Anticuerpo dirigido contra una proteína asociada a los osteoclastos.

Un anticuerpo capaz de unirse específicamente a DC-STAMP y suprimir la formación de osteoclastos.

Anticuerpo dirigido contra una proteína asociada a los osteoclastos Campo de la técnica La presente invención se refiere a un anticuerpo útil para el tratamiento y/o prevención de trastornos óseos metabólicos y a una composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de un trastorno óseo metabólico,

Técnica anterior

Se sabe que los huesos son un órgano dinámico que cambia constantemente entre los ciclos de formación y resorción para la reconstrucción, con el fin de cambiar su propia morfología y de mantener los niveles de calcio en sangre. El hueso sano mantiene un equilibrio entre la formación de hueso por los osteoblastos, la resorción ósea por los osteoclastos y su masa ósea constante. Por el contrario, cuando el equilibrio entre la formación de hueso y la resorción ósea se pierde, se puede desarrollar un trastorno óseo metabólico tal como osteoporosis (Endocrinological Review 13, 66-80, 1992; and Principles of Bone Biology pp. 87-102, 1996, Academic Press, New York) .

Se han notificado muchos factores implicados en la regulación del metabolismo óseo, incluyendo hormonas sistémicas y citoquinas locales, y sirven para formar y mantener el hueso (Endocrinological Review 13, 66-80, 1992; and Endocrinological Review 17, 308-332, 1996) . Un cambio en el tejido óseo con el envejecimiento está ampliamente reconocido como una causa de osteoporosis, pero el mecanismo de su desarrollo abarca varios factores, por ejemplo una secreción menor de hormonas sexuales y una anomalía de los receptores de las hormonas, expresión de los genes en envejecimiento, fracaso en la diferenciación en osteoclastos y/u osteoblastos y disfunción de dichas células, y, por tanto, todavía se conoce poco un acontecimiento fisiológico debido al envejecimiento. La osteoporosis se diivide en términos generales entre la osteoporosis tras la menopausia debido a una secreción menor de estrógenos y la osteoporosis senil debido al envejecimiento, pero los avances en las investigaciones básicas sobre los mecanismos de regulación de la formación de huesos y la resorción ósea son esenciales para aclarar el mecanismo de su desarrollo y desarrollar agentes terapéuticos.

Los osteoclastos son células multinucleadas derivadas de células madre hematopoyeticas, liberan iones cloruro e hidrógeno sobre la superficie del hueso al que se adhieren para acidificar el espacio entre la superficie ósea y las propias células (American Journal of Physiology 260, C1315-C1324, 1991) . Esto produce la descomposición del fosfato cálcico y la activación de las proteasas ácidas, lo que conduce a la resorción ósea.

Se ha encontrado que las células precursoras de los osteoclasos se diferencian en osteoclastos mediante estimulación con RANKL (activador del receptor del ligando NF-KB) que se expresa en la membrana celular de las células osteoblastos/estromales presentes en la superficie del hueso (Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America 95, 3597-3602, 1998; and Cell 93, 165-176, 1998) . Se ha demostrado que RANKL es un factor unido a la membrana producido por células osteoblastos/ estromales, su expresión está regulada por un factor de resorción ósea; RAKL induce la diferenciación de las células preosteoclásticas en osteoclastos multinucleados (Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America 95, 3597-3602, 1998; and Journal of Bone and Mineral Research 23, S222, 1998) . Además, se ha encontrado que ratones defectivos desprovistos de RAKL desarrollan una osteopetrosis típica que ha verificado que el RANKL es un inductor fisiológico de la diferenciación en osteoclastos (Nature 397, 315-323, 1999) .

Para tratar un trastorno óseo o acortar la duración del tratamiento, actualmente se usan bisfosfonatos, vitamina D3 activada, calcitonina y sus derivados, preparados hormonales tales como estradiol, SERM (moduladores selectivos de los receptores de estrógenos) , ipriflavona, vitamina K2 (menatetrenona) , preparados de calcio y similares. No obstante, estos fármacos no siempre han exhibido un efecto terapéutico satisfactorio y, por tanto, se ha deseado desarrollar fármacos más potentes.

Las células dendríticas (denominadas en lo sucesivo en el presente documento “CD" son células presentadoras de antígeno especializadas del sistema inmunológico y se distribuyen por todo el organismo. La proteína transmembrana específica de células dendríticas (denominada en lo sucesivo en el presente documento "DC-STAMP" es una proteína que se extiende a través de la membrana celular de las células dendríticas que se ha clonado a partir de la biblioteca de ADNc de CD derivadas de monocitos (European Journal of Immunology 30, 35853590, 2000) . Se ha notificado un ADNC de DC-STAMP humano (Nº de acceso en GenBank: NM_030788) y se han notificado dos ADNc de DC-STAMP murinos que son un ADNc de secuencia larga que contiene el tercer exón (Nº de acceso en GenBank: AB109560) y una variante de corte y empalme que tiene un tercer exón corto (Nº de acceso en GenBank: AB109561) , respectivamente. Se ha identificado una homología en la secuencia de aminoácidos de aproximadamente un 74% entre la DC-STAMP humana y la DC-STAMP murina. Como resultado del análisis de hidrofobicidad para las secuencias de aminoácidos, se prevé que las DC-STAMP tienen siete dominios transmembranales. Se considera que la variante de corte y empalme murina que tiene un tercer exón corto tiene el séptimo dominio trabsmembranal delecionado y, por tanto, en lo sucesivo en el presente documento se indica mediante DC-STAMP bT7.

