DENDRIMEROS COMO VEHICULOS NO VIRALES PARA TERAPIA GENICA.

Dendrímeros como vehículos no virales para terapia génica.

La presente invención se refiere a nuevos compuestos de fórmula general (I) y (II) para su uso en terapia génica como vehículos no virales y su uso para la elaboración de un medicamento.

Además se describe el procedimiento de síntesis de dichos compuestos de fórmula general (I) y (III).

Dendrímeros como vehículos no virales para terapia génica.

La presenteinvenciónse refierea nuevos compuestosde fórmulageneral (I) , y (II) parasu usoen terapia génica comovehículosno viralesy su usoparala elaboracióndeun medicamento. Ademásse describeel procedimientode síntesisde dichos compuestosde fórmula general (I) y (II) .

Estado de la técnica anterior

El uso de vectores no virales en terapia génica es especialmente relevante, ya que la FDAha suspendido, sine die, los ensayos clínicos usando virus (adenovirus, adenoasociados, etc) debidoa que generan reacciones inmunesque han causadola muertede algunos pacientesque participabanen dichos ensayos.Losvectoresvíricosposeenvarios inconvenientes, tales como, inseguridad en su manejo, toxicidad, provocación de una respuesta inmune que disminuye suefectividadofaltade especificidad celular.Juntoaello, estos sistemassonrápidamente eliminados de la circulación, limitandoel procesode transfecciónaórganosde primer paso (pulmones, hígadoybazo) .

También hay que tener en cuenta que procesos de recombinación pueden originar un virus replicante aunque el peligro es remoto.No obstante, los problemas que plantean los virus comovectores en terapia génica son seriosy los ensayos clínicos de terapia génica en por ejemplo Estados Unidos, han sido interrumpidos recientemente por la FDAdebidoala muertedevarios pacientesporíallo multiorgánico.Estetipodegraves problemashanllevadoala búsqueday desarrollode alternativasal usode los virus comovectoresde materialgénico.

Losvectores no virales poseen una seriedeventajas con respectoalos análogos víricos:a) facilidad enla preparación (incluso a escala multigramo) y modificación, b) mayor flexibilidad con respecto al tamaño del ADN a transfectar, c) son generalmente seguros in vivo yd) no provocan una respuesta inmune específicaypor tanto pueden ser administrados repetidamente.

Dentrodelosvectoresno virales, los dendrímeros representanunade estas alternativas, yaque presentanun tamaño nanométrico, una estructura globular, una baja polidispersidady una alta densidad funcionalenla superficie con un pequeño volumen molecular.

Descripción de la invención

La presenteinvenciónse refierea nuevos compuestosde fórmulageneral (I) , y (II) parasu usoen terapia génica comovehículos no viralesysu uso parala elaboraciónde un medicamentoo kitsde transfección. Además se describe el procedimientode síntesisde dichos compuestosde fórmula general (I) y (II) .

Por lo tanto un primer aspecto de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general (I) :

o una sal, prodroga o solvato del mismo;

donde:

Wse selecciona del grupo formado por cualquier polímero o dendrímero derivado de polifenilenvinileno, polifenilenetilideno o híbrido de ambos, cualquier compuesto orgánico conjugado que combine dobles enlaces, triples enlaces o una composición de ambos en su estructura, cualquier sustitución con grupos electrodadores o electroatractores de las anteriores, cualquier compuesto orgánico conjugado que alterne en su estructura dobles enlaces, triples enlaces o una combinación de ambos con anillos aromáticos de fenilo, naftaleno, fenantreno, antraceno, pirrol, furano, tiofeno, piridina, bases heterocíclicas aromáticas como la citosina, uracilo, adenina, timinay guanina, o cualquier sustitución con grupos electrodadores o electroatractoresde las anteriores, cualquier compuesto orgánico no conjugado que contenga anillos aromáticos de fenilo, naftaleno, fenantreno, antraceno, pirrol, furano, tiofeno, piridina, bases heterocíclicas aromáticas como la citosina, uracilo, adenina, timinayguanina, o cualquier sustitución congrupos electrodadoreso electroatractores de la s anterioreso cualquier combinacióndelos mismos,

X1, X2yX3 son igualeso diferentesyse seleccionan entre cualquier heteroátomo,

Yse seleccionade entre un grupo alquilo saturadoo insaturado (C2-C12) o cicloalquilo (C3-C8) , cicloalquenilo, arilo o heteroarilo,

R1yR2 son igualeso diferentes unidosaun grupo amino primario, secundarioo terciarioy seseleccionande entre hidrógeno, alquilo saturadoo insaturado (C1-C12) ,

n representael númerode ramificacionesy es un número entero seleccionado entre1y10.

