SONDAS DE DOBLE HEBRA PARA LA DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS, MEDIANTE FLUORESCENCIA.

Una sonda de doble hebra, pretendida para la detección de un ácido nucleico diana,

de hebra individual, o de hebra doble, mediante fluorescencia, el cual comprende: - una primera hebra de la fórmula X1-(L1)a-S1-S''1-(L''1)b-Y1, pretendida para una primera hebra del ácido nucleico diana, la cual comprende una secuencia de la fórmula T'' 1-T 1; - una segunda hebra de la fórmula X2-(L2)c-S2-S''2-(L''2)dY2, pretendida para una segunda hebra del ácido nucleico diana, la cual comprende una secuencia de la fórmula T''2-T2; en donde, - dos de las X1, X2, Y1, e Y2, representan un donante fluorescente, mientras que, las otros dos, representan un aceptor fluorescente, y X 1 y X 2, no pueden representar, ambas, un donante fluorescente; - a, b, c y d, representan 0 ó 1, con la condición de que, a, b, c ó d, representen 1, cuando, respectivamente, X1, X2, Y1, ó Y2, representen un donante fluorescente; - T 1 y T 2, representan secuencias de oligonucleótidos, que tienen de 10 a 35 nucleótidos, de una forma más preferible, de 12 a 20 nucleótidos, las cuales son complementarias la una con respecto a la otra; - de una forma independiente la una con respecto a la otra, T''1 y T''2, representan secuencias de oligonucleótidos, que tienen de 2 a 8 nucleótidos; - S1 y S2, representan secuencias de oligonucleótidos, que tienen de 10 a 35 nucleótidos, las cuales son complementarias la una con respecto a la otra, siendo S1, por lo menos un 85% complementaria a T1, y siendo, S2, por lo menos un 85% complementaria a T2; - de una forma independiente la una con respecto a la otra, S''1 y S''2, representan secuencias de oligonucleótidos, que tienen de 2 a 8 nucleótidos, siendo S''1, por lo menos un 65% complementaria a T''1, y siendo, S''2, por lo menos un 65% complementaria a T''2; - L 1 y L 2, son porciones espaciadoras, de tal forma que, el respectivo radio de giro de X 1 y X 2, con respecto a los sitios de unión de S 1 a L 1 y de S 2 a L 2, sea de por lo menos 3,4 ''A; - L''1 y L''2, son porciones espaciadoras, de tal forma que, el respectivo radio de giro de Y1 y Y2, con respecto a los sitios de unión de S''1 a L''1 y de S''2 a L''2, sea de por lo menos 3,4 ''A; - siendo la temperatura de fusión de la sonda de doble hebra, inferior a la temperatura de fusión del complejo formado entre la primera hebra y la segunda hebra de la sonda de doble hebra del ácido nucleico diana; e inferior a la temperatura de fusión del complejo formado entre la segunda hebra de la sonda de doble hebra y la segunda hebra del ácido nucleico diana, en caso de encontrarse presente

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E06291594.

Solicitante: BIO-RAD PASTEUR.

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: 3, BOULEVARD RAYMOND POINCARE,92430 MARNES-LA-COQUETTE.

Inventor/es: RIEUNIER, FRANCOIS, DAGLAND,TYPHAINE.

Fecha de Publicación: 5 de Noviembre de 2009.

Fecha Solicitud PCT: 12 de Octubre de 2006.

Fecha Concesión Europea: 29 de Julio de 2009.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12Q1/68B2B
C12Q1/68D
C12Q1/70B2B
C12Q1/70B6

Clasificación PCT:

C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania.

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