Un anticuerpo monoclonal anti-IL23, o la porción de unión al antígeno de este,

que comprende: (i) una secuencia de LCDR1 de acuerdo con la SEQ ID NO:28; (ii) una secuencia de LCDR2 de acuerdo con la SEQ ID NO:37; (iii) una secuencia de LCDR3 de acuerdo con la ID NO:40; (iv) una secuencia de HCDR1 de acuerdo con la SEQ ID NO:3; (v) una secuencia de HCDR2 de acuerdo con la SEQ ID NO:8; y (vi) una secuencia de HCDR3 de acuerdo con la SEQ ID NO:16 o SEQ ID NO:19

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere al campo de la medicina, en particular al campo de los anticuerpos monoclonales contra la interleuquina 23 (IL-23). Más específicamente, la invención se refiere a anticuerpos monoclonales anti-IL-23 neutralizantes para el tratamiento de una enfermedad autoinmune.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Se considera que IL-23 es una citoquina importante para la activación de una variedad de células inflamatorias que son necesarias para la inducción de la inflamación crónica. IL-23 tiene una función separada pero complementaria a IL-12, una citoquina heterodimérica de 70 KDa que consiste en subunidades de p40 y p35 unidas en forma covalente. IL-23 se compone de la misma subunidad p40 que IL-12 pero apareada covalentemente con una subunidad p19 (Langrish et. al., Immunological Reviews 202:96-105, 2004).

Además, se ha implicado a IL-23 en el cumplimiento de un papel importante en las respuestas de las células T de memoria/patogénicas al promover la secreción de la citoquina proinflamatoria IL-17 a partir de las células T activadas. Existe una evidencia creciente de que altos niveles de IL-17 se asocian con enfermedades inflamatorias, autoinmunes, que incluyen artritis reumatoide, psoriasis y esclerosis múltiple (Aggarwal et al., J. Biol. Chem 278(3):1910-1914, 2003). En consecuencia, un anticuerpo neutralizante para IL-23 inhibirá la secreción y los efectos proinflamatorios de IL-17 y, en última instancia, el efecto de IL-17 sobre las enfermedades inflamatorias.

El documento WO 2004/081190 pretende describir procedimientos para el tratamiento de tumores mediante el uso de agonistas y antagonistas de IL-23. Se dice que el documento WO 2004/071517 se basa en la observación de que un agonista o antagonista de IL-23 modula las afecciones y los trastornos inflamatorios del sistema nervioso y el aparato gastrointestinal. A partir de este momento esta solicitud tiene por objeto proporcionar un procedimiento para tratar un trastorno mediado por IL-23 que comprende administrar una cantidad efectiva de un agonista o antagonista de IL-23.

Si bien previamente se han informado anticuerpos para IL-23 humana, no se han desvelado anticuerpos neutralizantes de alta afinidad para IL-23 humana que reconocen un epitopo específico sobre la subunidad p19. Sin duda, se necesitan terapias modificadoras de la enfermedad para el tratamiento de la enfermedad autoinmune.

Por consiguiente, se necesita un anticuerpo neutralizante de alta afinidad que se una específicamente a la subunidad p19 de la IL-23 y de este modo bloquee las acciones proinflamatorias de IL-17, que se pueda utilizar como agente terapéutico. Un anticuerpo de alta afinidad que se una específicamente a la subunidad p19 de la IL-23 es también conveniente ya que puede permitir administrar el anticuerpo a un paciente por vía subcutánea en vez de por vía intravenosa. También es necesario un anticuerpo que se una específicamente a la subunidad p19 de IL-23 con un valor de IC50 bajo en un ensayo de inhibición de IL-23 a fin de generar un anticuerpo anti-IL-23 terapéutico con una dosis terapéutica efectiva mínima. La presente invención satisface estas necesidades y proporciona ventajas relacionadas, lo que proporciona en consecuencia un tratamiento útil para la enfermedad autoinmune. SUMARIO DE LA INVENCIÓN

La presente invención proporciona un anticuerpo monoclonal anti-IL-23 que comprende seis péptidos seleccionados del grupo que consiste en péptidos con una secuencia que se muestra en la (a) SEQ ID NO:28; (b) SEQ ID NO:37; (c) SEQ ID NO:40; (d) SEQ ID NOs:3; (e) SEQ ID NO:8 y (f) SEQ ID NOs:16 o 19 (es decir, un péptido de cada uno de (a-f)), en LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 y HCDR3, respectivamente.

Una realización de esta invención es un anticuerpo o la porción de unión al antígeno de este que se une específicamente a la subunidad p19 de IL-23, neutraliza la actividad de IL-23, tiene una KD de menos de aproximadamente 160 pM, y tiene una IC50 de menos de aproximadamente 20 pM.

Otra realización es un anticuerpo, o porción de unión al antígeno de este, que se une a la subunidad de p19 de IL-23 dentro de los residuos de aminoácidos 129 a 159 de la secuencia de aminoácidos que se muestra en la SEQ ID NO:60.

Otra realización de esta invención es un anticuerpo o la porción de unión al antígeno de este que comprende la región variable de la cadena pesada que se muestra en la SEQ ID NO:52, una región variable de la cadena liviana que se muestra en la SEQ ID NO:57, una región constante de la cadena pesada que se muestra en la SEQ ID NO:62 y la región constante de la cadena liviana que se muestra en la SEQ ID NO:63.

Otra realización de la presente invención es un anticuerpo o la porción de unión al antígeno de este que se une específicamente a la subunidad p19 de IL-23 que comprende una región variable de la cadena liviana que contiene una secuencia de aminoácidos que se muestra en la SEQ ID NO:57 y una región variable de la cadena pesada que contiene una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en las SEQ ID NOs:48 o 52.