Una realización preferida se refiere a compuesto de fórmula general (II) :

o una sal, prodroga o solvato del mismo;

donde:

Wse selecciona del grupo formado por cualquier polímero o dendrímero derivado de polifenilenvinileno, polifenilenetilideno o híbrido de ambos, cualquier compuesto orgánico conjugado que combine dobles enlaces, triples enlaces o una composición de ambos en su estructura, cualquier sustitución con grupos electrodadores o electroatractores de las anteriores, cualquier compuesto orgánico conjugado que alterne en su estructura dobles enlaces, triples enlaces o una combinación de ambos con anillos aromáticos de fenilo, naftaleno, fenantreno, antraceno, pirrol, furano, tiofeno, piridina, bases heterocíclicas aromáticas como la citosina, uracilo, adenina, timinay guanina, o cualquier sustitución con grupos electrodadores o electroatractoresde las anteriores, cualquier compuesto orgánico no conjugado que contenga anillos aromáticos de fenilo, naftaleno, fenantreno, antraceno, pirrol, furano, tiofeno, piridina, bases heterocíclicas aromáticas como la citosina, uracilo, adenina, timinayguanina, o cualquier sustitución congrupos electrodadoreso electroatractores de la s anterioreso cualquier combinacióndelos mismos.

X1, X2yX3 son igualeso diferentesy se seleccionan entre cualquier heteroátomo,

Yse seleccionade entre un grupo alquilo saturadoo insaturado (C2-C12) o cicloalquilo (C3-C8) , cicloalquenilo, arilo o heteroarilo,

R1yR2 son igualeso diferentes unidosaun grupo amino primario, secundarioo terciarioy se seleccionande entre hidrógeno, alquilo saturadoo insaturado (C1-C12) , cicloalquilo,

n representael númerode ramificacionesy es un número entero seleccionado entre1y10.

En otra realización preferida, los compuestos de fórmula general (I) ó (II) pueden estar en forma de saly unidos electrostáticamente a trifluoroacetato, anión cloruro, DNA, RNA, siRNA, miRNA, antagomir cualquier fármaco, anticuerpo, sonda, (radiactiva o no) para el diagnóstico de enfermedades mediante técnicas de imagen (Resonancia Magnética Nuclear, Tomografía por emisiónde fotón simpleoTomografía por emisiónde positrones) o cualquier combinación de los mismos.

Según otra realización preferidaX1, X2yX3 son igualeso diferentesy seseleccionan entre nitrógenou oxígeno.

En otra realización preferida, tanto para el compuesto de fórmula general (I) , como para el de fórmula general (II) , Xse selecciona sin sentido limitativo entre:

Según otra realización preferida, los radicalesR1aR2 puedenser igualeso diferentesy se seleccionan independientemente entre H, cualquier amina sustituida o no sustituida, aminoácidos básicos como por ejemplo la lisina o la arginina, derivados del colesterol a partir del cloroformiato de colesterilo, ácido fólico, ácido láctico, dexametasona, azúcares comoporejemploysin sentido limitativo, la lactosa ola mañosaa partirdesu derivadode tosilo, agentes lisosomotrópicos como por ejemplo la cloroquina, heterociclos nitrogenados como la uridina, la piperidina o la piperazina, cadenas hidrofílicas derivadas de poli-etilenglicol, cualquier diacrilato y las siguientes estructuras:

Enuna realizaciónpreferida, dichoscompuestosdefórmulageneral (I) o (II) se seleccionan, perosinlimitarse, del grupo que comprende:

El término “alquilo” se refiere, en la presente invención, a cadenas alifáticas, lineales o ramificadas, saturadas o insaturadas, que tienen de 2 a 12 átomos de carbono. Por ejemplo, pero sin limitarse a, metilo, etilo, npropilo, i-propilo, n-butilo, terc-butilo, sec-butilo, n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo etc. Además el término alquilo también se refiere a cadenas alifáticas lineales o ramificadas, saturadas o insaturadas de 2 a 12 átomos de carbono, que pueden estar sustituidas por grupos funcionales como por ejemplo el hidroxilo, carboxilo, carbonilo, amina, amida o que puede contener en su estructura cualquier heteroátomo seleccionado entre nitrógeno, oxígeno y azufre.

