Nuevos antiiflamatorios basados en polifenoles del olivo.

El objeto de la invención se centra en la síntesis por dos rutas alternativas del (3,

4-dihidroxifenil)glicol (6), producto natural presente en el olivo, y en la síntesis de (3,4-dihidroxifenil)diacilglicoles (12). Tanto (6) como (12) son útiles como antiinflamatorios no esteroideos. De igual manera, los alcanoatos de hidroxitirosilo y diversos tioderivados del hidroxitirsol poseen propiedades antiinflamatorias. Por último, el acetato de hidroxitirosilo reduce el daño provocado en el colon de ratones en un modelo de colitis aguda inducida por dextrano sulfato sódico (DSS).

Nuevos antiinflamatorios basados en polifenoles del olivo.

OBJETO DE LA INVENCIÓN

La presente invención, según se expresa en el enunciado de esta memoria descriptiva, se refiere a productos basados en polifenoles de! olivo que proporcionan aplicaciones con notables ventajas en base a sus propiedades antioxidantes y antiinflamatorias.

Esta invención es de aplicación en la Industria Alimentaria, Cosmética y Farmacéutica.

ANTECEDENTES EN EL ESTADO DE LA TÉCNICA

Atendiendo al estado de la técnica, no existen antecedentes de la síntesis del compuestro natura! 3,4-dihidroxifenilglicol, el cual ha sido aislado de! alperujo (J. Fernández-Bolaños Guzmán; G. Rodríguez Gutiérrez; A. Lama Muñoz; F. Senent Rubio; J. M. Fernández- Bolanos Guzmán; I. Maya Castilla; O. López López; A. Marset Castro, PCT Int. Appl. (2013), WO 2013007850 A1 20130117) o de aceitunas de mesa (G. Rodríguez; A. Lama; S. Jaramillo; J.M. Fuentes-Alventosa; R. Guillén; A. Jimenez-Araujo; R. Rodríguez-Arcos; J. Fernandez-Bolanos, J. Agr. Food Chem. 57, 2009,6298-6304). Tampoco existen antecedentes de derivados adiados de! 3,4-dihidroxifenilglicol.

Algunos polifenoles presentes en el olivo presentan propiedades antiinflamatorias que han sido descritas, bien como productos puros o como extractos. Así, el aceite de oliva virgen extra suplementado con hidroxitiroso) (HT) ejerce un papel beneficioso sobre la colitis crónica inducida por DSS gracias a su capacidad de reducir la expresión de proteínas inflamatorias como la óxido nítrico sintasa inducible (¡NOS) y la cic!ooxigensa-2 (COX-2) y modular la interleucina-10 (IL-10) y el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a) (S. Sánchez- Fidalgo, L. Sánchez de Ibargüen, A. Cárdeno, C. Alarcón de la Lastra, Eur. J. Nutr. 51, 2012, 497-506). El HT y la oleuropeína extraídos de hojas de olivo presentan actividades antiinflamatorias y analgésicas (E. Haloui; B. Marzouk; Z. Marzouk; A. Bouraoui; N. Fenina, J. Food Agr. Environ. 9, 2011, 128-133). Se ha demostrado que el HT es el

principal compuesto antiinflamatorio en extractos acuosos de aceitunas y que reduce la producción de citocinas y quimiocinas en macrófagos (N. Richard; S. Arnold; U. Hoeller; C. Kilpert; K. Wertz, Karin; J. Schwager, Planta Medica, 77, 2011, 1890-1897). Se ha demostrado la actividad antiinflamatoria del HT y la Inhibición de producción de citocinas en un modelo de neuroinflamación asociado al Parkinson (R. Crea; C. M. Bitle.; L. M. Bolin; P. Pontoniere, Agro Food Ind. Hi-Tec. 23, 2012, 26-29).

