Método para determinar ácidos nucleicos por reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real y un dispositivo para su implementación.

El método de identificación de ácidos nucleicos por una reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real incluyendo

- introducción de muestras líquidas conteniendo ácido nucleico a zonas de reacción (1) sobre la superficie superior de un sustrato termoconductor (3) de un microchip (10);



- aislamiento de las muestras introducidas (2) de la atmósfera;

- contacto del ácido nucleico de la muestra (2) con componentes de la reacción en cadena de la polimerasa durante el ciclo térmico de las muestras (2) con extracción de calor a través de la superficie exterior del microchip (10);

- detección fluorescente del cambio de la cantidad de los productos de reacción en cadena de la polimerasa durante el ciclo térmico;

- identificación de la cantidad del ácido nucleico inicial en las muestras (2) por la dinámica de crecimiento de la señal fluorescente,

caracterizado porque

el microchip (10) se usa con el sustrato termoconductor (3) con el coeficiente de conductividad térmica superior a 1 W/cm·K y con el coeficiente de difusividad térmica superior a 0,6 cm2/s,

donde las dimensiones de la zona de reacción se eligen desde el rango de 101-104 μm en longitud y anchura y 101- 103 um en profundidad, preferiblemente, 5 x 102-5 x 103 μm en longitud y anchura, y 2x102-5x102 μm en profundidad,

donde las zonas de reacción (1) sobre la superficie del microchip (10) están separadas del sustrato termoconductor (3) por una capa de un material pasivante (4) que está unido de forma covalente a la superficie del sustrato termoconductor (3) mientras que las muestras introducidas (2) están aisladas separándolas de la atmósfera por una capa de líquido (5) inmiscible con agua que se retiene sobre la superficie superior del sustrato termoconductor (3) por medio de una barrera periférica (6), no excediendo de 0,04 s la relación de la masa térmica agregada del microchip (10) con muestras introducidas (2) y la capa del líquido (5) inmiscible con agua a la conductancia térmica del sustrato de microchip (3), donde un material del sustrato termoconductor (3) es aluminio.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/RU2009/000531.

Solicitante: Stroganov, Alexander Anatolievich.

Nacionalidad solicitante: Federación de Rusia.

Dirección: Ul. Stasovoy, 2-479 St. Petersburg 195252 FEDERACION RUSA.

Inventor/es: STROGANOV,ALEXANDER ANATOLIEVICH, SLYADNEV,MAKSIM NIKOLAEVICH.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12P19/34 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA.C12P 19/00 Preparación de compuestos que contienen radicales sacárido (ácido cetoaldónico C12P 7/58). › Polinucleótidos, p. ej. ácidos nucleicos, oligorribonucleótidos.
  • C12Q1/25 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen enzimas que no pueden ser clasificarsse en los grupos C12Q 1/26 - C12Q 1/70.
  • C12Q1/68 C12Q 1/00 […] › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2623605_T3.pdf

 

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