Un anticuerpo monoclonal bloqueante contra el dominio alfa1-I de VLA-1, y su uso para el tratamiento de trastornos inflamatorios.

Un anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, capaz de unirse a un epitopo de VLA-1 que comprende los restos aminoácidos Val-Gln-Arg-Gly-Gly-Arg (SEQ ID NO:

8), en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, es capaz de unirse a un dominio α1-I humano, pero no a un dominio α1-I de rata, para su uso para tratar un trastorno inflamatorio en un sujeto.

Un anticuerpo monoclonal bloqueante contra el dominio alfa1-l de VLA-1, y su uso para el tratamiento de trastornos inflamatorios

Antecedentes de la invención

Las integrinas son complejos de proteínas de la superficie celular que forman una gran clase de moléculas de la superficie celular que median en la adhesión de las células entre si y con su entorno.

Las células necesitan adherirse entre sí y a otras moléculas en su entorno en muchos procesos fisiológicos y del desarrollo. Los ejemplos incluyen la creación de tejidos y órganos, y el mantenimiento de su integridad. Entre estos procesos fisiológicos se incluyen los trastornos inflamatorios.

Una de las etapas clave durante el proceso inflamatorio implica la extravasación de células hacia fuera de los vasos sanguíneos, hacia el Interior de los tejidos, y hacia el sitio de la Infección. El papel de las moléculas de adhesión en este proceso a menudo se descompone en un modelo de tres etapas que implica un reclutamiento de leucocitos Inicial en el endotello Inflamado, seguido de una unión firme, que resulta en la migración transendotellal de los leucocitos hacia los tejidos Inflamados (Hynes, R. O., 1992, Cell, 69:11-25; Springer, T. A., 1992, Cell, 76:301-314). Otra etapa crítica en la cascada Inflamatoria que no ha sido explorada a fondo se produce dentro de los tejidos periféricos, en donde las células Infiltrantes, así como las residentes, necesitan migrar hacia el sitio de la Infección, reconocer al antígeno extraño y sufrir la activación celular para realizar sus funciones efectoras. Para evaluar directamente la Importancia en la Inflamación de las Interacciones adhesivas intersticiales, aparte del papel que desempeñan las Interacciones adhesivas en el reclutamiento de leucocitos, los Inventores se han centrado en la importancia de las moléculas de adhesión de la familia de las Integrinas y sus fragmentos, y su papel en modelos animales de inflamación, en particular la artrlstis.

Previamente, se ha descrito un mAb de ratón 1B3.1 contra un epltopo de VLA-1 en el documento US 5.788.966 A. Sumario de la invención

La presente invención se refiere a las realizaciones caracterizadas en los artículos. Así, se refiere a los siguientes artículos 1 a 19.

1. Un anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, capaz de unirse a un epitopo de VLA-1 que comprende los restos aminoácidos Val-GIn-Arg-Gly-Gly-Arg (SEQ ID NO:8), en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, es capaz de unirse a un dominio a1-l humano, pero no a un dominio a1-l de rata, para su uso para tratar un trastorno inflamatorio en un sujeto.

2. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, del artículo 1, en el que el epitopo consiste en los restos aminoácidos Val-GIn-Arg-Gly-Gly-Arg (SEQ ID NO:8).

3. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según el artículo 1 o 2, en el que el trastorno inflamatorio es una artritis o una enfermedad vascular.

4. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según uno cualquiera de los artículos 1 a 3, en el que el trastorno inflamatorio es la artritis reumatoide.

5. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según uno cualquiera de los artículos 1 a 3, en el que el trastorno inflamatorio es osteoartritis, aterosclerosis, enfermedad del intestino inflamatoria, enfermedad de Crohn, gastritis, colitis ulcerosa, periarteritis nodosa, tiroiditis, anemia aplásica, enfermedad de Hodgkin, diabetes de tipo I, miastenia grave, sarcoidosis, síndrome nefrítico, isquemia miocárdica, rinitis alérgica, síndrome de insuficiencia respiratoria, síndrome de choque por endotoxinas, psoriasis, eccema, una quemadura, dermatitis, asma, bronquitis, calambres menstruales, tendinitis, bursitis, dolor, cefalea, fiebre, o fiebre reumática.

6. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según los artículos 1 a 5, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, es un anticuerpo monoclonal, policlonal, humano, humanizado o quimérico, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno.

7. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según uno cualquiera de los artículos 1 a 6, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, es monoclonal.

8. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según uno cualquiera de los artículos 1 a 7, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, está humanizado.

9. El fragmento de unión al antígeno según uno cualquiera de los artículos 1 a 8, en el que el fragmento de unión al antígeno es un fragmento Fab, Fab, F(ab)2, o Fv.

10. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según uno cualquiera de los artículos 1 a 9, en el

que el sujeto es un ser humano.

11. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según los artículos 1 a 10, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, es para la administración parenteral.

12. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según uno cualquiera de los artículos 1 a 10, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, es para la administración por vía oral, subcutánea, intravenosa, Intramuscular, intraarticular, intrasinovial, ¡ntraesternal, ¡ntratecal, intrahepática, intralesional, intracraneal, nasal o tópica.

13. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según los artículos 1 a 12, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, es para la administración al sujeto en una cantidad de 0,1 mg/kg/día a 50 mg/kg/día, de 0,1 mg/kg/día a 20 mg/kg/día, de 0,1 mg/kg/día a 10 mg/kg/día, de 0,3 mg/kg/día a 1 mg/kg/día, o de 5 mg/kg/día a 12,5 mg/kg/día.

14. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según los artículos 1 a 13, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, es para la administración al sujeto a intervalos de uno a 14 días.

15. Un anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, capaz de unirse a un epitopo de VLA-1 que comprende los restos aminoácidos Val-GIn-Arg-Gly-Gly-Arg (SEQ ID NO:8), en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, es capaz de unirse a un dominio a1-l humano, pero no a un dominio a1-l de rata.

16. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, del artículo 15, en el que el epitopo del anticuerpo, o de uno de sus fragmentos de unión al antígeno, consiste en los restos aminoácidos Val-GIn-Arg-Gly-Gly-Arg (SEQ

ID NO:8).

17. El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según el artículo 15 o el artículo 16, para su uso para tratar a un ser humano.

18. Una composición farmacéutica que comprende el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, según se define en uno cualquiera de los artículos 1 a 14, o según el artículo 15 o el artículo 16, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

19. Un anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, capaz de unirse a un epitopo de VLA-1, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno:

(I) se une a un epitopo dependiente de cationes de VLA-1,

(¡i) es capaz de unirse a un dominio a1-l humano, pero no es capaz de unirse a un dominio a1-l de rata, y

(iii) es capaz de unirse a un dominio a1-l de RAH, que es un dominio a1-l de rata en el que los restos de rata G91, R92, Q93 y L96 están reemplazados por los restos V, Q, R y R, respectivamente.

Además, se describe un método para el tratamiento de trastornos inflamatorios en un sujeto. De modo específico, se describe un método para el tratamiento de la artritis.

Más en concreto, se describe un método para el tratamiento de un trastorno inflamatortio en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un anticuerpo bloqueante de la función aipi, o un fragmento del anticuerpo, en el que el anticuerpo bloqueante de la función aipi, o el fragmento, es capaz de unirse a un epitopo de VLA-1 que comprende los restos aminoácidos 91-96, Val- Gln-Arg-Gly-Gly-Arg.

El anticuerpo anti-integrina puede seleccionarse del grupo que comprende un anticuerpo humano, un anticuerpo quimérico, un anticuerpo humanizado y cualquiera de sus fragmentos. El anticuerpo anti-integrina puede ser un anticuerpo monoclonal o policlonal.

