Modificación y regulación del genoma en base a CRISPR.

Un procedimiento de modificar una secuencia cromosómica de una célula eucariota mediante la integración de una secuencia donadora,

comprendiendo el procedimiento:

a) introducir en la célula eucariota

(i) al menos una endonucleasa guiada por ARN que comprende al menos una seña de localización nuclear o ácido nucleico que codifica al menos una endonucleasa guiada por ARN que comprende al menos una señal de localización nuclear, en la que la al menos una endonucleasa guiada por ARN es un sistema de proteínas repeticiones palindrómicas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas (CRISPR)/(Cas) asociado a CRISPR (CRISPR /Cas) de tipo II y el sistema de proteínas CRISPR/Cas de tipo II es una proteína Cas9,

(ii) al menos un ARN o ADN guía que codifica al menos un ARN guía, y

(iii) un polinucleótido donador que comprende la secuencia donadora; y

b) cultivar la célula eucariota de manera que cada ARN guía guíe una endonucleasa guiada por ARN a un sitio diana en la secuencia cromosómica, la endonucleasa guiada por ARN introduce una rotura de doble cadena en el sitio diana, y la rotura de doble cadena se repara mediante un proceso de reparación de ADN, de manera que la secuencia cromosómica se modifica mediante la inserción o la sustitución de la secuencia donadora en la secuencia cromosómica, en la que

el sitio diana en la secuencia cromosómica está seguido inmediatamente por un motivo adyacente de protoespaciador (PAM), el procedimiento no comprende un proceso de modificar la identidad genética de la línea germinal de un ser humano y, en el que el procedimiento no comprende un procedimiento para el tratamiento del cuerpo humano o animal mediante cirugía o terapia.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E16183724.

Solicitante: Sigma-Aldrich Co. LLC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 3050 Spruce Street St. Louis, MO 63103 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: CHEN,FUQIANG, DAVIS,GREGORY D.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N15/10 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
  • C12N15/63 C12N 15/00 […] › Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión.
  • C12N9/22 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Ribonucleasas.

PDF original: ES-2714154_T3.pdf

 

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