Receptor soluble BR43x2 y métodos de utilización en terapia.

Uso de un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: a) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BR43x2 (ID.

SEC. nº 2); b) un polipéptido soluble que comprende el dominio extracelular de TACI; c) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BCMA; d) un polipéptido que comprende la secuencia de ID. SEC. nº 10; e) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 2; f) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 4; g) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 6; h) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 8; i) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 10; k) un polipéptido de ID. SEC. nº 4; l) los restos de aminoácido 1-166 de la ID. SEC. nº 6; m) los restos de aminoácido 8-37 de la ID.SEC. nº 8; y n) los restos de aminoácido 1-48 de la ID. SEC. nº 8, en la fabricación de un medicamento para inhibir la actividad de ztnf4 en un mamífero.

Receptor soluble BR43X2 y métodos de utilización en terapia.

Antecedentes del invento

Las interacciones celulares que tienen lugar durante una respuesta inmune son reguladas por miembros de diversas familias de receptores de la superficie celular, incluyendo la familia de receptores del factor de necrosis tumoral (TNFR; del inglés, tumor necrosis factor receptor) . La familia de TNFR consiste en un número de receptores glicoproteínicos integrales de membrana, muchos de los cuales, junto con sus respectivos ligandos, regulan interacciones entre diferentes linajes celulares hematopoyéticos (Smith et al., The TNF Receptor Superfamily of Cellular and Viral Proteins: Activation, Costimulation and Death, 76: 959-62, 1994, Cosman, Stem Cells 12 440-55, 1994)

Uno de tales receptores es TACI (del inglés, transmembrane activator and CAML-interactor) , activador de transmembrana e interaccionador con CAML (von Bülow y Bram, Science 228:138-41, 1997 y Publicación WIPO, WO 98/39361) . TACI es un receptor unido a membrana que tiene un dominio extracelular que contiene dos seudorrepeticiones ricas en cisteína, un dominio transmembranal y un dominio citoplásmico que interacciona con CAML (del inglés, calcium-modulator and cyclophilin ligand) , modulador de calcio y ligando de ciclofilina, una proteína integral de membrana situada en vesículas intracelulares que es un coinductor de la activación del factor nuclear de células T activadas (NF-AT; del inglés, nuclear factor of activated T cells) cuando se sobreexpresa en células Jurkat. TACI se asocia con células B y un subgrupo de células T. von Bülow y Bram (ibídem) comunican que no se conoce el ligando de TACI.

Se halló que los polipéptidos del presente invento, una isoforma de TACI que sólo tiene una seudorrepetición rica en cisteína (BR43x2) , TACI y una proteína de células B relacionada, BCMA (Gras et al., Int. Immunol. 17: 1.093-106, 1.995) , se unen al ligando de TNF, ztnf4, ahora conocido como neutroquina α (Publicación WIPO, WO 98/18921) , BLyS (Moore et al., Science 285: 260-3, 1.999) , BAFF (Schneider et al., J. Exp. Med. 189: 1.747-56, 1.999) , TALL-1 (Shu et al., J. Leukoc. Biol. 65: 680-3, 1.999) o THANK (Mukhopadhyay et al., J. Biol. Chem. 274: 15.978-81, 1.999) . Como tales, BR43x2, TACI y BCMA serían útiles para regular la actividad de ztnf4, en particular, la activación de células B.

Con este fin, el presente invento proporciona agentes proteicos terapéuticos para modular la actividad de ztnf4 u otros ligandos de BR43x2, TACI o BCMA, composiciones y métodos relacionados, así como otros usos que deberían ser evidentes para los expertos en la técnica a partir de las presentes enseñanzas.

En consecuencia, en un primer aspecto, el invento proporciona el uso de un compuesto en la fabricación de un medicamento para inhibir la actividad de ztnf4 en un mamífero, compuesto que es seleccionado del grupo que consiste en: a) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BR43x2, b) un polipéptido soluble que comprende el dominio extracelular de TACI, c) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BCMA, d) un polipéptido que comprende la secuencia de ID. SEC. nº 10, e) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 2, f) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 4, g) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 6, h) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 8, i) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 10, k) un polipéptido de ID. SEC. nº 4, l) los restos de aminoácido 1-166 de la ID. SEC. nº 6, y m) los restos de aminoácido 1-150 de la ID. SEC. nº 8.

