Amidinas heterocíclicas antiinflamatorias y analgésicas novedosas que inhiben la producción de óxido de nitrógeno (NO).

Compuestos representados por la fórmula general (I) indicada a continuación y en la que:

Fórmula (I):

- uno de G1 y G2 es el sustituyente amidina de fórmula Q y el otro de G1 o G2 se selecciona independientemente de hidrógeno, halógeno, hidroxilo, alcoxilo C1-C4 y alquilo C1-C4; el sustituyente amidina de fórmula Q está representado por la estructura facilitada a continuación, en la que R es alquilo C1-C4 o cicloalquilo:

sustituyente amidina de fórmula Q:

- X es un átomo de azufre (-S-) o un átomo de oxígeno (-O-);

- R3 y R4 se seleccionan independientemente de hidrógeno, halógeno, hidroxilo, alcoxilo C1-C4, alquilo C1-C4 y alquenilo C1-C4.

Amidinas heterocíclicas antiinflamatorias y analgésicas novedosas que inhiben la producción de óxido de nitrógeno (NO) .

El objeto de la presente invención son derivados de amidina heteroaromáticos novedosos con actividad antiinflamatoria y analgésica, sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, métodos para preparar dichos derivados y formulaciones de los mismos, y también su uso terapéutico.

En particular, la presente invención se refiere a los compuestos de fórmula (I) y a las sales farmacéuticamente aceptables correspondientes, que muestran una marcada actividad antiinflamatoria y analgésica, tanto inhibiendo la producción de óxido de nitrógeno (NO) como inhibiendo la producción de prostaglandinas, tales como PGE2, y de citocinas tales como interleucina-6 (IL-6) , y son por tanto agentes terapéuticos útiles en el tratamiento de patologías asociadas con la producción excesiva de NO debido a la expresión de NOS inducibles y de prostaglandinas inflamatorias producidas por COX-2 y citocinas tales como IL-6.

Entre las patologías típicas asociadas con producción anómala de NO, prostaglandinas y citocinas se encuentran: artritis reumatoide, osteoartritis, sinovitis, neuropatías, colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn, y patologías inflamatorias o ateroscleróticas del sistema cardiovascular.

El óxido de nitrógeno (NO) es un mediador químico que está ampliamente implicado en diversos fenómenos fisiológicos. A comienzos de la década de 1980 se descubrió que el factor con actividad vasodilatadora liberado por el endotelio (factor de relajación derivado del endotelio, EDRF) , que provoca vasodilatación mediada por acetilcolina, no era sino NO liberado por las células del endotelio vascular. Este descubrimiento fue concomitante con la identificación de la ruta metabólica mediada por la enzima NO sintetasa (NOS) , que, empezando con L-arginina, conduce a L-citrulina y NO (Moncada S., Higgs A., N. Engl. J. Med., 1993, 329 (27) , 12/2002) .

Se han identificado tres isoformas de la enzima NOS. Las isoformas caracterizadas hasta la fecha son dos isoformas constitutivas, conocidas como la isoforma neuronal o tipo I (nNOS) y la isoforma endotelial o tipo III (eNOS) , y una isoforma inducible, conocida como la isoforma iNOS o tipo II.

iNOS se induce tras la activación, en particular células, en respuesta a un estímulo inflamatorio inducido por endotoxina o citocina; el control de iNOS se regula por tanto al nivel de síntesis de la proteína, que, una vez expresada, produce altas concentraciones de NO durante tiempos relativamente largos.

Los macrófagos, células endoteliales, músculo liso endotelial, condrocitos, osteoblastos y el epitelio pulmonar son particularmente eficaces con respecto a la expresión de iNOS tras un estímulo inflamatorio.

Una diferencia notable entre las enzimas constitutivas y la enzima inducible es por tanto una producción retardada pero más sostenida y duradera de NO mediada por la enzima inducible, conjuntamente en el sitio en el que se libera este mediador. Esto determina las diferencias que dan lugar a los efectos fisiológicos o fisiopatológicos mediados por NO.

Por tanto, mientras que el NO liberado a partir de las enzimas constitutivas actúa como mediador dentro de un sistema de traducción de señales, por ejemplo la activación de guanilato ciclasa mediante el NO liberado a partir de las células endoteliales, que, aumentando los niveles de cGMP, controla el tono vascular y la relajación muscular.

