Indoles (4,5-dihidro) indoles tricíclicos.

Un compuesto de la fórmula (I): **Fórmula**

en la que el anillo A representa un heterociclo condensado de la fórmula IIa,

IIb, III o IV: **Fórmula**

R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo opcionalmente sustituido seleccionado de grupo alquilo,cicloalquilo, alquenilo, alquinilo, heterociclilo, arilo, heterocicliloxi-alquilo y alcoxicarbonilo;

R2 es átomo de hidrógeno o de halógeno o un grupo de fórmula -COOR5 o -CONHR5, donde R5 representa uno delos significados definidos antes para R1, o un grupo arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido;

R3 es átomo de hidrógeno o un grupo de fórmula - CHO, -COOR5 o-CONHR5, donde R5 es como se ha definidoantes;

R4 es átomo de hidrógeno o NHR6, donde R6 es átomo de hidrógeno o un grupo alquilo, arilo o heterocicliloopcionalmente sustituido.

Indoles (4, 5-dihidro) indoles tricíclicos La presente invención se refiere a indoles y (4, 5-dihidro) indoles tricíclicos, a un procedimiento para su preparación, a composiciones farmacéuticas que los comprenden y a su uso como agentes terapéuticos, en particular, en el tratamiento de cáncer y trastornos proliferativos. Estos compuestos son útiles, en terapia, como agentes contra un huésped de enfermedades causadas por y/o asociadas con una actividad mal regulada de proteína cinasa y, más en particular, actividad Cdc7 o Cdc7/Cdks y AKT.

En particular, la presente invención proporciona indoles o (4, 5-dihidro) indoles tricíclicos que están dotados de actividad inhibidora de proteína cinasas, en especial actividad inhibidora de Cdc7 o Cdc7/Cdk y AKT.

El funcionamiento alterado de proteína cinasas (PK) es la huella característica de numerosas enfermedades. Una gran parte de los oncogenes y proto-oncogenes implicados en los cánceres humanos codifica PK. Las actividades potenciadas de PK también están implicadas en muchas enfermedades no neoplásicas. Para una referencia general al funcionamiento alterado o mala regulación de PK véase, por ejemplo, Current Opinion in Chemical Biology 1999, 3, 459-465. Se conocen en la técnica varios compuestos como inhibidores de proteína cinasa. En particular, podemos hacer referencia a indoles, por ejemplo, los derivados de pirazolil-indol descritos en el documento WO05/005414, los derivados de hidroxiindol descritos en el documento WO05/10578 y las indolcarboxamidas descritas en el documento WO01/030774, a quinazolinas e isoquinolinas, representadas por los derivados de aminopirimidina reivindicados en los documentos US2005148603 y WO05/037843, los compuestos de tiazolo-, oxazolo- e imidazolo-quinazolina presentados en el documento WO05/005438, los compuestos de beta-carbolina y análogos reivindicados en el documento WO05/009370 y las pirazoloquinazolinas descritas en el documento WO04/104007. Finalmente, se hará referencia a indazoles, por ejemplo, 3- (carbonil) -1H-indazoles descritos en el documento WO04/014922 y los pirazoles tricíclicos reivindicados en los documentos WO03/070706 y WO03/070236. La replicación del ADN es un proceso fundamental para la proliferación celular. Los mecanismos que controlan la entrada en la fase S y la ejecución apropiada de la síntesis de ADN son alterados con frecuencia en células neoplásicas y, al mismo tiempo, son dianas atractivas para el desarrollo de agentes antitumorales. La replicación de ADN es un proceso en dos etapas: primero, durante la reacción de inicio, las proteínas ligadas al ADN origen son activadas por fosforilación con el fin de ensamblar las horquillas de replicación y, en segundo lugar, durante la elongación, las ADN polimerasas, junto con factores auxiliares, sintetizan nuevas cadenas de ADN. La cinasa Cdc7, un regulador importante en el ciclo celular, es una serina-treonina cinasa conservada evolucionada, que desempeña un papel fundamental en la asociación de la regulación del ciclo celular con la duplicación del genoma. En la fase S Cdc7 posibilita la activación de los orígenes de replicación de ADN por proteínas fosforilantes que son reclutadas en las secuencias origen durante la G1 previa. La fosforilación dependiente de Cdc7 es, por tanto, esencial para la conversión de un complejo prereplicativo durmiente en dos horquillas de replicación activas (Bell, S.P. and Dutta, A. Annu. Rev. Biochem. 2002, 71, 333-374. La cinasa Cdc7, al igual que las cinasas dependientes de ciclina, es activada mediante la unión de subunidades reguladoras alternativas, Dbf4 y Drf1 (Kumagai, H., Sato, N., Yamada, M., Mahony, D., Seghezzi, W., Lees, E., Arai, K., and Masai, H. Mol. Cell Biol. 1999, 19, 5083-5095; Montagnoli, A., Bosotti, R., Villa, F., Rialland, M., Brotherton, D., Mercurio, C., Berthelsen, J., and Santocanale, C. EMBO J. 2002, 21, 3171-3181) . El ARNm de Cdc7, Dbf4 y Drf1 se sobreexpresa en una serie de línea celulares tumorales (Hess, G.F., Drong, R.F., Weiland, K.L., Slightom, J.L., Sclafani, R.A., and Hollingsworth, R.E. Gene 1998, 211, 133-140; Kumagai, H., Sato, N., Yamada, M., Mahony, D., Seghezzi, W., Lees, E., Arai, K., and Masai, H. Mol. Cell Biol. 1999, 19, 5083-5095; Montagnoli, A., Bosotti, R., Villa, F., Rialland, M., Brotherton, D., Mercurio, C., Berthelsen, J., and Santocanale, C. EMBO J. 2002, 21, 3171-3181) . La cinasa Cdc7 es una buena diana potencial para el desarrollo de fármacos anticancerosos. De hecho, la función de Cdc7 es esencial para la replicación del ADN y la proliferación celular de células humanas: la microinyección de anticuerpos contra CdC7 específicos previene la replicación de ADN (Jiang, W., McDonald, D., Hope, T.J., and Hunter, T. EMBO J. 1999, 18, 5703-5713) y la regulación genética a niveles menores de la cinasa Cdc7 por la síntesis de ADN que bloquea ARNsi conduce a una muerte celular independiente de p53 en varias líneas celulares cancerosas (Montagnoli, A., Tenca, P., Sola, F., Carpani, D., Brotherton, D., Albanese, C., and Santocanale, C. Cancer Res. 2004, 64, 7110-7116) . Además, la inhibición de Cdc7 anula la fosforilación de sustrato celular relevante (proteína MCM2) en sitios específicos de fosforilación (Montagnoli, A., Valsasina, B., Brotherton, D., Troiani, S., Rainoldi, S., Tenca, P., Molinari, A., and Santocanale, C. J Biol. Chem. 2006, 281, 10281-10290) . La presente invención se refiere también a compuestos tricíclicos de (4, 5-dihidro) indol útiles para el tratamiento de enfermedades mediadas por AKT. AKT (también conocida como proteína cinasa B (PKB) o Rac-PK-beta) , y los productos de su familia génica, se han identificado como una serina/treonina proteína cinasa (Proc. Natl. Acad. Sci. 2001, 98, 10983-10985;