En una realización, el compuesto es una proteína de fusión que consiste en una primera porción y una segunda porción unidas por un enlace peptídico, comprendiendo dicha primera porción un polipéptido seleccionado del grupo que consiste en: a) un polipéptido que comprende la secuencia de ID. SEC. nº 8, b) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 25-58 de la ID. SEC. nº 2, c) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 34-66 de la ID. SEC. nº 6, d) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 71-104 de la ID. SEC. nº 6, e) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 25-104 de la ID. SEC. nº 6, f) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 8-37 de la ID. SEC. nº 8, g) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 41-88 de la ID. SEC. nº 8, y h) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 8-88 de la ID. SEC. nº 8; y comprendiendo dicha segunda porción otro polipéptido. En otra realización, la primera porción comprende además un polipéptido seleccionado del grupo que consiste en: a) los restos de aminoácido 59-120 de la ID. SEC. nº 2, b) los restos de aminoácido 105-166 de la ID. SEC. nº 6, y c) los restos de aminoácido 89-150 de la ID. SEC. nº 8. En otra realización, la primera porción es seleccionada del grupo que consiste en: a) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BR43x2, b) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de TACI, y c) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BCMA. En una realización relacionada, la primera porción es seleccionada del grupo que consiste en: a) un polipéptido de ID. SEC. nº 4, b) los restos de aminoácido 1-154 de la ID. SEC. nº 6, y c) los restos de aminoácido 1-48 de la ID. SEC. nº 8. En otra realización relacionada, la segunda porción es una región constante de cadena pesada de inmunoglobulina.

En otra realización, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo es seleccionado del grupo que consiste en: a) anticuerpo policlonal, b) anticuerpo monoclonal murino, c) anticuerpo humanizado procedente de b) , y d) anticuerpo monoclonal humano. En una realización relacionada, el fragmento de anticuerpo es seleccionado del grupo que consiste en F (ab') , Fab', Fab, Fv y scFv. En otra realización, el mamífero es un primate.

En otra realización, la actividad de ztnf4 está asociada con linfocitos B. En otra realización relacionada, la actividad de ztnf4 está asociada con linfocitos B activados. En aún otra realización, la actividad de ztnf4 está asociada con linfocitos B en reposo. En otra realización, la actividad de ztnf4 está asociada con la producción de anticuerpos. En una realización relacionada, la producción de anticuerpos está asociada con una enfermedad autoinmune. En una realización relacionada, la citada enfermedad autoinmune es lupus sistémico eritematoso, miastenia gravis (MG) , esclerosis múltiple o artritis reumatoide (RA; del inglés, rheumatoid arthritis) . En otra realización, la actividad de ztnf4 está asociada con asma, bronquitis o enfisema. En aún otra realización, la actividad de ztnf4 está asociada con insuficiencia renal de fase terminal. En aún otra realización, la actividad de ztnf4 está asociada con enfermedad renal. En una realización relacionada, la enfermedad renal es glomerulonefritis, vasculitis, nefritis o pielonefritis. En aún otra realización, la enfermedad renal está asociada con neoplasias renales, mielomas múltiples, linfomas, neuropatía de cadenas ligeras o amiloidosis. En otra realización, la actividad de ztnf4 está asociada con células T efectoras. En una realización relacionada, la actividad de ztnf4 está asociada con moderación de la respuesta inmune. En aún otra realización, la actividad está asociada con inmunosupresión. En aún otra realización, la inmunosupresión está asociada con rechazo de injertos, enfermedad del injerto contra el huésped, o inflamación. En otra realización, la actividad está asociada con enfermedad autoinmune. En una realización relacionada, la enfermedad autoinmune es diabetes mellitus dependiente de insulina o la enfermedad de Crohn. En otra realización, la actividad de ztnf4 está asociada con inflamación. En una realización relacionada, la inflamación está asociada con dolor articular, hinchazón, anemia o shock séptico. En otro aspecto, el invento proporciona un método para la fabricación de un medicamento para inhibir el acoplamiento del receptor BR43x2, TACI o BCMA-ztnf4, que incluye una cantidad de un compuesto como el anteriormente descrito. En otra realización, el acoplamiento del receptor BR43x2, TACI o BCMA-ligando está asociado con... [Seguir leyendo]

