(06/12/2017) Método de determinación simultánea de la composición de nucleótidos en sitios polimórficos designados ubicados dentro de una o más secuencias de nucleótidos diana, comprendiendo dichas secuencias de nucleótidos diana un polimorfismo no designado, comprendiendo dicho método las etapas siguientes: (a) proporcionar un conjunto de pares de cebadores oligonucleotídicos, siendo capaz cada par de aparearse con cadenas de polinucleótidos complementarias para delinear una región de la diana correspondiente que incluye al menos un sitio polimórfico designado; (b) poner en contacto dicho conjunto de cebadores oligonucleotídicos con dichas dianas en condiciones que…

(25/10/2017) Un método para encontrar una secuencia de polinucleótidos desconocida adyacente a una secuencia de polinucleótidos conocida en un DNA aislado, que comprende: a) digerir el DNA aislado que contiene una parte o toda la secuencia de polinucleótidos conocida y una secuencia de polinucleótidos desconocida adyacente con uno o más enzimas de restricción adecuados para producir una pluralidad de fragmentos de restricción de polinucleótidos digeridos; b) sintetizar una cadena complementaria de los fragmentos de restricción de polinucleótidos digeridos utilizando un cebador de oligonucleótidos, diseñado para unirse específicamente a la secuencia de…

(18/10/2017) Una molécula de ácido nucleico de internalización ("iNA") modificado para incluir al menos un resto efector, en donde al menos un resto efector comprende uno o más de un fármaco o resto detectable o combinación de los mismos, en el que el iNA: a. comprende un ARN que se une a una molécula de superficie celular en las células tumorales y en el que la molécula de superficie celular es distinto de antígeno de membrana específico de la próstata; b. es capaz de unión e internalización en más de un tipo de célula tumoral; y c. comprende ARN de aproximadamente 20 nucleótidos a aproximadamente 70 nucleótidos que tienen una estructura de tallo-bucle, según lo predicho por un algoritmo de plegamiento de ARN, en el que la estructura de tallo-bucle comprende al menos dos partes de bucle,…

(19/07/2017) Un método para determinar la evolución histológica de normal a un adenocarcinoma de esófago en un sujeto, comprendiendo el método: a) poner en contacto una muestra biológica que comprende células del esófago del sujeto con un conjunto de tres o más sondas cromosómicas, en condiciones para la hibridación específica de las sondas con sus dianas de ácido nucleico presentes en la muestra, en donde dichas sondas en dicho conjunto de sondas detectan ganancias o pérdidas, y se seleccionan del siguiente conjunto de sondas: i) una sonda específica del locus 8q24, una sonda específica del locus 20q13, una sonda específica del locus 17q11.2-12 y una sonda específica del locus 9p21; en donde el conjunto de tres o más sondas…

(19/04/2017) Un método para generar ácido nucleico circular monocatenario a partir de una muestra del ácido nucleico diana, comprendiendo dicho método: a) formar un complejo que comprende una transposasa y una pluralidad de polinucleótidos en horquilla, teniendo cada uno de dichos polinucleótidos en horquilla una región dúplex que comprende una secuencia de reconocimiento de la transposasa. b) mezclar dicho complejo con dicho ácido nucleico diana, fragmentando de este modo dicho ácido nucleico diana y ligando dichos polinucleótidos en horquilla a dicho ácido nucleico diana, para formar fragmentos de ácido nucleico unidos en horquilla, teniendo cada fragmento de ácido nucleico unido en horquilla una región del fragmento del ácido nucleico diana dúplex y un hueco del segmento de la base nucleotídica entre cada región del fragmento de ácido nucleico diana…

(12/04/2017) Un procedimiento para generar ácido nucleico amplificado a partir de ARN que comprende: a) exponer una secuencia molde de ARN a un conjunto de cebadores en condiciones de transcripción inversa, de tal manera que se genere una población mixta de las primeras cadenas de ADNc, en la que dicho conjunto de cebadores comprende cebadores individuales, comprendiendo cada uno: i) un sitio de secuencia de restricción en 5', (ii) una secuencia hexamérica aleatoria en 3' y (iii) una secuencia de código de barras localizada entre el sitio de secuencia de restricción en 5' y la secuencia hexamérica aleatoria en 3', en la que dicho sitio de secuencia de restricción en cada uno de dichos cebadores…