J. Cell. Sci. 2001, 114, 2903-2910; Circ. Res. 2000, 86, 15-23) . Se conocen en la actualidad tres isoformas de PKB, PKBα (AKT1) , PKBβ (AKT2) y PKBγ (AKT3) (Proc. Natl. Acad. Sci. 1992, 89, 9267-9271; J. Biol. Chem. 1999, 274, 9133-9136) . PKB media muchos efectos de IGF-1 y otros factores de crecimiento sobre el crecimiento tumoral e inhibición de apoptosis (Cell. Signal. 2002, 14, 381-395) . PKB desempeña una importante función en la proliferación celular, apoptosis y respuesta a la insulina. Por estas razones, la modulación de PKB es de interés en el tratamiento de la génesis de tumores, proliferación celular anómala y diabetes. La estructura molecular de las PKB comprende un sitio regulador cerca del terminal carboxilo del polipéptido, un dominio catalítico con un bucle de activación que tiene una treonina, y un dominio de homología con pleckstrina en el terminal amino. El dominio de homología con pleckstrina permite el anclaje de la enzima en la membrana celular a través de la interacción con fosfolípidos, lo cual

desencadena la activación de las PKB. La función del dominio de homología con pleckstrina requiere fosforilación de fosfatidilinositol en la posición D-3 a través de fosfatidilinositol 3-cinasa PI3K, una proteína del dominio SH2 que se asocia con receptores con actividad tirosina cinasa activados, en particular, IGF-1R. En particular, fosfoinositol-3cinasa, cuando es activada por receptores con actividad tirosina cinasa, cataliza la síntesis de fosfoinositol-3, 4difosfato y fosatidilinositol-3, 4, 5-trifosfato. El dominio de homología con pleckstrina se une a 3-fosfoinositidas, que se sintetizan por PI3K tras la estimulación por factores de crecimiento tales como el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) , el factor de crecimiento nervioso (NGF) y el factor de crecimiento insulínico (IGF-1) (Mol. Cell. Biol. 1997, 17, 1595-1606; Science 1997, 275, 628-630; Genev. Dev. 1999, 13, 2905-2927) . La unión de lípidos al dominio de homología con pleckstrina promueve el desplazamiento de PKB a la membrana plasmática. La posterior activación de PKB se produce por fosforilación por otra proteína cinasa, PDK1 en Thr309, y Thr305 para las isoformas PKB 1, 2 y 3, respectivamente. Una tercera etapa de activación está catalizada por una cinasa que fosforila Ser473, Ser474 o Ser472 en la cola C-terminal de PKB/AKT-1, -2 y -3, respectivamente. La actividad cinasa de Ser473 se ha identificado por estar asociada con la membrana plasmática y esta no se debe a actividad cinasa de PKB y PDK1 (Current Biology 2002, 12, 1251-1255; J. Biol. Chem. 2003, 278, 21615-21622) . El proceso produce la forma totalmente activada de PKB.

