Procedimientos para tratar afecciones relacionadas con TWEAK.

Uso de un antagonista de TWEAK seleccionado del grupo que consiste en:

(a) un anticuerpo dirigido contra TWEAK;

(b) una parte de unión al antígeno de un anticuerpo dirigido contra TWEAK;

(c) un anticuerpo dirigido contra el receptor de TWEAK, en el que el receptor de TWEAK es Fn14; y

(d) una parte de unión al antígeno de un anticuerpo dirigido contra el receptor de TWEAK, en el que el receptor deTWEAK es Fn14;

para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección seleccionada del grupo que consiste en

(i) miocardiopatía dilatada no inflamatoria y (ii) insuficiencia cardiaca congestiva causada por miocardiopatía dilatadano inflamatoria.

Procedimientos para tratar afecciones relacionadas con TWEAK

CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a un antagonista de TWEAK para usar en el tratamiento de enfermedades cardiacas relacionadas con TWEAK.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Los miembros de la familia de ligandos del factor de necrosis tumoral (TNF) , llamados así por su similitud estructural con el TNF-a, son componentes clave en diferentes procesos, tales como respuesta inflamatorias, inmunidad celular y apoptosis. Los ligandos del TNF pueden actuar localmente como proteínas unidas 15 a membrana de tipo II a través del contacto directo de célula a células o como proteínas secretadas que tienen funciones autocrina, paracrina o endocrina. Los miembros de la familia del TNF se unen a los miembros de la familia de receptores del TNF (TNF-R) por su dominio extracelular C-terminal. Diferentes miembros de la familia del TNF incluyen TNF, linfotoxinas (LT) , Fas, CD27, CD30, CD40, 4-1BB, OX-40, TRAMP, CAR-1, TRAIL, GITR, HVEM, osteoprotegrina, NGF, TRAIN, Kay (BAFF) , APRIL y TWEAK (relación con TNF y poca capacidad para inducir

muerte celular) .

Una característica que define a esta familia de receptores de citoquinas se encuentra en el dominio extracelular rico en cisteína, puesto de manifiesto inicialmente por la clonación molecular de dos receptores de TNF distintos. Esta familia de genes codifica glicoproteínas características de proteínas transmembrana de tipo I que tienen un dominio de unión a ligando extracelular, una sola región que se extiende en la membrana y una región citoplasmática implicada en la activación de funciones celulares. La región de unión al ligando rica en cisteínas presenta un dominio central unido por disulfuro estrechamente tejido, que dependiendo del miembro particular de la familia se repite múltiples veces. La mayoría de los receptores tienen 4 dominios, aunque puede haber tan pocos como 1, o tantos como 6.

Los miembros de la familia de TNF tienen una función en la regulación del sistema inmunitario, controlando la supervivencia y diferenciación celular, así como sistemas de defensa de hospedantes intensos, tales como la inflamación. Los esfuerzos continuados en la técnica por manipular los miembros de la familia del TNF para el beneficio terapéutico, pueden proporcionar medios únicos para controlar la enfermedad. Por ejemplo, algunos de los ligandos de esta familia pueden inducir directamente la muerte apoptótica de muchas células transformadas, p. ej., LT, TNF, ligando Fas y TRAIL. La activación de Fas y posiblemente TNF y el receptor CD30 pueden inducir la muerte celular en linfocitos no transformados que pueden presentar una función inmunorreguladora.

La capacidad para inducir la muerte celular programada es una característica importante y bien estudiada de varios miembros de la familia del TNF. Parece que la apoptosis mediada por Fas tiene una función en la regulación de los linfocitos autorreactivos en la periferia y posiblemente el timo. Además, el TNF y sistemas CD30 se han implicado en la supervivencia de linfocitos T y líneas de linfoma anaplásico de células grandes. La muerte en esta línea celular en respuesta a la señalización del receptor de TNF, Fas o LT-ß tiene características de apoptosis.