Otra realización de la invención proporciona anticuerpos monoclonales anti-IL23 humanizados, y sus porciones de unión al antígeno, que se unen a un epitopo específico que comprende los residuos de aminoácidos 129 a 159 de la subunidad p19 de IL-23; (residuos 129-159 de la SEQ ID NO: 60), y antagonizan o neutralizan al menos una actividad biológica in vitro o in vivo asociada con IL-23 o una porción de este.

En otra realización, los anticuerpos de la invención tienen una IC50 menor o igual a aproximadamente 100 pM, 75 pM, 50 pM, 25 pM, 20 pM, 15 pM, 13 pM, 10 pM, 8 pM, 5 pM, 2 pM o 1 pM en un ensayo de esplenocitos murinos in vitro como se describe en el Ejemplo 1. Preferentemente, los anticuerpos de la invención tienen una IC50 menor o igual a aproximadamente 20 pM.

En otra realización, los anticuerpos de la invención se caracterizan por una fuerte afinidad de unión (KD) por la subunidad p19 de la IL-23 humana, es decir, menor que aproximadamente 160 pM, 100 pM, 75 pM, 50 pM o 25 pM. Preferentemente, los anticuerpos de la invención tienen una KD menor que aproximadamente 100 pM. Más aún, los anticuerpos de la invención se caracterizan también con una constante de velocidad koff de la subunidad p19 de IL-23 humana de menos de 4 x 10-4 seg -1 .

Otra realización de la presente invención incluye el anticuerpo aislado de cualquiera de las realizaciones anteriores en las que el anticuerpo es un anticuerpo de longitud completa, un anticuerpo sustancialmente intacto, un anticuerpo quimérico, un fragmento Fab, un fragmento F(ab')2 o un fragmento Fv de cadena simple. Preferentemente, el anticuerpo aislado, o porción de unión al antígeno de este de cualquiera de las realizaciones anteriores es un anticuerpo humanizado.

La invención incluye ácidos nucleicos aislados que comprenden polinucleótidos que codifican los anticuerpos descritos y reivindicados en la presente memoria. La invención también abarca células huésped transfectadas con vectores que contienen estos polinucleótidos que expresan los anticuerpos descritos y reivindicados en la presente memoria.

La invención abarca un procedimiento para tratar la enfermedad autoinmune que comprende administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un anticuerpo descrito y reivindicado en la presente memoria. Preferentemente, la enfermedad autoinmune tratada es esclerosis múltiple.

Finalmente, la invención abarca el uso de un anticuerpo para la fabricación de

un medicamento para tratar una enfermedad autoinmune en un sujeto que lo necesita.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Esta presente invención proporciona secuencias de aminoácidos de anticuerpos humanos aislados, o porciones de unión al antígeno de estos, que se unen específicamente a la subunidad p19 de IL-23 y son útiles para el tratamiento de la enfermedad autoinmune.

A fin de que la presente invención se pueda comprender más fácilmente, primero se definen ciertos términos.

La subunidad p19 de la IL-23 humana es un polipéptido de 189 aminoácidos que contiene una secuencia líder de 21 aminoácidos [SEQ ID NO:60]. El término "anticuerpo", como se usa en la presente memoria, se refiere a moléculas de inmunoglobulina compuestas de cuatro cadenas de polipéptidos, dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas livianas (L) interconectadas por enlaces...

1. Un anticuerpo monoclonal anti-IL23, o la porción de unión al antígeno de este, que comprende:

(i) una secuencia de LCDR1 de acuerdo con la SEQ ID NO:28;

(ii) una secuencia de LCDR2 de acuerdo con la SEQ ID NO:37;

(iii) una secuencia de LCDR3 de acuerdo con la ID NO:40;

(iv) una secuencia de HCDR1 de acuerdo con la SEQ ID NO:3;

(v) una secuencia de HCDR2 de acuerdo con la SEQ ID NO:8; y

(vi) una secuencia de HCDR3 de acuerdo con la SEQ ID NO:16 o SEQ ID NO:19.

2. El anticuerpo, o la porción de unión al antígeno de este, de la reivindicación 1 que es un anticuerpo humanizado.

3. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno de este de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende la región variable de la cadena pesada que se muestra en la SEQ ID NO:48 o en la SEQ ID NO:52 y una región variable de la cadena liviana que se muestra en la SEQ ID NO:57.

4. El anticuerpo de la reivindicación 3, en el que la cadena pesada del anticuerpo tiene la región constante de la SEQ ID NO:61 o la región constante de la SEQ ID NO:62 y la cadena liviana del anticuerpo tiene la región constante de la SEQ ID NO:63.

5. El anticuerpo de la reivindicación 3 en el que la cadena pesada del anticuerpo tiene la región constante que se muestra en la SEQ ID NO: 62 y la cadena liviana del anticuerpo tiene la región constante que se muestra en la SEQ ID NO:63.

6. Una composición farmacéutica que comprende los siguientes:

(a) el anticuerpo o la porción de unión al antígeno de este de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5; y (b) un portador farmacéutico aceptable.

7. Un anticuerpo o la porción de unión al antígeno de este, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para uso como medicamento.

8. El uso del el anticuerpo o porción de unión al antígeno de este, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para la fabricación de un medicamento para tratar un paciente con esclerosis múltiples remitente recidivante.

9. Un anticuerpo o la porción de unión al antígeno de este de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para usar en el tratamiento de la esclerosis múltiple remitente recidivante.