1. Uso de un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:

a) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BR43x2 (ID. SEC. nº 2) ;

b) un polipéptido soluble que comprende el dominio extracelular de TACI;

c) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BCMA;

d) un polipéptido que comprende la secuencia de ID. SEC. nº 10;

e) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 2;

f) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 4;

g) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 6;

h) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 8;

i) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 10;

k) un polipéptido de ID. SEC. nº 4;

l) los restos de aminoácido 1-166 de la ID. SEC. nº 6;

m) los restos de aminoácido 8-37 de la ID. SEC. nº 8; y

n) los restos de aminoácido 1-48 de la ID. SEC. nº 8,

en la fabricación de un medicamento para inhibir la actividad de ztnf4 en un mamífero.

2. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 1, en el que dicho mamífero es un primate.

3. Uso de un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:

a) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BR43x2 (ID. SEC. nº 2) ;

b) un polipéptido soluble que comprende el dominio extracelular de TACI;

c) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BCMA;

d) un polipéptido que comprende la secuencia de ID. SEC. nº 10;

e) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 2;

f) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 4;

g) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 6;

h) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 8;

i) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 10;

j) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 18;

k) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. nº 20;

l) un polipéptido de ID. SEC. nº 4;

m) los restos de aminoácido 1-166 de la ID. SEC. nº 6;

n) los restos de aminoácido 8-37 de la ID. SEC. nº 8; y

o) los restos de aminoácido 1-48 de la ID. SEC. nº 8,

en la fabricación de un medicamento para inhibir el acoplamiento del receptor BR43x2, TACI o BCMA-ztnf4.

4. Un uso de acuerdo con las Reivindicaciones 1-3, en el que dicho compuesto es una proteína de fusión que consiste en una primera porción y una segunda porción unidas por un enlace peptídico, primera porción que comprende un polipéptido seleccionado del grupo que consiste en:

a) un polipéptido que comprende la secuencia de ID. SEC. nº 8;

b) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 25-58 de la ID. SEC. nº 2;

c) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 34-66 de la ID. SEC. nº 6;

d) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 71-104 de la ID. SEC. nº 6;

e) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 25-104 de la ID. SEC. nº 6;

f) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 8-37 de la ID. SEC. nº 8;

g) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 41-88 de la ID. SEC. nº 8; y

h) un polipéptido que comprende los restos de aminoácido 8-58 de la ID. SEC. nº 8;

y segunda porción que comprende otro polipéptido.

5. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 4, en el que dicha primera porción comprende además un polipéptido seleccionado del grupo que consiste en:

a) los restos de aminoácido 59-120 de la ID. SEC. nº 2;

b) los restos de aminoácido 105-166 de la ID. SEC. nº 6; y

c) los restos de aminoácido 89-150 de la ID. SEC. nº 8.

6. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 4, en el que dicha primera porción es seleccionada del grupo que consiste en:

a) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BR43x2 (ID. SEC. nº 2) ;

b) un polipéptido soluble que comprende el dominio extracelular de TACI; y

c) un polipéptido que comprende el dominio extracelular de BCMA;

7. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 4, en el que dicha primera porción es seleccionada del grupo que consiste en:

a) un polipéptido de ID. SEC. nº 4;

b) los restos de aminoácido 1-154 de la ID. SEC. nº 6; y

c) los restos de aminoácido 1-48 de la ID. SEC. nº 8.