La familia de ligandos de TNF se puede clasificar en 3 grupos basado en su capacidad para inducir la muerte celular. Primero, el TNF, ligando Fas y TRAIL pueden inducir eficazmente la muerte celular en muchas líneas y lo más probablemente sus receptores tienen dominios de muerte canónicos buenos. Es de suponer que el ligando de DR-3 (TRAMP/WSL-1) también esté en esta categoría. Después están los ligandos tales como TWEAK, ligando CD30 y LTalb2, que producen una señal de muerte más débil limitada a unas pocas células. Los estudios en estos 50 sistemas han sugerido que existe un mecanismo de señalización de muerte más débil separado. Finalmente, están aquellos miembros que no pueden suministrar una señal de muerte eficazmente. Probablemente todos los grupos pueden ejercer efectos antiproliferativos en algunos tipos de células resultantes de la inducción de diferenciación celular, p. ej., CD40.

En general, la muerte se produce después de la agregación de dominios de muerte que residen en el lado citoplasmático de los receptores de TNF. El dominio de muerte orquesta el ensamblaje de diferentes componentes de la transducción de señales que conduce a la activación de la cascada de caspasa. Algunos receptores carecen de dominios de muerte canónicos, p. ej., el receptor LTb y CD30, aunque pueden inducir la muerte celular, pero de forma más débil. A la inversa, la señalización a través de otras rutas tales como CD40 es necesaria para mantener la supervivencia celular. Sigue siendo necesario identificar y caracterizar mejor las funciones de los miembros de la familia del TNF, facilitando así el desarrollo de nuevas terapias para enfermedades relacionadas con la familia del TNF.

TWEAK se aisló en una selección de ARN que hibridaran con una sonda de eritropoyetina. Chicheportiche y col., J. Biol. Chem. 272:32401-32410 (1997) . Los péptidos de ratón y humano tienen un grado de conservación inusualmente alto, que incluye una identidad de 93% de aminoácidos en el dominio de unión al receptor. TWEAK, que se mostró que era secretado eficazmente de las células, es expresado de forma abundante en muchos tejidos, incluyendo corazón, cerebro, placenta, pulmón, hígado, músculo esquelético, riñón, páncreas,

bazo, glándulas linfáticas, timo, apéndice, y linfocitos de la sangre periférica.

Un receptor de TWEAK conocido es Fn14, un gen de respuesta inmediata temprana regulado por factor de crecimiento que disminuye la adhesión celular a la matriz extracelular y reduce el crecimiento y migración estimulados por suero (Meighan-Mantha y col., J. Biol. Chem. 274:33166-33176 (1999) ) . Se ha mostrado que Fn14

es inducido por tratamiento con FGF, suero de ternero y éster de forbol, y es expresado en niveles relativamente altos en tejidos del corazón, riñón, pulmón, piel, músculo esquelético, ovario y páncreas, así como en módulos de carcinoma hepatocelular y otras líneas celulares de cáncer, y con niveles menores en tejidos hepáticos normales.

TWEAK se ha implicado en muchos procesos biológicos. Por ejemplo, se mostró que las células HT29

tratadas con IFN-y y TWEAK sufrían apoptosis; aunque la capacidad de TWEAK para inducir apoptosis es débil y solo un número pequeño de tipos de células son susceptibles. Chicheportiche y col., J. Biol. Chem. 272:3240132410 (1997) . En cambio, también se ha mostrado que TWEAK induce angiogénesis y proliferación de células endoteliales en una ruta independiente del VEGF. Lynch y col., J. Biol. Chem. 274:8455-8459 (1999) . Los astrocitos se unen y son estimulados específicamente por TWEAK. TWEAK puede infiltrarse en el cerebro inflamado para influir en el comportamiento de los astrocitos. Los astrocitos expuestos a TWEAK secretan niveles altos de IL-6 y IL8, y también regulan por aumento la expresión de ICAM-1. Saas y col., GLIA 32:102-107 (2000) .

