(19/04/2017) Un método para generar ácido nucleico circular monocatenario a partir de una muestra del ácido nucleico diana, comprendiendo dicho método: a) formar un complejo que comprende una transposasa y una pluralidad de polinucleótidos en horquilla, teniendo cada uno de dichos polinucleótidos en horquilla una región dúplex que comprende una secuencia de reconocimiento de la transposasa. b) mezclar dicho complejo con dicho ácido nucleico diana, fragmentando de este modo dicho ácido nucleico diana y ligando dichos polinucleótidos en horquilla a dicho ácido nucleico diana, para formar fragmentos de ácido nucleico unidos en horquilla, teniendo cada fragmento de ácido nucleico unido en horquilla una región del fragmento del ácido nucleico diana dúplex y un hueco del segmento de la base nucleotídica entre cada región del fragmento de ácido nucleico diana…

(22/03/2017) Un método para escindir una secuencia de reconocimiento de diana de ADN bicatenario en una célula eucariota que comprende: introducir en dicha célula eucariota un ácido nucleico que codifica una meganucleasa; o una proteína meganucleasa; en el que dicha meganucleasa escinde dicha secuencia de reconocimiento de diana de ADN bicatenario; y en el que dicha meganucleasa es una meganucleasa recombinante que comprende: un polipéptido que tiene al menos un 85 % de similitud de secuencia con los restos 2-153 de la meganucleasa I-CreI de SEQ ID NO: 1; y que tiene especificidad por un semisitio de secuencia…

(08/03/2017) Un procedimiento de integración de una secuencia exógena en una secuencia cromosómica de una célula eucariota, comprendiendo el procedimiento: a) introducir en la célula eucariota (i) al menos una endonucleasa guiada por ARN que comprende al menos una seña de localización nuclear o ácido nucleico que codifica al menos una endonucleasa guiada por ARN que comprende al menos una señal de localización nuclear, en la que la al menos una endonucleasa guiada por ARN es un sistema de proteínas repeticiones palindrómicas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas (CRISPR)/(Cas) asociado a CRISPR (CRISPR /Cas) de tipo II y el sistema de proteínas CRISPR/Cas…

(19/10/2016) Un aminoácido que tiene la fórmula (A):**Fórmula** en la que: L1 y L2 son independientemente un alquileno de cadena lineal de 3 a 7 átomos de carbono; Ra es hidrógeno; alifático cíclico o acíclico, ramificado o no ramificado, sustituido o no sustituido; heteroalifático cíclico o acíclico, ramificado o no ramificado, sustituido o no sustituido; arilo sustituido o no sustituido; heteroarilo sustituido o no sustituido; acilo cíclico o acíclico, sustituido o no sustituido; o Ra es un grupo protector de amino adecuado; cada caso de Rc es, independientemente, hidrógeno; alifático cíclico o acíclico, ramificado o no ramificado,…

(14/09/2016) Un método para producir una meganucleasa recombinante que tiene especificidad por un semisitio de secuencia de reconocimiento alterada que difiere en al menos un par de bases respecto de un semisitio dentro de una secuencia de reconocimiento de la meganucleasa I-Crel seleccionada del grupo que consiste en las SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 y SEQ ID NO: 5, comprendiendo dicho método: A. diseñar una secuencia polipeptídica que tiene una similitud de al menos el 85 % con los restos 2-153 de la meganucleasa I-Crel de SEQ ID NO: 1, comprendiendo dicho diseño modificar la secuencia de los restos 2-153 de la meganucleasa I-Crel de SEQ ID NO: 1, en donde se ha alterado la especificidad en la posición -1: (a) a una T en una hebra codificante mediante una modificación seleccionada entre el…

(06/04/2016) Una meganucleasa monocatenaria recombinante que comprende: una primera subunidad LAGLIDADG que comprende una secuencia polipeptídica que tiene al menos un 85 % de identidad de secuencia con los restos 9-151 de una meganucleasa I-CreI de tipo silvestre de SEQ ID NO: 1 y que tiene un primer semi-sitio de reconocimiento; una segunda subunidad LAGLIDADG que comprende una secuencia polipeptídica que tiene al menos un 85 % de identidad de secuencia con los restos 9-151 de una meganucleasa I-CreI de tipo silvestre de SEQ ID NO: 1 y que tiene un segundo semi-sitio de reconocimiento; en la que dichas primera y segunda subunidades LAGLIDADG están unidas covalentemente mediante un engarce polipeptídico, en donde dicho engarce es un engarce flexible y comprende más de 25 y menos de 31 restos; …