(01/02/2017) El método de identificación de ácidos nucleicos por una reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real incluyendo - introducción de muestras líquidas conteniendo ácido nucleico a zonas de reacción sobre la superficie superior de un sustrato termoconductor de un microchip ; - aislamiento de las muestras introducidas de la atmósfera; - contacto del ácido nucleico de la muestra con componentes de la reacción en cadena de la polimerasa durante el ciclo térmico de las muestras con extracción de calor a través de la superficie exterior del microchip ; - detección fluorescente del cambio de la cantidad de los productos de reacción en cadena de la polimerasa durante el ciclo térmico; …

(21/12/2016) Un método de análisis de muestras, que comprende: someter una mezcla de reacción que comprende: reactivos de PCR para amplificar una diana de ácido nucleico, y reactivos de segmentación flap para llevar a cabo un ensayo de segmentación flap en dicha diana de ácido nucleico, a las siguientes condiciones de termociclación: una primera serie de 5-15 ciclos de: i. una primera temperatura de al menos 90 ºC; ii. una segunda temperatura de 60 ºC a 75 ºC; iii. una tercera temperatura de 65 ºC a 75 ºC; seguida por: una segunda serie de 20-50 ciclos de: i. una cuarta temperatura de al menos 90 ºC; ii. una quinta temperatura que es al menos 10 ºC más baja que dicha segunda temperatura; iii. una sexta temperatura de 65 ºC a 75 ºC; no añadiéndose ningún reactivo adicional a dicha reacción entre…

(05/10/2016) Un aparato de diagnóstico , que comprende: un primer módulo configurado para extraer ácido nucleico simultáneamente de una pluralidad de muestras que contienen ácido nucleico , en donde el primer módulo comprende: un gradilla extraíble , comprendiendo la gradilla una pluralidad de carriles paralelos, comprendiendo cada carril un soporte paralelo y configurado para recibir un tubo de muestras extraíble situado junto al soporte paralelo en una correspondencia uno a uno con el soporte extraíble, estando configurado cada tubo de muestras para aceptar una de la pluralidad de muestras, en donde cada soporte comprende una cámara de proceso , una cámara para residuos , una o más puntas de pipeta , y uno o más receptáculos , en donde uno…

(17/08/2016) Un método para sintetizar simultáneamente una matriz de transgenes, que comprende las etapas de: a. proporcionar un vector plasmídico de clonación primario que comprende un armazón, comprendiendo el armazón (i) al menos un primer punto de acoplamiento y un segundo punto de acoplamiento estando cada punto de acoplamiento fijado en el armazón y que comprenden al menos un sitio de restricción raro de más de 6 nucleótidos para una enzima de restricción rara no variable y (ii) un único sitio para HE en orientación directa localizado secuencia arriba desde el extremo 5' del primer punto de acoplamiento y un único sitio para HE en orientación inversa localizado secuencia abajo desde el extremo 3' del segundo punto de acoplamiento; b. escindir el primer punto de acoplamiento con una primera enzima de restricción rara no variable que se corresponde…

(13/07/2016) Un método para detectar una anormalidad genética que implica una diferencia cuantitativa entre secuencias genéticas maternas y fetales por la detección diferencial de las secuencias diana en una mezcla de material genético materno y fetal, que comprende las etapas de: a)la distribución del material genético en muestras discretas, conteniendo cada muestra en promedio no más de una secuencia diana por muestra, en el que las muestras discretas están en muestras de reacción donde se pueden analizar las secuencias diana; b)la medición de la presencia de diferentes secuencias diana en las muestras discretas, en la que la medición comprende la secuenciación directa del material genético o secuenciación de derivados amplificados…

(29/06/2016) Un método de PCR múltiple que comprende: amplificar múltiples ácidos nucleicos diana usando pares de cebadores anidados específicos de diana que comprenden cebadores directo externo, directo interno, inverso interno e inverso externo para cada diana en una primera reacción de amplificación, en el que la concentración de cebadores anidados es de 100-1000 nM, y en el que al menos uno de dichos cebadores internos comprende nucleótidos adicionales para proporcionar una secuencia adicional que no es específica para los ácidos nucleicos diana, de modo que la amplificación del ácido nucleico diana con dicho cebador también incorporará en el amplicón resultante un sitio de unión para un cebador común que, a diferencia de un cebador específico de diana, puede usarse para…

(01/06/2016) Un método para determinar la cigosidad de una planta de maíz que comprende un evento de AAD-1 de maíz DAS-40278-9, comprendiendo dicho evento una construcción transgénica que comprende un gen AAD-1, estando dicha construcción transgénica flanqueada por ADN genómico de maíz flanqueante en 5' y por ADN genómico de maíz flanqueante en 3', comprendiendo dicho método: obtener una muestra de ADN de ADN genómico de dicha planta de maíz; producir una muestra de contacto poniendo en contacto dicha muestra de ADN con a. un primer cebador del evento y un segundo cebador del evento, en los que dicho primer cebador del evento se une específicamente a dicha construcción transgénica tal y como se define por los restos 1.874-6.689 de la SEQ ID NO: 29, dicho segundo cebador del evento se une específicamente con dicho ADN genómico de…

