Métodos de modificación de anticuerpos y anticuerpos modificados con propiedades funcionales mejoradas.

Método de modificación mediante ingeniería genética de un agente de unión inmunológica,

comprendiendo el agente de unión inmunológica (i) una región variable de cadena pesada, o fragmento de la misma, comprendiendo la región variable de cadena pesada residuos de región de marco de VH y/o (ii) una región variable de cadena ligera, o fragmento de la misma, comprendiendo la región variable de cadena ligera residuos de región de marco de VL, comprendiendo el método:

A) seleccionar una o más posiciones de aminoácido dentro de los residuos de región de marco de VH, los residuos de región de marco de VL o los residuos de región de marco de VH y VL para la mutación; y

B) mutar la una o más posiciones de aminoácido seleccionadas para la mutación,

a) en el que si la una o más posiciones de aminoácido de cadena pesada seleccionadas para la mutación son de una región variable de cadena pesada de la familia de VH3 humana, la mutación comprende una o más sustituciones seleccionadas del grupo que consiste en:

(i) glutamina (Q) en la posición de aminoácido 1 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat;

(ii) glutamina (Q) en la posición de aminoácido 6 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat;

(iii) treonina (T) o alanina (A) en la posición de aminoácido 7 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat;

(iv) alanina (A), valina (V) o fenilalanina (F) en la posición de aminoácido 89 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 78 usando el sistema de numeración de Kabat); y

(v) arginina (R), glutamina (Q), isoleucina (I), leucina (L), metionina (M) o fenilalanina (F) en la posición de aminoácido 103 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 89 usando la numeración de Kabat);

b) en el que si la una o más posiciones de aminoácido de cadena pesada seleccionadas para la mutación son de una región variable de cadena pesada de la familia de VH1a humana, la mutación comprende una o más sustituciones seleccionadas del grupo que consiste en:

(i) ácido glutámico (E) en la posición de aminoácido 1 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat;

(ii) ácido glutámico (E) en la posición de aminoácido 6 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat;

(iii) leucina (L) en la posición de aminoácido 12 usando el sistema de numeración de AHo (posición de 30 aminoácido 11 usando el sistema de numeración de Kabat);

(iv) metionina (M) en la posición de aminoácido 13 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 12 usando el sistema de numeración de Kabat);

(v) ácido glutámico (E) o glutamina (Q) en la posición de aminoácido 14 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 13 usando el sistema de numeración de Kabat);

(vi) leucina (L) en la posición de aminoácido 19 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 18 usando el sistema de numeración de Kabat);

(vii) isoleucina (I) en la posición de aminoácido 21 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 20 usando el sistema de numeración de Kabat);

(viii) fenilalanina (F), serina (S), histidina (H) o ácido aspártico (D) en la posición de aminoácido 90 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 79 usando el sistema de numeración de Kabat);

(ix) ácido aspártico (D) o glutamina (Q) en la posición de aminoácido 92 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 81 usando el sistema de numeración de Kabat);

(x) glicina (G), asparagina (N) o treonina (T) en la posición de aminoácido 95 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 82b usando el sistema de numeración de Kabat); y

(xi) treonina (T), alanina (A), prolina (P) o fenilalanina (F) en la posición de aminoácido 98 usando la numeración de AHo (posición de aminoácido 84 usando la numeración de Kabat);

c) en el que si la una o más posiciones de aminoácido de cadena pesada seleccionadas para la mutación son de una región variable de cadena pesada de la familia de VH1b humana, la mutación comprende una o más sustituciones seleccionadas del grupo que consiste en:

(i) ácido glutámico (E) en la posición de aminoácido 1 usando el sistema de numeración de AHo o de Kabat;

(ii) treonina (T), prolina (P), valina (V) o ácido aspártico (D) en la posición de aminoácido usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 9 usando el sistema de numeración de Kabat);

(iii) leucina (L) en la posición de aminoácido 12 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 11 usando el sistema de numeración de Kabat);

(iv) valina (V), arginina (R), glutamina (Q) o metionina (M) en la posición de aminoácido 13 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 12 usando el sistema de numeración de Kabat);

(v) ácido glutámico (E), arginina (R) o metionina (M) en la posición de aminoácido 14 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 13 usando el sistema de numeración de 15 Kabat);

(vi) arginina (R), treonina (T) o asparagina (N) en la posición de aminoácido usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 19 usando el sistema de numeración de Kabat);

(vii) isoleucina (I), fenilalanina (F) o leucina (L) en la posición de aminoácido 21 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 20 usando el sistema de numeración de Kabat);

(viii) lisina (K) en la posición de aminoácido 45 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 38 usando el sistema de numeración de Kabat);

(ix) treonina (T), prolina (P), valina (V) o arginina (R) en la posición de aminoácido 47 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 40 usando el sistema de numeración de Kabat);

(x) lisina (K), histidina (H) o ácido glutámico (E) en la posición de aminoácido 50 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 43 usando el sistema de numeración de Kabat); (xi) isoleucina (I) en la posición de aminoácido 55 usando la numeración de AHo (posición de aminoácido 48 usando la numeración de Kabat);

(xii) lisina (K) en la posición de aminoácido 77 usando la numeración de AHo (posición de aminoácido 66 usando la numeración de Kabat);

(xiii) alanina (A), leucina (L) o isoleucina (I) en la posición de aminoácido 78 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 67 usando el sistema de numeración de Kabat);

(xiv) ácido glutámico (E), treonina (T) o alanina (A) en la posición de aminoácido 82 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 71 usando el sistema de numeración de Kabat);

(xv) treonina (T), serina (S) o leucina (L) en la posición de aminoácido 86 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 75 usando el sistema de numeración de Kabat);

(xvi) ácido aspártico (D), asparagina (N) o glicina (G) en la posición de aminoácido 87 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 76 usando el sistema de numeración de Kabat); y

(xvii) asparagina (N) o serina (S) en la posición de aminoácido 107 usando el sistema de numeración de AHo (posición de aminoácido 93 usando el sistema de numeración de Kabat);