8. Un uso de acuerdo con las Reivindicaciones 4-7, en el que dicha segunda porción es una región constante de cadena pesada inmunoglobulínica.

9. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 8, en el que dicha región constante de cadena pesada inmunoglobulínica es una región constante de cadena pesada inmunoglobulínica humana.

10. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 9, en el que dicha región constante de cadena pesada inmunoglobulínica humana es una región constante de cadena pesada inmunoglobulínica humana de IgG1.

11. Un uso de acuerdo con las Reivindicaciones 8 a 10, en el que dicho medicamento comprende un multímero de dichas proteínas de fusión.

12. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 11, en el que dicho medicamento comprende una región constante de cadena pesada inmunoglobulínica que contiene dos dominios de región constante y carece de la región variable.

13. Un uso de acuerdo con las Reivindicaciones 1-12, en el que el medicamento es para el tratamiento de linfocitos B.

14. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 13, en el que los linfocitos B son linfocitos B activados.

15. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 13, en el que los citados linfocitos B son linfocitos B en reposo.

16. Un uso de acuerdo con las Reivindicaciones 1-15, en el que el medicamento es para inhibir la producción de anticuerpos.

17. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 16, en el que dicha producción de anticuerpos está asociada con una enfermedad autoinmune.

18. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 17, en el que dicha enfermedad autoinmune es lupus sistémico eritematoso, miastenia gravis, esclerosis múltiple o artritis reumatoide.

19. Un uso de acuerdo con las Reivindicaciones 1-18, para el tratamiento del asma, bronquitis, enfisema e insuficiencia renal de fase terminal.

20. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 19, en el que dicha enfermedad renal es glomerulonefritis, vasculitis, nefritis o pielonefritis.

21. Un uso de acuerdo con las Reivindicaciones 1-20, para el tratamiento de neoplasias renales, mielomas múltiples, linfomas, neuropatía de cadenas ligeras o amiloidosis.

22. Un uso de acuerdo con las Reivindicaciones 1-21, para inhibir células T efectoras.

23. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 22, para moderar la respuesta inmune.

24. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 22, en el que dicha inhibición comprende además inmunosupresión.

25. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 24, en el que dicha inmunosupresión está asociada con rechazo de injertos, enfermedad del injerto contra el huésped, enfermedad autoinmune o inflamación.

26. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 17, en el que dicha enfermedad autoinmune es diabetes mellitus dependiente de insulina o la enfermedad de Crohn.

27. Un uso de acuerdo con las Reivindicaciones 1-26, para el tratamiento de la inflamación.

28. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 27, en el que dicha inflamación está asociada con dolor articular, hinchazón, anemia o shock séptico.

29. Una molécula polinucleotídica aislada que codifica un polipéptido de ID. SEC. n° 2.

30. Una molécula polinucleotídica aislada de ID. SEC. n° 1.

31. Un vector de expresión que comprende los siguientes elementos operativamente enlazados:

un promotor de transcripción;

una molécula polinucleotídica de acuerdo con la Reivindicación 29; y

un terminador de transcripción.

32. Una célula en cultivo en la que se ha introducido un vector de expresión de acuerdo con la Reivindicación 31, célula en cultivo que expresa dicho polipéptido codificado por dicha molécula polinucleotídica.

33. Un método para producir un polipéptido, que comprende:

cultivar una célula en la que se ha introducido un vector de expresión de acuerdo con la Reivindicación 31, mediante lo cual dicha célula expresa dicho polipéptido codificado por dicha molécula polinucleotídica; y

recuperar dicho polipéptido expresado.

34. Un polipéptido aislado que tiene la secuencia de ID. SEC. n° 2.

35. Un polipéptido de acuerdo con la Reivindicación 34, en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

36. Una composición farmacéutica que comprende:

a) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. n° 2;

b) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. n° 4;

c) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. n° 6;

d) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. n° 8; o

e) un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de ID. SEC. n° 10;

y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

37. Una composición de acuerdo con la Reivindicación 36, en la que dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo es seleccionado del grupo que consiste en: