Modificación y regulación del genoma basada en CRISPR.

Un procedimiento para modificar una secuencia cromosómica en una célula eucariota,

comprendiendo el procedimiento:

a) Introducir en la célula eucariota dos sistemas de nickasa guiados por ARN o ácido nucleico que codifica dichos sistemas, y, opcionalmente, un polinucleótido donador, en el que cada sistema de nickasa guiado por ARN comprende

(i) Una endonucleasa guiada por ARN que se modifica para escindir una cadena de una secuencia de cadena doble; y

(ii) Un ARN guía que comprende una primera región que tiene complementariedad con un sitio diana en la secuencia cromosómica y una segunda región que interactúa con la endonucleasa guiada por ARN, en la que cada sitio diana está seguido inmediatamene por un motivo adyacente de protoespaciador (PAM), y los sitios diana de las dos endonucleasas guiadas por ARN están en cadenas opuestas de la secuencia cromosómica; y

b) Cultivar la célula eucariótica de manera que las dos endonucleasas guiadas por ARN escinden cadenas opuestas de la secuencia cromosómica en estrecha cercanía, lo suficiente como para introducir una rotura de cadena doble en la secuencia cromosómica, y reparar la rotura de cadena doble mediante un proceso de reparación de ADN que lleva a la modificación de la secuencia cromosómica, en la que el procedimiento no comprende un procedimiento para modificar la identidad genética de la línea germinal de un ser humano y, en el que el procedimiento no comprende un procedimiento para el tratamiento del cuerpo humano o animal mediante cirugía o terapia.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E16183725.

Solicitante: Sigma-Aldrich Co. LLC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 3050 Spruce Street St. Louis, MO 63103 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: CHEN,FUQIANG, DAVIS,GREGORY D.

Fecha de Publicación: 20 de Mayo de 2019.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N15/10 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
C12N15/63 C12N 15/00 […] › Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión.
C12N9/22 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Ribonucleasas.

PDF original: ES-2713243_T3.pdf

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