(27/01/2016) Una ribonucleasa, que escinde la hebra de ARN en híbridos de ADN-ARN, en la que dicha ribonucleasa es una proteína de fusión que comprende un derivado del dominio catalítico de la ribonucleasa HI (RNasa HI), en la que el derivado del dominio catalítico de la RNasa HI es de Bacillus halodurans, que comprende el polipéptido codificado por los nucleótidos 175 a 588 del gen rnhA mostrado en la SEC ID Nº: 1, y en la que el derivado del dominio catalítico de la RNasa HI comprende al menos una sustitución de un residuo de aminoácido en el dominio de unión al sustrato seleccionada entre: K81A, K89E y K123A en referencia a la secuencia del polipéptido codificada por la SEC ID Nº: 1, preferentemente contiene todas las sustituciones K81A, K89E y K123A en…

(07/01/2016) Uso de una endorribonucleasa de ARNbc para la escisión específica de secuencia de un sustrato de ARNbc, en el que dicha endorribonucleasa comprende la secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº 1 o SEC ID Nº 1 con la mutación D94R; y tiene el bucle que se localiza en, e interacciona con, un surco principal de ARNbc, que corresponde al bucle que se localiza en, e interacciona con, un surco principal de ARNbc en el modelo de estructura de endorribonucleasa Mini III en el complejo con ARNbc; y en el que dicha endorribonucleasa de ARNbc presenta la actividad específica de secuencia de ARNbc dentro de la secuencia consenso**Fórmula** en la que H ≥ A o C o U; D ≥ A o G o U; preferentemente dicha endorribonucleasa de ARNbc presenta la actividad…

(23/12/2015) Un procedimiento de formación de un conjugado entre un péptido de anticuerpo y un grupo modificador, en el que dicho grupo modificador está unido mediante enlace covalente a dicho péptido de anticuerpo por medio de un grupo ligador glicosilo intacto, comprendiendo dicho péptido de anticuerpo un residuo de glicosilo que tiene la fórmula:**Fórmula** en la que a, b, c, i, j, k, l, q, r, s, t, u y z son miembros seleccionados de manera independiente de 0 y 1; m es seleccionado de manera independiente de 0 y 1, o m es seleccionado de manera independiente de 0 - 20, cuando dicho péptido de anticuerpo es péptido de anticuerpo anti-HER2; e, f, g y h son miembros seleccionados de manera independiente de los números enteros 0 a 4; n, v, w, x e y son 0; R es un grupo…

(16/12/2015) Un procedimiento de formación de un conjugado entre un péptido de eritropoyetina (EPO) y un grupo modificador, en el que el grupo modificador está unido covalentemente al péptido mediante un grupo enlazador de glicosilo intacto, comprendiendo el péptido un residuo de glicosilo que tiene una fórmula que es un miembro seleccionado entre:**Fórmula** y en las que a, b, c, d, i, n, o, p, q, r, s, t y u son mimebros seleccionados independientemente entre 0 y 1; e, f, g y h son mimebros seleccionados independientemente entre los números enteros entre 0 y 4; j, k, l y m son miembros seleccionados independientemente entre los números enteros entre 0 y 20; v, w, x, y, y z son 0; y R es un grupo modificador; comprendiendo dicho procedimiento: (a) poner en contacto el péptido de EPO con una glicosiltransferasa y un donante…

(06/05/2015) Un método para escindir cromatina celular en una región de interés, comprendiendo el método: (a) seleccionar la región de interés; (b) manipular un primer dominio de unión de dedos de cinc para unirse a una primera secuencia de nucleótidos en la región de interés; (c) proporcionar un segundo dominio de unión de dedos de cinc que se une a una segunda secuencia de nucleótidos en la región de interés, en el que la segunda secuencia se localiza entre 2 y 50 nucleótidos de la primera secuencia; (d) expresar una primera proteína de fusión en la célula, comprendiendo la primera proteína de fusión el primer dominio de unión de dedos de cinc y un primer medio dominio de escisión; y (e) expresar una segunda proteína de fusión en la célula, comprendiendo la segunda proteína…

(25/03/2015) Un monómero de meganucleasa recombinante que tiene afinidad alterada para la formación de dímeros con un monómero de meganucleasa de referencia, que comprende: un polipéptido que tiene al menos un 85 % de similitud de secuencia con los restos 2-153 del monómero de meganucleasa I-Crel de SEC ID Nº: 1; en el que la afinidad por la formación de monómeros se ha alterado mediante al menos una modificación correspondiente a una sustitución seleccionada del grupo que consiste en: (a) sustitución de K7, K57 o K96 por D o E; o (b) sustitución de E8 o E61 por K o R.

(04/03/2015) Un procedimiento in vitro, sin células de formación de un conjugado entre un péptido de la hormona estimuladora del folículo (FSH) y un polímero soluble en agua, en el que el polímero soluble en agua se une covalentemente al péptido de FSH a través de un grupo de unión a glicosilo intacto, estando dicho grupo de unión a glicosilo intacto interpuesto entre y unido covalentemente tanto al péptido como al polímero soluble en agua, en el que el polímero soluble en agua no es un azúcar de origen natural y está seleccionado del grupo que consiste en óxidos de polialquileno y polipéptidos, comprendiendo el péptido de FSH un resto de glicosilo…

(24/12/2014) Un método para producir una célula eucariota genéticamente modificada que incluye una secuencia exógena insertada en un cromosoma de dicha célula eucariota, que comprende: transfectar una célula eucariota con uno o más ácidos nucleicos que incluyen (i) una primera secuencia de ácido nucleico que codifica una meganucleasa, y (ii) una segunda secuencia de ácido nucleico que incluye dicha secuencia exógena; en el que dicha meganucleasa produce un sitio de escisión en dicho cromosoma y dicha secuencia exógena se inserta en dicho cromosoma en dicho sitio de escisión; en el que dicha meganucleasa comprende un polipéptido que tiene al menos un 85 % de similitud de secuencia…

(29/10/2014) Variante polipeptídica de tirosil-ARNt sintetasa (TyrRS) aislada, que comprende: (a) una región de plegamiento de Rossmann o una porción de la misma que incluye una hélice α5; y (b) un dominio de reconocimiento de anticodón o una porción del mismo que incluye una hélice α14; en la que la variante tiene una identidad de secuencia de residuos de aminoácido de por lo menos el 50% en comparación con la secuencia de residuos de aminoácido de la TyrRS humana (SEC ID nº: 3), incluye por lo menos una sustitución no conservativa de residuos de aminoácidos de un residuo de aminoácido en una o más posiciones correspondientes a las posiciones 46, 340 y 341 de la SEC ID nº: 3 y presenta una actividad angiogénica que es mayor que la actividad angiogénica de la TyrRS humana.

(13/08/2014) Un procedimiento in vitro sin células para formar un conjugado entre un péptido de la hormona del crecimiento humano (HGH) y un grupo modificador, en el que el grupo modificador no es un azúcar de el grupo modificador está unido covalentemente con el glicopéptido mediante un grupo de enlace de glicosilo intacto, comprendiendo el glicopéptido un resto de glicosilo que tiene una fórmula que es un miembro seleccionado de:**Fórmula** y en las que 10 a, b, c, d, i, j, k, l, m, r, s, t, u, z, aa, bb, cc,y ee son miembros independientemente seleccionados de 0 y 1; e, f, g y h son miembros independientemente seleccionados delos números enteros entre 0 y 4; n,…

(06/08/2014) Una célula eubacteriana que comprende una primera aminoacil-ARNt sintetasa ortogonal (O-RS) que actúa en la célula, en donde la O-RS preferentemente aminoacila un primer ARNt ortogonal (O-ARNt) con un primer aminoácido no natural que es un alquinil aminoácido; en donde el alquinil aminoácido es una tirosina para-sustituida o una fenilalanina para-sustituida, en donde la tirosina o la fenilalanina están sustituidas en la posición para con un grupo etinilo o propinilo; y en donde la O-RS aminoacila el O-ARNt con el primer aminoácido no natural con una eficiencia de supresión de al menos el 50 % de la eficiencia de supresión de un par sintetasa ortogonal, par que es el O-ARNt de la SEQ ID NO: 1 y una polipéptido sintetasa que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre una cualquiera de las SEQ ID NO:…

(26/02/2014) Un procedimiento in vitro sin células de formación de un conjugado covalente entre un péptido de factor de crecimiento de fibroblastos (FGF) glicosilado o no glicosilado y un polímero, en el que el polímero está conjugado con el péptido mediante un grupo de enlace de glicosilo intacto interpuesto entre y covalentemente ligado a tanto el péptido como al polímero, que comprende poner en contacto el péptido con una mezcla que comprende un azúcar de nucleótido ligado covalentemente con una mezcla que comprende un azúcar de nucleótido ligado covalentemente al polímero y una glicosiltransferasa para la que el azúcar de nucleótido es un sustrato bajo condiciones eficaces…