COMPUESTOS DE PROLINA COMO INHIBIDORES DE LA PROTEASA SERINA NS3 PARA USO EN EL TRATAMIENTO DE INFECCION POR EL VIRUS DE LA HEPATITIS C.

Un compuesto seleccionado de: **(Ver fórmula)** y O una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto

Compuestos de prolina como inhibores de la proteasa serina NS3 para uso en el tratamiento de infección por el virus de la hepatitis C.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a nuevos inhibidores de la proteasa del virus de la Hepatitis C ("VHC"), a composiciones farmacéuticas que contienen uno o más de dichos inhibidores, a métodos para preparar dichos inhibidores y a métodos para usar dichos inhibidores para preparar un medicamento para el tratamiento de la hepatitis C y trastornos relacionados. Esta invención describe específicamente nuevos compuestos peptídicos como inhibidores de la proteasa serina NS3/NS4a del VHC. La invención descrita en esta solicitud está relacionada con la Solicitud de Patente Serie Nº 10/052.386, presentada el 18 de enero de 2002.

Antecedentes de la invención

El virus de la Hepatitis C (VHC) es un virus de ARN monocatenario con sentido (+) que ha estado implicado como el principal agente causante de la hepatitis no A, no B (NANBH), particularmente NANBH asociada con la sangre (BB-NANBH) (véase, la Solicitud de Patente Internacional Publicación Nº WO 89/04669 y la Solicitud de Patente Europea Publicación Nº EP 381.216). La NANBH debe distinguirse de otros tipos de enfermedades hepáticas inducidas por virus, tales como el virus de la hepatitis A (VHA), el virus de la hepatitis B (VHB), y el virus de la hepatitis Delta (VHD), el citomegalovirus (CMV) y el virus de Epstein-Barr (VEB), así como también, de otras formas de enfermedades hepáticas tales como alcoholismo y cirrosis biliar primaria.

Recientemente, se ha identificado, clonado y expresado una proteasa del VHC necesaria para el procesamiento de polipéptidos y la replicación viral (véase, por ejemplo, la Patente de Estados Unidos Nº 5.712.145). Estas poliproteínas de aproximadamente 3.000 aminoácidos contienen, desde el extremo amino hasta el extremo carboxilo, una proteína de nucleocápside (C), proteínas de envoltura (E1 y E2) y varias proteínas no estructurales (NS1, 2, 3, 4a, 5a y 5b). La NS3 es una proteína de aproximadamente 68 kda, codificada por aproximadamente 1.893 nucleótidos del genoma del VHC, y tiene dos dominios diferentes: (a) un dominio de proteasa serina constituido por aproximadamente 200 de los aminoácidos N-terminales; y (b) un dominio ATPasa dependiente de ARN en el extremo C de la proteína. Se considera a la proteasa NS3 como un miembro de la familia de la quimotripsina debido a las similitudes en la secuencia de la proteína, la estructura tridimensional total y el mecanismo de catálisis. Otras enzimas del tipo quimotripsina son la elastasa, el factor Xa, la trombina, tripsina, plasmina, uroquinasa, tPA y PSA. La proteasa serina NS3 del VHC es responsable de la proteolisis del polipéptido (poliproteína) en las uniones NS3/NS4a, NS4a/NS4b, NS4b/NS5a y NS5a/NS5b y es por tanto responsable de la generación de cuatro proteínas virales durante la replicación viral. Esto ha hecho que la proteasa serina NS3 del VHC sea una diana atractiva para la quimioterapia antiviral.

Se ha determinado que la proteína NS4a, un polipéptido de aproximadamente de 6 kda, es un co-factor de la actividad de la proteasa serina de NS3. La auto-escisión de la unión NS3/NS4a por la proteasa serina NS3/NS4a se produce intramolecularmente (es decir, en cis) mientras que los otros sitios de escisión se procesan intermolecularmente (es decir, en trans).

El análisis de los sitios de escisión natural para la proteasa del VHC reveló la presencia de cisteína en P1 y de serina en P1' y, que estos restos se conservan estrictamente en las uniones NS4a/NS4b, NS4b/NS5a y NS5a/NS5b. La unión NS3/NS4a contiene una treonina en P1 y una serina en P1'. Se considera que la sustitución Cys rightarrow Thr en NS3/NS4a explica la necesidad de un procesamiento en cis en lugar de en trans en esta unión. Véase, por ejemplo, Pizzi et al (1994), Proc. Natl. Acad. Sci (Estados Unidos) 91:888-892, Failla et al (1996) Folding & Design 1: 35-42. El sitio de escisión NS3/NS4a también es más tolerante a la mutagénesis que los otros sitios. Véase, por ejemplo, Kollyhalov et al (1994) J. Virol. 68: 7525-7533. También se ha descubierto que se requieren restos ácidos en la región cadena arriba del sitio de escisión, para una escisión eficaz. Véase, por ejemplo, Komoda et al (1994), J. Virol. 68: 7351-7357.