El término... [Seguir leyendo]

1. Compuesto de fórmula general (I)

o una sal, prodroga o solvato del mismo;

donde:

Wse seleccionadel grupo formadopor cualquier polímeroo dendrímero derivadode polifenilenvinileno, polifenilenetilidenoo híbridode ambos, cualquier compuestoorgánico conjugadoque combine dobles enlaces, triples enlaces ounacomposicióndeambosensu estructura, cualquier sustitucióncongrupos electrodadoresoelectroatractores de la s anteriores, cualquier compuesto orgánico conjugado que alterne en su estructura dobles enlaces, triples enlaces o una combinaciónde ambos con anillos aromáticosde fenilo, naftaleno, fenantreno, antraceno, pirrol, furano, tiofeno, piridina, bases heterocíclicas aromáticas comola citosina, uracilo, adenina, timinayguanina, o cualquier sustitución con grupos electrodadores o electroatractores de las anteriores, cualquier compuesto orgánico no conjugado que contenga anillos aromáticos de fenilo, naftaleno, fenantreno, antraceno, pirrol, furano, tiofeno, piridina, bases heterocíclicas aromáticas comolacitosina, uracilo, adenina, timinayguanina, o cualquier sustitución con grupos electrodadores o electroatractores de las anteriores o cualquier combinación de los mismos;

X1, X2yX3 son igualeso diferentesy se seleccionan entre cualquier heteroátomo,

Y se seleccionade entre un grupo alquilo saturado o insaturado (C2-C12) o cicloalquilo (C3-C8) , cicloalquenilo, arilo o heteroarilo,

R1yR2 son igualeso diferentes unidosaun grupo amino primario, secundariooterciarioyse seleccionande entre hidrógeno, alquilo saturadooinsaturado (C1-C12) , cicloalquilo (C3-C8) , cicloalquenilo, ariloo heteroarilo,

n representael númerode ramificacionesy es un número entero seleccionado entre1y10.

2. Compuestode fórmula general (II) según las reivindicaciones1

o una sal, prodroga o solvato delmismo;

donde:

Wse seleccionadel grupo formadopor cualquier polímeroo dendrímero derivadode polifenilenvinileno, polifenilenetilidenoo híbridode ambos, cualquier compuestoorgánico conjugadoque combine dobles enlaces, triples enlaces ouna composicióndeambosensu estructura, cualquier sustitucióncongrupos electrodadoresoelectroatractores de la s anteriores, cualquier compuesto orgánico conjugado que alterne en su estructura dobles enlaces, triples enlaces o una combinación de ambos con anillos aromáticos de fenilo, naftaleno, fenantreno, antraceno, pirrol, furano, tiofeno, piridina, bases heterocíclicas aromáticas comola citosina, uracilo, adenina, timinayguanina, o cualquier sustitucióncon grupos electrodadores o electroatractores de las anteriores, cualquier compuesto orgánico no conjugado que contenga anillos aromáticos de fenilo, naftaleno, fenantreno, antraceno, pirrol, furano, tiofeno, piridina, bases heterocíclicas aromáticas comola citosina, uracilo, adenina, timinayguanina, o cualquier sustitución con grupos electrodadores o electroatractores de las anteriores o cualquier combinación de los mismos;

X1, X2yX3 son igualeso diferentesy se seleccionan entre cualquier heteroátomo,

Y se seleccionade entre un grupo alquilo saturado o insaturado (C2-C12) o cicloalquilo (C3-C8) , cicloalquenilo, arilo o heteroarilo,

R1yR2 son igualeso diferentes unidosaun grupo amino primario, secundarioo terciarioyse seleccionande entre hidrógeno, alquilo saturado o insaturado (C1-C12) , cicloalquilo (C3-C8) , cicloalquenilo, arilo o heteroarilo,

n representael númerode ramificacionesy es un número entero seleccionado entre1y10.

3. Compuestode fórmula general (I) ó (II) según cualquierade las reivindicaciones anteriores, donde pueden estar enformadesalyunidoselectrostáticamenteatrifluoroacetato, anióncloruro, DNA, RNA, siRNA, miRNA, antagomir, cualquier fármaco, anticuerpo, sonda, para el diagnóstico de enfermedades mediante técnicas de imagen o cualquier combinación de los mismos.

4. Compuestode fórmula general (I) o (II) según cualquieradelasreivindicaciones1 a3, dondeX1, X2yX3 son igualeso diferentesy se seleccionan entre nitrógenou oxígeno.