La activación de PKB también se puede producir inhibiendo la fosfatasa específica de D-3 fosfoinositida, PTEN, que es una fosfatasa que se une a FYVE asociada a la membrana normalmente inactivada en muchos cánceres, incluyendo el cáncer de próstata (Eur. J. Biochem. 1999, 263, 605-611; Cancer Res. 1997, 57, 2124-2129) .

El dominio catalítico de PKB es responsable... [Seguir leyendo]

Un compuesto de la fórmula (I) :

en la que el anillo A representa un heterociclo condensado de la fórmula IIa, IIb, III o IV:

R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo opcionalmente sustituido seleccionado de grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, alquinilo, heterociclilo, arilo, heterocicliloxi-alquilo y alcoxicarbonilo;

R2 es átomo de hidrógeno o de halógeno o un grupo de fórmula -COOR5 o -CONHR5, donde R5 representa uno de los significados definidos antes para R1, o un grupo arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido;

R3 es átomo de hidrógeno o un grupo de fórmula -CHO, -COOR5 o-CONHR5, donde R5 es como se ha definido antes;

R4 es átomo de hidrógeno o NHR6, donde R6 es átomo de hidrógeno o un grupo alquilo, arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido;

significa un enlace sencillo o doble Carbono-Carbono (-CH2- CH2- o -CH=CH-) ; 15 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; con las condiciones de que

- si R2 es átomo de hidrógeno o de halógeno o un grupo arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido, entonces R3 no es átomo de hidrógeno, y

- si el anillo A es un heterociclo condensado de la fórmula III, R3 y R4 son átomos de hidrógeno, y

significa doble enlace Carbono-Carbono (-CH=CH-) , entonces R2 no es COOH, COOMe o COOEt y el compuesto 1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxaldehído está excluido.

2. Un compuesto de fórmula (I) como se define en la reivindicación 1 en el que R2 representa átomo de hidrógeno o de halógeno o un grupo arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido o un grupo -C (O) NHR5 y R3 representa átomo de hidrógeno o un grupo -CONHR5, donde R5 es como se define en la reivindicación 1.

3. Un compuesto de fórmula (I) como se define en la reivindicación 1 o 2 en el que R1 representa átomo de hidrógeno o un alquilo opcionalmente sustituido; R2 representa átomo de hidrógeno o un grupo arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido o un grupo -CONHR5, donde R5 representa el grupo (S) -3-fenil-propano-1-amino-2-ilo; R3 representa átomo de hidrógeno o un grupo -CONHR5, donde R5 representa átomo de hidrógeno o el grupo (S) -3fenil-propano-1-amino-2-ilo; R4 representa átomo de hidrógeno o NH2.

4. Un compuesto de fórmula (I) como se define en cualquiera de las reivindicaciones precedentes o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que se selecciona del grupo que consiste en:

ácido 1-metil-1, 6-dihidro-1, 6, 7-triaza-as-indaceno-3-carboxílico;

amida del ácido 1-metil-1, 7-dihidro-1, 6, 7-triaza-as-indaceno-3-carboxílico;

amida del ácido 2-cloro-1-metil-1, 6-dihidro-1, 6, 7-triaza-as-indaceno-3-carboxílico; amida del ácido 1-metil-2-fenil-1, 7-dihidro-1, 6, 7-triaza-as-indaceno-3-carboxílico; ácido 4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxílico; ácido 1- (2, 2, 2-trifluoroetil) -4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxílico; amida del ácido 4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxílico; { (2S) -2-[ (4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-ilcarbonil) amino]-3-fenilpropil}carbamato de terc-butilo; [ (2S) -3-fenil-2- ({[1- (2, 2, 2-trifluoroetil) -4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-il]carbonil}amino) propil]carbamato de

terc-butilo; N-[ (1S) -2-amino-1-benciletil]-1- (2, 2, 2-trifluoroetil) -4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxamida; N-[ (1S) -2-amino-1-benciletil]-4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxamida; N-[ (1S) -2-amino-1-benciletil]-1- (2-hidroxietil) -4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxamida; éster etílico del ácido 2-bromo-4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxílico; amida del ácido 1-metil-2-o-tolil-4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxílico; amida del ácido 2-fenil-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxílico; ácido 2- (4-bromo-fenil) -1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxílico; amida del ácido 2- (4-bromo-fenil) -1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxílico; 2- (4-morfolin-4-il-fenil) -1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carbaldehído; ( (S) -2-amino-1-bencil-etil) -amida del ácido 2-fenil-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxílico; 2-piridin-4-il-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carbaldehído; amida del ácido 2-piridin-4-il-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-3-carboxílico; ácido 4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-2-carboxílico; N-[ (1S) -2-amino-1-benciletil]-4, 5-dihidro-1H-pirrolo[2, 3-f]isoquinolin-2-carboxamida; N-