Los inhibidores de la proteasa del VHC que se han descrito incluyen antioxidantes (véase, la Solicitud de Patente Internacional Publicación Nº WO 98/14181), determinados péptidos y análogos de péptidos (véase, la Solicitud de Patente Internacional Publicación Nº WO 98/17679, Landro et al. (1997), Biochem. 36: 9348-9348, Ingallinella et al., (1998), Biochem. 37: 8906-8914, Llinás-Brunet et al., (1998), Bioorg. Med. Chem. Lett. 8: 1713-1718), inhibidores en base al polipéptido eglin c de 70 aminoácidos (Martin et al (1998), Biochem. 37: 11.459-11.468, inhibidores de afinidad seleccionados del inhibidor de la tripsina secretora pancreática humana (hPSTI-C3) y repertorios de minicuerpos (Mbip) (Dimasi et al (1997), J. Virol. 71: 7461-7469), cV_HE2 (un fragmento de anticuerpo de dominio variable "camelizado") (Martin et al (1997) Protein Eng. 10: 607-614) y a1-antiquimotripsina (ACT) (Elzouki et al.) (1997), J. Hepat. 27: 42-28). Recientemente, se ha descrito una ribozima diseñada para destruir de manera selectiva el ARN del virus de la hepatitis C (véase, BioWorld Today 9 (217): 4 (10 de Noviembre de 1998)).

También se ha hecho referencia a las Publicaciones PCT Nº WO/ 98/17679, publicada el 30 de abril de 1998 (Vertex Pharmaceuticals Incorporated); WO 98/22496, publicada el 28 de mayo de 1998 (F. Hoffmann-La Roche AG); y WO 99/07734, publicada el 18 de febrero de 1999 (Boehringer Ingelheim Canada Ltd.).

El VHC ha estado implicado en la cirrosis de hígado y en la inducción del carcinoma hepatocelular. Actualmente el pronóstico para los pacientes que padecen una infección por VHC es deficiente. La infección por VHC es más difícil de tratar que las otras formas de hepatitis debido a la falta de inmunidad o remisión asociada con la infección por VHC. Los datos actuales indican un índice de supervivencia inferior al 50% en los cuatro años posteriores al diagnóstico de cirrosis. Los pacientes diagnosticados con un carcinoma hepatocelular resecable localizado tienen un índice de supervivencia de cinco años del 10-30%, mientras que los diagnosticados con un carcinoma hepatocelular no resecable localizado tienen un índice de supervivencia de cinco años inferior al 1%.

Se hace referencia a A. Marchetti et al., Synlett, S1, 1.000-1.002 (1999) que describe la síntesis de análogos bicíclicos de un inhibidor de la proteasa NS3 del VHC. Un compuesto descrito en este documento tiene la fórmula:

Además, se hace referencia a W. Han et al., Bioorganic & Medicinal Chem. Lett, (2000) 10, 711-713, que describe la preparación de determinadas a-cetoamidas, a-cetoésteres y a-dicetonas que contienen funcionalidades alilo y etilo.

También se hace referencia al documento WO 00/09558 (Cesionario: Boehringer Ingelheim Limited; publicada el 24 de febrero de 2000), que describe derivados peptídicos de la fórmula:

donde los diversos elementos se definen en este documento. Un compuesto ilustrativo de esta serie es:

También se hace referencia al documento WO 00/09543 (Cesionario: Boehringer Ingelheim Limited; publicado el 24 de febrero de 2000) que describe derivados peptídicos de la fórmula:

donde se definen los diversos elementos en este documento. Un compuesto ilustrativo de esta serie es:

Las terapias actuales para la Hepatitis C incluyen al interferón-a (INF_a) y la terapia de combinación con ribavirina e interferón. Véase, por ejemplo, Beremguer et al. (1998) Proc. Assoc. Am. Physicians (110(2):...

1. Un compuesto seleccionado de:

y

O una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto.

2. Una composición farmacéutica que comprende como ingrediente activo al menos un compuesto de la reivindicación 1.

3. La composición farmacéutica de la reivindicación 2 para el tratamiento de trastornos asociados con el VHC.

4. La composición farmacéutica de la reivindicación 2 que adicionalmente comprende al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable.

5. La composición farmacéutica de la reivindicación 4, que adicionalmente contiene al menos un agente antiviral.

6. La composición farmacéutica de la reivindicación 5, que adicionalmente aún contiene un interferón o un interferón pegilado.

7. La composición farmacéutica de la reivindicación 6, en la que al menos dicho agente antiviral es ribavirina y dicho interferón es a-interferón.

8. El uso de un compuesto de la reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para el tratamiento de trastornos asociados con la proteasa del VHC.

9. El uso de la reivindicación 8, en el que dicho tratamiento comprende administración subcutánea.

10. Un método para preparar una composición farmacéutica para el tratamiento de trastornos asociados con la proteasa del VHC, comprendiendo dicho método poner en contacto íntimo un compuesto de la reivindicación 1 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.