5. Compuestode fórmula general (I) o (II) según cualquieradelasreivindicaciones1 a4, dondeY se selecciona entre:

6. Compuestode fórmula (I) , ó (II) según cualquierade las reivindicaciones1 a5, dondeR1aR2 pueden ser igualeso diferentesy se seleccionan independientemente entreH, cualquier amina sustituidao no sustituida, aminoácidos básicos, derivados del colesterol, ácido fólico, ácido láctico, dexametasona, azúcares, agentes lisosomotrópicos, heterociclos nitrogenados, cadenas hidrofílicas derivadas de poli-etilenglicol, cualquier diacrilato, cualquier aminoácido básicoylas siguientes estructuras:

7. Compuestode fórmula general (I) , ó (II) según cualquieradelasreivindicaciones1 a6seleccionadodela lista que comprende:

8. Composiciónfarmacéutica caracterizada porque comprende un compuesto de fórmula (I) según una cualquiera de las reivindicaciones1, 3, 45y6junto con unoo másexcipientesfarmacéuticamente aceptables.

9. Composiciónfarmacéutica caracterizada porque comprendeuncompuestode fórmula (II) segúnuna cualquiera de las reivindicaciones2, 3, 45y6, junto con unoo másexcipientesfarmacéuticamente aceptables.

10. Composición según una cualquiera de las reivindicaciones8y9 caracterizada porque comprende, además, uno o más principios activos.

11. Procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula general (I) caracterizado porque comprende las siguientes etapas:

donde:

Wse seleccionadel grupo formadopor cualquier polímeroo dendrímero derivadode polifenilenvinileno, polifenilenetilidenoo híbridode ambos, cualquier compuestoorgánico conjugadoque combine dobles enlaces, triples enlaces ouna composicióndeambosensu estructura, cualquier sustitucióncongrupos electrodadoresoelectroatractores de la s anteriores, cualquier compuesto orgánico conjugado que alterne en su estructura dobles enlaces, triples enlaces o una combinación de ambos con anillos aromáticos de fenilo, naftaleno, fenantreno, antraceno, pirrol, furano, tiofeno, piridina, bases heterocíclicas aromáticas comola citosina, uracilo, adenina, timinayguanina, o cualquier sustitucióncon grupos electrodadores o electroatractores de las anteriores, cualquier compuesto orgánico no conjugado que contenga anillos aromáticos de fenilo, naftaleno, fenantreno, antraceno, pirrol, furano, tiofeno, piridina, bases heterocíclicas aromáticas comola citosina, uracilo, adenina, timinayguanina, o cualquier sustitución con grupos electrodadores o electroatractores de las anteriores o cualquier combinación de los mismos;

Ase selecciona entreX1, X2yX3

X1, X2yX3 son igualeso diferentesy se seleccionan entre cualquier heteroátomo,

Y se seleccionade entre un grupo alquilo saturado o insaturado (C2-C12) o cicloalquilo (C3-C8) , cicloalquenilo, arilo o heteroarilo,

R1yR2 son igualeso diferentes unidosaun grupo amino primario, secundarioo terciarioyse seleccionande entre hidrógeno, alquilo saturadoo insaturado (C1-C12) , cicloalquilo (C3-C8) , cicloalquenilo, ariloo heteroarilo, y

n representael númerode ramificacionesy es un número entero seleccionado entre1y10.

12. Procedimiento para la obtención de un compuesto de fórmula general (II) , donde se parte del compuesto de fórmula general (I) y serepitentodoslos pasosa-csegúnlareivindicación10.

13. Uso de un compuesto de fórmula general (I) ó (II) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 para la elaboración de un medicamento.

14. Uso del compuesto de fórmula (I) ó (II) según la reivindicación 13 para la elaboraciónde un medicamento para la prevención y/o tratamiento patologías como enfermedades del sistema nervioso, cualquier enfermedadque curse con la aparición de tumoresylas infecciones viriásicas, incluyendo las causadas por el virus del síndromede inmunodeficiencia humano (SIDA) .

15. Uso delcompuestode fórmula (I) , (II) o (III) según cualquierade las reivindicaciones1 a6parala elaboración de un kit de transfección de siRNA en cultivos primarios de células nerviosas, glia, células tumoralesycélulas primarias

16.Usodel compuestode fórmula (I) , (II) o (III) según cualquieradelasreivindicaciones1 a6 enterapiagénica como vector no viral.

17.Usodel compuestode fórmula (I) , (II) o (III) según cualquieradelasreivindicaciones1a6parala elaboración de sondas para el diagnóstico de enfermedades mediante técnicas de imagen.