Por otro lado, el NO liberado a partir de la isoforma inducible actúa como molécula citotóxica, implicada en mecanismos de defensa corporal (Dugas B. et al.; Res. Immunol. 1995, 146 (9) 664-70) .

Por tanto, mientras que, por otro lado, cuando se regula apropiadamente, iNOS es una enzima de importancia fundamental para el sistema inmunitario, desequilibrios en la síntesis de NO mediado por iNOS pueden conducir a una amplia gama de patologías implicadas en procesos inflamatorios o que implican el sistema inmunitario tal como se indicó anteriormente.

Se ha demostrado que iNOS se induce en cada especie mediante procesos inflamatorios y que la supresión de su actividad es eficaz en la reducción de sintomatologías inflamatorias (A.J. Hobbs et al., Annual Review of Pharmacology and Toxicology, 1999, 39, 191-220) .

Se cree, por otro lado, que el NO está implicado, junto con otros mediadores, en procesos fisiológicos de plasticidad y reconstitución de tejido óseo, mientras que, por otro lado, se ha mostrado la implicación de NO derivado de iNOS en el proceso inflamatorio y en la degeneración de los tejidos caracterizados en artritis reumatoide (AR) y osteoartritis (OA) (van’t Hof RJ, Ralston SH.; Nitric oxide and bone, Immunology, julio de 2001; 103 (3) : 255-261) .

De hecho, se ha encontrado iNOS en el líquido sinovial y cartílago de pacientes que padecen artritis reumatoide (AR) y osteoartritis (OA) , y se ha demostrado que tanto las células sinoviales como los condrocitos, in vitro, pueden expresar iNOS mediante la estimulación con citocinas. Además, se ha mostrado que el NO es un estimulador potente de la apoptosis de condrocitos y células sinoviales, lo que explicaría la degeneración tisular observada en AR (Armour KJ, et al., Arthritis Rheum. Diciembre de 2001; 44 (12) : 2790-6) .

La alta concentración de NO en pacientes con colitis ulcerosa también sugiere en este caso una implicación de iNOS en esta patología.

Con la identificación de NO como el mediador crítico de un número congruente de procesos fisiopatológicos, el control farmacológico de su producción tiene claramente potencial terapéutico. Los primeros agentes que aparecen en la bibliografía que pueden interferir con la producción de NO mediado por NOS eran inhibidores enzimáticos que eran análogos del sustrato (L-arginina) , entre los siguientes: L-NMMA (NG-metil-L-arginina) , L-NNA (N G-nitro-L

( arginina) , L-NAME (éster metílico de NG-nitro-L-arginina) , L-NAA (NG-amino-L-arginina) y L-NIO (N -iminoetil-Lornitina) .

Teniendo en cuenta su débil selectividad entre las diversas isoformas, el uso clínico de estos inhibidores requiere un gran cuidado, puesto que la inhibición de las formas constitutivas puede tener serias consecuencias, tales como hipertensión y posibles efectos más graves tales como trombosis y daño tisular. Por tanto, aunque es posible el uso terapéutico de inhibidores moderadamente selectivos, el uso de agentes que pueden controlar selectivamente la producción de NO a partir de iNOS es de un gran potencial terapéutico.

En la última década, han aparecido un gran número de estudios en la bibliografía, que documentan una investigación intensa en esta dirección (Exp. Opin. Ther. Patents, 1999, 9, 549-556; Exp. Opin. Ther. Patents, 2000, 10, 1143-1146) ; entre éstos, se han notificado inhibidores de NOS de estructura no de aminoácido, que se basan en la mayoría en bioisoésteres del grupo guanidina presente en la estructura de arginina, por ejemplo S-alquilisotiourea, guanidina y amidina.

Todas estas publicaciones y estudios revelan la necesidad terapéutica de agentes farmacológicos basados en la modulación de la actividad de iNOS caracterizada por un mejor perfil farmacológico.

El documento JP 10265450 describe derivados de amidina que tienen actividad inhibidora de monóxido de hidrógeno sintetasa; la tabla 8 describe derivados de tienilamidina de bencimidazoles.