(13/04/2016) Un método para el análisis celular en una célula o partícula celular, en donde dicha célula es una célula entera de origen animal, vegetal, bacteriano o fúngico, o dicha partícula celular se selecciona del grupo que consiste en un cromosoma aislado, un núcleo aislado, una mitocondria aislada, un cloroplasto aislado, y un virus aislado, comprendiendo el método: (a) fijar y permeabilizar la célula o la partícula celular; (b) incubar la célula o la partícula celular en una solución de hibridación con una sonda de ácido nucleico específica para un ácido nucleico diana, donde la sonda marcada con una etiqueta elemental única tal que…

(06/04/2016) Un dispositivo microfluídico, que comprende: una primera región de procesamiento; estando dicho miembro de retención configurado para retener preferentemente uno o más polinucleótidos en una muestra, en comparación con los inhibidores de la reacción en cadena de la polimerasa en la muestra, donde dicho miembro de retención comprende una pluralidad de partículas de retención de polinucleótidos, y comprendiendo dicha pluralidad de retención al menos un ligando que comprende una poliamida poli-catiónica, donde además el miembro de retención se configura para retener polinucleótidos a un primer pH y liberar polinucleótidos a un segundo pH, donde el segundo pH es al menos aproximadamente 10; un reservorio de fluido…

(06/04/2016) Un método para la detección de un carcinoma de esófago o una lesión precursora en un sujeto, en donde el carcinoma o la lesión precursora detectado selectivamente se selecciona del grupo que consiste en displasia de alto grado (DAG) y adenocarcinoma de esófago (AE), comprendiendo el método: a) poner en contacto una muestra biológica que comprende células del esófago procedentes del sujeto del que se sospecha que tiene un carcinoma de esófago con un conjunto de sondas cromosómicas para detectar selectivamente un carcinoma de esófago o una lesión precursora en la muestra, si la hubiera, en condiciones para hibridar específicamente las sondas a sus ácidos nucleicos diana presentes en la muestra; en donde dicho conjunto consiste…

(23/02/2016) Un método de determinación de la fracción de ácidos nucleicos fetales en una muestra materna de sangre que comprende una mezcla de ADN fetal y genómico, en el que dicho ADN fetal y genómico es ADN libre de células (ADNlc), comprendiendo dicho método: (a) amplificar una pluralidad de ácidos nucleicos diana polimórficos en dicha mezcla, en la que cada ácido nucleico diana polimórfico amplificado comprende al menos un sitio polimórfico, usando pares de cebadores cada uno capaz de amplificar una secuencia de ácidos nucleicos diana que comprende un sitio polimórfico en una reacción de PCR de múltiplex, para generar un panel…

(17/02/2016) Una biblioteca de diferentes complejos bifuncionales, donde cada complejo bifuncional comprende a una molécula portada que está adherida covalentemente a una plantilla de nucleótidos y que está adherida covalentemente a una plantilla complementaria de nucleótidos, Donde el número de diferentes complejos bifuncionales en la biblioteca es de por lo menos 103, Donde las moléculas portadas son seleccionadas de un grupo que consiste de policiclos alifáticos; policiclos aromáticos; poliheterociclos; hidrocarbonos de cadena abierta monofuncionales, difuncionales, o trifuncionales; carbociclos no aromáticos monofuncionales, difuncionales o trifuncionales; hidrocarbonos monocíclicos, bicíclicos o tricíclicos; hidrocarbonos policíclicos conectados; heterociclos no aromáticos monofuncionales,…

(17/02/2016) Un método para sintetizar una composición de moléculas de diferentes plantillas que comprenden una pluralidad de grupos funcionales, comprendiendo dicho método las etapas de i) proporcionar una pluralidad de plantillas que tienen diferentes elementos de codificación y / o un orden diferente de elementos de codificación, dichas plantillas que comprenden una pluralidad de nucleótidos y una secuencia de 3 a 100 elementos de codificación, en el que cada elemento de codificación comprende al menos un grupo de reconocimiento capaz de reconocer un predeterminado elemento que complementa, y en el que cada elemento de codificación comprende o consiste en de 4 a 100 subunidades, ii) proporcionar una pluralidad de bloques de construcción, en el que cada bloque comprende la construcción a) al menos un elemento…