Rho, J et al. DNA and Cell Biology, vol. 21, no. 8, August 2002, pág. 541-549 divulgan datos que demuestran que la DC-STAMP se expresa, preferentemente, en los osteoclastos maduros.

Se ha indicado que la DC-STAMP se expresa más tras la inactivación de fagocitos mononucleares con IL-4, pero se expresa menos tras su activación con dexametasona (Immunogenetics 53, 105-113, 2001) . No obstante, todavía no se ha aclarado la asociación de DC-STAMP con la diferenciación en osteoclastos.

Divulgación de la invención El objeto de la presente invención es proporcionar una sustancia para inhibir las actividades osteoclásticas o un agente para prevenir y/o tratar trastornos óseos metabólicos, tal como la destrucción ósea que se observa en la osteoporosis, la artritis reumatoide, la metástasis de las células cancerosas en el hueso y similares. Los presentes inventores han intentado aclarar las funciones de diferenciación en osteoclastos y su maduración y activación con el fin de identificar un agente eficaz para tratar y/o prevenir los trastornos óseos metabólicos. Como resultado, se ha encontrado que la DC-STAMP está implicada en la diferenciación en osteoclastos y su maduración y activación, y que una expresión menor de DC-STAMP conduce a una menor diferenciación de los osteoclastos. La presente invención se realiza sobre la base de estos hallazgos.

Específicamente, la presente invención comprende:

(1) un anticuerpo capaz de unirse específicamente a DC-STAMP y suprimir la formación de osteoclastos;

(2) un anticuerpo capaz de unirse específicamente a al menos una proteína seleccionada del grupo que consiste en: Una proteína que tiene una secuencia de aminoácidos mostrada en la SEC ID Nº: 2 en el Listado de secuencias, una proteína que tiene una secuencia de aminoácidos mostrada en la SEC ID Nº: 4 y una proteína que tiene una secuencia de aminoácidos mostrada en la SEC ID Nº: 6 en el Listado de secuencias, y que suprime la formación de osteoclastos.

(3) el anticuerpo de acuerdo con (1) o (2) , que se caracteriza por que el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.

(4) el anticuerpo de acuerdo con uno cualquiera de (1) a (3) , que se caracteriza por que el anticuerpo es humanizado.

(5) anticuerpo de acuerdo con uno cualquiera de (1) a (4) , que se caracteriza por que el anticuerpo es un anticuerpo completamente humano;

(6) el anticuerpo de acuerdo con uno cualquiera de (1) a (5) , que se caracteriza por que el anticuerpo es un anticuerpo de tipo IgG.

(7) una composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de un trastorno óseo metabólico, que se caracteriza por que la composición farmacéutica contiene al menos uno de los anticuerpos de acuerdo con (1) a (6) :

(8) una composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de un trastorno óseo metabólico, que se caracteriza por que la composición farmacéutica contiene al menos uno de los anticuerpos de acuerdo con (1) a (6) y al menos un componente seleccionado del grupo que consiste en: bisfosfonatos, vitamina D3 activada, calcitonina y sus derivados, preparados hormonales tales... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo capaz de unirse específicamente a DC-STAMP y suprimir la formación de osteoclastos.

2. Un anticuerpo capaz de unirse específicamente a al menos una proteína seleccionada del grupo que consiste en una proteína que tiene una secuencia de aminoácidos mostrada en la SEC ID Nº: 2 en el Listado de secuencias, una proteína que tiene una secuencia de aminoácidos mostrada en la SEC ID Nº: 4 y una proteína que tiene una secuencia de aminoácidos mostrada en la SEC ID Nº: 6 en el Listado de secuencias, y suprimir la formación de osteoclastos.

3. El anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, que se caracteriza porque el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.

4. El anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que se caracteriza porque el anticuerpo es humanizado.

5. El anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de de las reivindicaciones 1 a 4, que se caracteriza porque el anticuerpo es un anticuerpo completamente humano;

6. El anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de de las reivindicaciones 1 a 5, que se caracteriza porque el anticuerpo es un anticuerpo de tipo IgG.

7. Una composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de un trastorno óseo metabólico, que se caracteriza por que la composición farmacéutica contiene al menos uno de los anticuerpos de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 6.

8. Una composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de un trastorno óseo metabólico, que se caracteriza por que la composición farmacéutica contiene al menos uno de los anticuerpos de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 6 y al menos uno seleccionado del grupo que consiste en bisfosfonatos, vitamina D3 activada, calcitonina y sus derivados, preparados hormonales tales como estradiol, SERM (moduladores selectivos de los receptores de estrógenos) , ipriflavona, vitamina K2 (menatetrenona) , preparados de calcio, PTH (hormona paratiroidea) , agentes antiinflamatorios no esteroideos, anticuerpos anti-TNFa, anticuerpos anti-PTHrP (proteína relacionada con la hormona paratiroidea) , antagonistas del receptor de IL-1, anticuerpos anti-RANKL y OCIF (factor inhibidor de la osteoclastogénesis) .

9. Una composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de un trastorno óseo metabólico, que comprende un oligonucleótido antisentido que comprende de 15 a 30 meros complementario de una porción de una secuencia de nucleótidos seleccionada de las secuencias nucleotídicas proporcionadas en las SEC ID Nº: 1, 3 y 5, en la que el oligonucleótido antisentido es capaz de suprimir la formación de osteoclastos.