El documento WO2004014885 A1 describe compuestos de aminobenzotiazol con una actividad inhibidora de NOS; tales compuestos se caracterizan por la presencia simultánea en el grupo benzotiazol de un sustituyente amino y de un sustituyente amidina.

El documento WO9624588 describe derivados de isotiourea bicíclica para el tratamiento de trastornos neurodegenerativos.

El documento WO961944 A1 describe derivados de acetamidina y su uso como inhibidores para la óxido nítrico sintasa.

Las prostaglandinas (PGE) son mediadores de inflamación generados por la enzima ciclooxigenasa (COX) . La isoforma inducible (COX-2) se sobreproduce (“regula por incremento”) en los tejidos inflamados y esto conduce a una síntesis aumentada de PGE.

Existen interacciones entre los sistemas NOS y COX, y el papel del NO en la inflamación puede depender por tanto no sólo de su efecto directo sino también de su efecto modulador sobre la biosíntesis de PGE.

La interleucina-6 (IL-6) es una citocina cuya sobreexpresión está asociada con la fisiopatología de diversas enfermedades humanas, por ejemplo enfermedad de Crohn [véase Ho et al., J. Gastroenterol. supl. 14, 56-61 (2002) ] o artritis reumatoide [véase Nakahara H. et al.;... [Seguir leyendo]

1. Compuestos representados por la fórmula general (I) indicada a continuación y en la que: Fórmula (I) :

- uno de G1 y G2 es el sustituyente amidina de fórmula Q y el otro de G1 o G2 se selecciona independientemente de hidrógeno, halógeno, hidroxilo, alcoxilo C1-C4 y alquilo C1-C4; el sustituyente amidina de fórmula Q está representado por la estructura facilitada a continuación, en la que R es alquilo C1-C4 o cicloalquilo:

sustituyente amidina de fórmula Q:

-X es un átomo de azufre (-S-) o un átomo de oxígeno (-O-) ;

-R3 y R4 se seleccionan independientemente de hidrógeno, halógeno, hidroxilo, alcoxilo C1-C4, alquilo C1-C4 y alquenilo C1-C4;

-Z es un grupo arilo o heteroarilo, o una cadena de alquilo o alquenilo C1-C6 lineal o ramificada, o un grupo alquilarilo C1-C4 o un grupo alquilheteroarilo C1-C4 en el que el grupo arilo es un fenilo que no está sustituido o está 15 sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, trifluorometilo, hidroxilo, nitro, ciano, carboxilo, carboxamido, carbonilo, tio, metiltio, metanosulfonilo, metanosulfinilo, sulfonamido, trifluorometoxilo, alcoxilo C1-C6 y alquilo C1-C6, y el grupo heteroarilo es un anillo aromático heterocíclico de 5 ó 6 átomos que contiene uno o más heteroátomos, que no está sustituido o está sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, trifluorometilo, hidroxilo, nitro, ciano, carboxilo, carbonilo, tio,

metiltio, metanosulfonilo, metanosulfinilo, trifluorometoxilo, alcoxilo C1-C6 y alquilo C1-C6;

el grupo alquilarilo C1-C4 es una cadena hidrocarbonada C1-C4 lineal o ramificada, saturada o insaturada sustituida con un grupo arilo; cuando la cadena C1-C4 es insaturada, está destinada a contener sólo un doble enlace sustituido o no sustituido; los sustituyentes para el grupo arilo se seleccionan independientemente de los grupos definidos anteriormente como sustituyentes para el grupo arilo;

el grupo alquilheteroarilo C1-C4 es una cadena hidrocarbonada C1-C4 lineal o ramificada, saturada o insaturada sustituida con un grupo heteroarilo sustituido o no sustituido; cuando la cadena C1-C4 es insaturada, está destinada a contener sólo un doble enlace sustituido o no sustituido;

el término “heteroarilo” significa cualquiera de los núcleos heterocíclicos definidos anteriormente;

estando posiblemente los compuestos de fórmula (I) o bien en forma de base libre o bien como sales 30 farmacéuticamente aceptables.