También se describe un método para tratar trastornos inflamatorios en un sujeto que es un sujeto humano o animal. Descripción de los... [Seguir leyendo]

1.- Un anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, capaz de unirse a un epitopo de VLA-1 que comprende los restos aminoácidos Val-GIn-Arg-Gly-Gly-Arg (SEQ ID NO:8), en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, es capaz de unirse a un dominio a1-l humano, pero no a un dominio a1-l de rata, para su uso para tratar un trastorno inflamatorio en un sujeto.

2.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según la reivindicación 1, en el que el epitopo consiste en los restos aminoácidos Val-GIn-Arg-Gly-Gly-Arg (SEQ ID NO:8).

3.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según la reivindicación 1 o 2, en el que el trastorno inflamatorio es una artritis o una enfermedad vascular.

4.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el trastorno inflamatorio es la artritis reumatoide.

5.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el trastorno inflamatorio es osteoartritis, aterosclerosis, enfermedad del intestino inflamatoria, enfermedad de Crohn, gastritis, colitis ulcerosa, periarteritis nodosa, tiroiditis, anemia aplásica, enfermedad de Hodgkin, diabetes de tipo I, miastenia grave, sarcoidosis, síndrome nefrítico, isquemia miocárdica, rinitis alérgica, síndrome de insuficiencia respiratoria, síndrome de choque por endotoxinas, psoriasis, eccema, una quemadura, dermatitis, asma, bronquitis, calambres menstruales, tendinitis, bursitis, dolor, cefalea, fiebre, o fiebre reumática.

6.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según las reivindicaciones 1 a 5, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, es un anticuerpo monoclonal, policlonal, humano, humanizado o quimérico, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno.

7.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según una cualquiera de las

reivindicaciones 1 a 6, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, es monoclonal.

8.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según una cualquiera de las

reivindicaciones 1 a 7, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, está humanizado.

9 - El fragmento de unión al antfgeno para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que el fragmento de unión al antfgeno es un fragmento Fab, Fab, F(ab)2, o Fv.

- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que el sujeto es un ser humano.

11- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según las reivindicaciones 1 a 10, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, es para la administración parenteral.

12.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, es para la administración por vía oral, subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraarticular, intrasinovial, intraesternal, intratecal, intrahepática, intralesional, intracraneal, nasal o tópica.

13.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según las reivindicaciones 1 a 12, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, es para la administración al sujeto en una cantidad de 0,1 mg/kg/día a 50 mg/kg/día, de 0,1 mg/kg/día a 20 mg/kg/día, de 0,1 mg/kg/día a 10 mg/kg/día, de 0,3 mg/kg/día a 1 mg/kg/día, o de 5 mg/kg/día a 12,5 mg/kg/día.

14.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, para su uso según las reivindicaciones 1 a 13, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, es para la administración al sujeto a intervalos de uno a 14 días.

15.- Un anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, capaz de unirse a un epitopo de VLA-1 que comprende los restos aminoácidos Val-GIn-Arg-Gly-Gly-Arg (SEQ ID NO:8), en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, es capaz de unirse a un dominio a1-l humano, pero no a un dominio a1-l de rata.

16.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, de la reivindicación 15, en el que el epitopo del anticuerpo, o de uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, consiste en los restos aminoácidos Val-GIn-Arg-Gly- Gly-Arg (SEQ ID NO:8).

17.- El anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno, según la reivindicación 15 o la reivindicación 16, para su uso para tratar a un ser humano.

18.- Una composición farmacéutica que comprende el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antfgeno,

según se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o según la reivindicación 15 o la reivindicación 16, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

19.- Un anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno, capaz de unirse a un epitopo de VLA-1, en el que el anticuerpo, o uno de sus fragmentos de unión al antígeno:

(i) se une a un epitopo dependiente de cationes de VLA-1,

(ii) es capaz de unirse a un dominio a1-l humano, pero no es capaz de unirse a un dominio a1-l de rata, y

(iii) es capaz de unirse a un dominio a1-l de RAH, que es un dominio a1-l de rata en el que los restos de rata G91, R92, Q93 y L96 están reemplazados por los restos V, Q, R y R, respectivamente.