TWEAK también se ha implicado en la regulación del sistema inmunitario. Tras la estimulación con IFN-y, los monocitos expresan rápidamente TWEAK, y los anticuerpos dirigidos contra TWEAK inhibían parcialmente su 30 actividad citotóxica contra las células de carcinoma escamoso humano. Una combinación de anticuerpos dirigidos contra TWEAK y dirigidos contra TRAIL inhibía casi completamente la citotoxicidad. Nakayama y col., J. Exp. Med. 192:1373-1379 (2000) . En cambio, el ARNm de TWEAK desaparecía rápidamente en ratones tratados con lipopolisacáridos (LPS) , un inductor de las respuestas inmunoinflamatorias. Además, el ARNm de TWEAK también se reducía en la anemia hemolítica autoinmunitaria y lupus eritematoso sistémico en modelos de ratones. Estos datos sugieren que la regulación por defecto de la expresión de TWEAK es un suceso importante en la inflamación aguda y crónica. Chicheportiche y col., Biochem. Biophys. Res. Comm. 279:162-165 (2000) .

Actualmente, la técnica carece de la comprensión completa de qué afecciones o enfermedades están relacionadas con la expresión y función de TWEAK, incluyendo la función de TWEAK en las afecciones tanto inflamatorias como no inflamatorias.

El documento WO 01/45730 describe agonistas y antagonistas del receptor de TWEAK y su uso para la modulación de la angiogénesis, es decir, el tratamiento de, p. ej., cáncer, curación de heridas, enfermedades cardiacas, enfermedades inflamatorias y respuestas mediadas por TWEAKR en general. El documento WO 45 99/19490 describe el ligando apo-3 (=... [Seguir leyendo]

1. Uso de un antagonista de TWEAK seleccionado del grupo que consiste en: 5 (a) un anticuerpo dirigido contra TWEAK;

(b) una parte de unión al antígeno de un anticuerpo dirigido contra TWEAK;

(c) un anticuerpo dirigido contra el receptor de TWEAK, en el que el receptor de TWEAK es Fn14; y 10

(d) una parte de unión al antígeno de un anticuerpo dirigido contra el receptor de TWEAK, en el que el receptor de TWEAK es Fn14;

para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección seleccionada del grupo que consiste en 15 (i) miocardiopatía dilatada no inflamatoria y (ii) insuficiencia cardiaca congestiva causada por miocardiopatía dilatada no inflamatoria.

2. Un antagonista de TWEAK seleccionado del grupo que consiste en: 20 (a) un anticuerpo dirigido contra TWEAK;

(b) una parte de unión al antígeno de un anticuerpo dirigido contra TWEAK;

(c) un anticuerpo dirigido contra el receptor de TWEAK, en el que el receptor de TWEAK es Fn14; y 25

(d) una parte de unión al antígeno de un anticuerpo dirigido contra el receptor de TWEAK, en el que el receptor de TWEAK es Fn14;

para usar en el tratamiento de una afección seleccionada del grupo que consiste en (i) miocardiopatía dilatada no 30 inflamatoria y (ii) insuficiencia cardiaca congestiva causada por miocardiopatía dilatada no inflamatoria.

3. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, o el antagonista de TWEAK para usar de acuerdo con la reivindicación 2, en el que la miocardiopatía dilatada no inflamatoria es miocardiopatía dilatada idiopática.

4. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 o reivindicación 3, o el antagonista de TWEAK para usar de acuerdo con la reivindicación 2 o reivindicación 3, en el que el antagonista de TWEAK es un anticuerpo dirigido contra TWEAK.

5. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 o reivindicación 3, o el antagonista de TWEAK para usar de acuerdo con la reivindicación 2 o reivindicación 3, en el que el antagonista de TWEAK es una parte de unión al antígeno de un anticuerpo dirigido contra TWEAK.

6. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 o reivindicación 3, o el antagonista de TWEAK para usar de acuerdo con la reivindicación 2 o reivindicación 3, en el que el antagonista de TWEAK es un anticuerpo dirigido 45 contra el receptor de TWEAK, y en el que receptor de TWEAK es Fn14.

7. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 o reivindicación 3, o el antagonista de TWEAK para usar de acuerdo con la reivindicación 2 o reivindicación 3, en el que el antagonista de TWEAK es una parte de unión al antígeno de un anticuerpo dirigido contra el receptor de TWEAK, y en el que receptor de TWEAK es Fn14.