2. Compuestos según la reivindicación 1 de fórmula general (I) , en la que X es un átomo de azufre, G1 y G2 se seleccionan independientemente de H (hidrógeno) y el sustituyente amidina de fórmula Q en la que R es un metilo, R3 y R4 son ambos hidrógeno, Z es un grupo arilo o heteroarilo, una cadena de alquilo o alquenilo C3-C6 lineal o ramificada, un grupo alquilarilo o alquenilarilo C1-C4, o un grupo alquilheteroarilo C1-C4 tal como se definió en la reivindicación 1.

3. Compuestos según la reivindicación 2, en los que X, en lugar de ser un átomo de azufre, es un átomo de oxígeno.

4. Compuestos según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en forma de sales farmacéuticamente aceptables, elegidas de clorhidrato, bromhidrato, sulfato, hidrogenosulfato, metanosulfonato, maleato, citrato, fumarato y succinato.

5. Uso de los compuestos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, o de una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, para la preparación de una especialidad farmacéutica para tratar estados patológicos asociados con fenómenos inflamatorios o autoinmunitarios.

6. Uso de compuestos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, o de una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, para la preparación de una especialidad farmacéutica para inhibir la producción de óxido 5 nítrico (NO) y de interleucina-6 (IL-6) .

7. Preparación farmacéutica que comprende, como principio activo, al menos uno de los compuestos según una de las reivindicaciones 1 a 4, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

8. Preparación farmacéutica según la reivindicación 7, para su uso en el tratamiento terapéutico de estados 10 patológicos asociados con fenómenos inflamatorios y autoinmunitarios.

9. Preparación farmacéutica según la reivindicación 7, para su uso en el tratamiento terapéutico para controlar y prevenir enfermedades articulares degenerativas.

10. Preparación farmacéutica según la reivindicación 7, para su uso en el tratamiento terapéutico de artritis reumatoide u osteoartritis.

11. Preparación farmacéutica según la reivindicación 7, para su uso como analgésico en el tratamiento terapéutico de dolor de origen articular o neuropático.

12. Preparación farmacéutica según la reivindicación 7, para su uso en el tratamiento terapéutico de enfermedades inflamatorias del tracto gastrointestinal.

13. Preparación farmacéutica según la reivindicación 7, que comprende componentes no activos farmacéuticamente

aceptables elegidos del grupo que consiste en vehículos, aglutinantes, aromatizantes, edulcorantes, disgregantes, agentes conservantes, humectantes y mezclas de los mismos, o componentes para facilitar la absorción rectal, transdérmica o transmucosa o que permiten la liberación controlada del principio activo en el tiempo, y también componentes adecuados para uso parenteral, por ejemplo administración intravenosa, intramuscular, subcutánea, intradérmica e intraarticular, en cuyos casos se usan preferiblemente los compuestos salificados tal como se definieron en las reivindicaciones 1 y 4.

14. Proceso para preparar un derivado de fórmula general (I) en la que X, G1, G2, R3 y R4 tienen el significado facilitado en la reivindicación 1, que comprende las operaciones de hacer reaccionar un compuesto de fórmula (II)

en la que X, Z, R3 y R4 se definen como para los compuestos de fórmula (I) , mientras que G’1 y G’2 se seleccionan independientemente de: hidrógeno, halógeno, hidroxilo, alcoxilo C1-C4, alquilo C1-C4 y el grupo amina (-NH2) , siempre que, por cada compuesto de fórmula (II) , sólo uno de los dos sustituyentes G’1 o G’2 sea un grupo amina (-NH2) , con un compuesto de fórmula (III)

en la que R es tal como se definió anteriormente en la reivindicación 1 para el sustituyente amidino de fórmula Q y L 35 es un grupo saliente, en un disolvente adecuado a temperaturas de entre 0ºC y 50ºC;

opcionalmente, completándose posiblemente la conversión de un compuesto de fórmula (II) en un compuesto de fórmula (I) mediante la eliminación de cualquier grupo protector presente;

recuperándose finalmente los compuestos de fórmula (I) de la masa de reacción, purificándose mediante métodos convencionales y aislándose en forma no modificada o en forma de sales farmacéuticamente aceptables.

15. Proceso según la reivindicación 14, en el que el grupo saliente L se selecciona del grupo que consiste en alcoxilo, alquiltio o ariltio y el disolvente adecuado se selecciona del grupo que consiste en alcohol, acetonitrilo, N, Ndimetilformamida y tetrahidrofurano.