, Leu 33→ Tyr, Ile 57→ Arg, Cys 61→ Trp, Asp 80→ Ser, Lys 83→ Arg, Glu 104→ Leu, Leu 105→ Cys, His 106→ Pro, Lys 108→ Gin; y (ii) uno de los siguientes conjuntos de sustituciones de aminoácidos Arg 26→ Pro, Asn 32→ Tyr, Glu 34→ Ser, Met 55→ Ala, Leu 56→ Gin, Glu 63→ Lys; Arg 26→ Ser, Asn 32→ Tyr, Glu 34→ Val, Met 55→ Ala, Leu 56→ Ala, Ser 58→ lie, Glu 63→ Ser; Arg 26→ Ser, Asn 32→ Val, Glu 34→ Asn, Met 55→ Ala, Leu 56→Gln, Ser 58→ Lys, Glu…

(27/03/2019) Un procedimiento para el enriquecimiento de ácidos nucleicos con una longitud menor que 300 nucleótidos a partir de una muestra que se elige del grupo consistente en plasma, suero, un fluido corporal, un frotis y un lisado celular, que comprende las etapas de procedimiento i) provisión de una fase P1 fluida, preferiblemente acuosa, que contiene (α1) al menos un ácido nucleico con una longitud menor que 300 nucleótidos, así como (α2) al menos un componente distinto de este ácido nucleico (α1), ii) puesta en contacto de la fase P1 con una matriz de intercambio de aniones para la unión del ácido nucleico (α1) a la matriz de intercambio de aniones,…