Método de cribado de productos naturales bioactivos.
Un método para seleccionar células procariotas mutantes para identificar a los productores de un agente citotóxico activo contra una célula diana,
comprendiendo el método los pasos de:
(a) proporcionar células de una especie procariota productora;
(b) generar un conjunto de células productoras mutantes por mutagénesis de transposones de las células del paso (a) con un transposón de activación (TnA), en el que el TnA comprende un promotor orientado hacia fuera (TnAP) capaz de aumentar la transcripción de un gen en o cerca de su sitio de inserción en el ADN de dichas células productoras;
(c) co-encapsular miembros individuales del conjunto del paso (b) con una o más células diana en microgotas, comprendiendo las microgotas un volumen de medio de crecimiento acuoso suspendido en un líquido portador inmiscible, generando así una biblioteca de microgotas que comprende cada una una célula productora mutante única y una o más células diana;
(d) incubar la biblioteca de microgotas del paso (c) en condiciones adecuadas para el co-cultivo de la célula productora mutante única y la(s) célula(s) diana(s) para producir una biblioteca de microcultivos, mediante la cual las células productoras mutantes producen un agente citotóxico activo contra las células diana superan las células diana en cada microcultivo; y
(e) seleccionar la biblioteca de microcultivos del paso (d) para microcultivos en los que las células diana han sido superadas o sobredimensionadas hasta su extinción por células productoras mutantes.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/GB2015/053774.
Solicitante: Nanna Therapeutics Limited.
Inventor/es: WILLIAMS,DAVID HUGH, WAIN,JOHN RICHARD, WOODS,STUART ROBERT.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12M1/12 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12M EQUIPOS PARA ENZIMOLOGIA O MICROBIOLOGIA (instalaciones para la fermentación de estiércoles A01C 3/02; conservación de partes vivas de cuerpos humanos o animales A01N 1/02; aparatos de cervecería C12C; equipos para la fermentación del vino C12G; aparatos para preparar el vinagre C12J 1/10). › C12M 1/00 Equipos para enzimología o microbiología. › con medios de esterilización, filtración o diálisis.
- C12N15/10 C12 […] › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
PDF original: ES-2732869_T3.pdf
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