Se ha descrito que alquil éteres en la cadena lateral ejercen efectos antiinflamatorios superiores a los que presenta el HT (J. J. Reyes, J. P. De La Cruz, J. Muñoz-Maín, A Guerrero, J. A. López-Villodres, A. Madrona, J. L. Espartero, J. A. González-Correa, Eur. J. Nutr. 52, 2013, 591-599). También se han descrito las propiedades antiinflamatorias del oleocantal, un tirosil ester del dialdehído del ácido elenólico, p-HPEA-EDA (S. Cicerale; L. J. Lucas; R. S. J. Keast, (Ed.) D. Boskou, Olive Oil, 2012, 357-374; L. Lucas; S. Cicerale; R. Keast, Anti-lnflamm. Anti-Allergy Agents Med. Chem. 10, 2011, 399-406; M. Scotece; R. Gómez; J. Conde; V. López; J. Gómez-Reino; F. Lago; A. B Smith; O. Gualillo, Life Sci. 91, 2012, 1229-1235). También se ha demostrado la capacidad de fenoles del olivo, incluyendo HT, tirasol, y sus derivados secoiroideos, en la modulación de la producción de mediadores inflamatorios en monocitos humanos recién aislados de donadores sanos. (P. Rosignoli, R. Fuccelli, R. Fabiani, M. Servili, G. Morozzi, J. Nutr. Biochem. 24, 2013, 1513- 1519).

No existe ningún antecedente que describa las propiedades antiinflamatorias del3,4- dihídroxifenilglicol, ni de sus derivados adiados, ni de los alcanoatos de hidroxitirosilo. Tampoco existen datos sobre las propiedades antiinflamatorias de los tio derivados del HT.

Así, a luz de los antecedentes descritos, la invención "Nuevos antiinflamatorios basados en polifenoles del olivo" aporta notables ventajas en la prevención y tratamiento de enfermedades asociadas a procesos inflamatorios y autoinmunes como artritis reumatoide, osteoartritis, lupus eritematoso y enfermedad inflamatoria intestinal.

Asi mismo, dentro de la Industria Alimentaria puede ser útil para la formulación de alimentos funcionales o como aditivos para prevenir el deterioro del alimento mejorando

sus propiedades organolépticas o nutricionales. En la Industria Farmacéutica el uso de estos compuestos estaría encaminado a la obtención de nuevos fármacos antiinflamatorios o formulaciones que lo contengan, para su administración por vía oral, tópica o rectal. En la Industria Cosmética estos compuestos podrán utilizarse como componentes de cremas solares y antienvejecimiento por su capacidad de captación de radicales libres.

EXPLICACIÓN DE LA INVENCIÓN

A modo explicación de la invención "Nuevos antiinflamatorios basados en polifenoles del olivo", el mismo consiste en dos procedimientos para obtener 3,4-dihidroxifenilglicol 6.

Opción 1 Procedimiento de síntesis del 3,4-dihidroxifenilglicol a partir del HT

Se parte de HT 1, a la vista del Esquema 1 que se expondrá a continuación, y se protegen los hidroxilos fenólicos con grupos tales como grupos bencilos o un grupo o-xilileno par a dar 2. La halogenación de la cadena lateral de 2 por sustitución del hidroxilo alifático por halógeno y posterior deshidrohalogenación de 3 conduce al vinilcatecol O-protegido 4 que es dihidroxilado para dar 5, usando por ejemplo tetróxido de osmio. Por último la desprotección del fragmento de catecol conduce a 6.

Esquema 1.

Opción 2 Procedimiento de síntesis del 3,4-dihidroxifenilglicol a partir de cloruro de

3,4-dihidroxifenacilo.

El segundo procedimiento de preparación de 3,4-dihidroxifenilglicol 6 a la vista del

Esquema 2 que se expondrá a continuación parte de haluro de 3,4-dihidroxifenacilo 7 que se transforma en la triacetoxiacetofenona 8 siguiendo una modificación del procedimiento de H. Voswinckel, Ber. Dtsch. Chem. Ges.42, 1910, 4651-4654. La hidrogenación de 8 se puede llevar a cabo con distintos catalizadores tales como Pd/C, Pd(OH)2/C, Nickel 10 Raney, en disolventes como etanol, metanol, THF, conteniendo o no anhídrido acético. Se

forma en dichas condiciones mezclas de 9 y 10 que se convierten en 10 por acetilación convencional, con rendimiento de 10 del 80% calculado a partir de 8. También obtenemos 9 por reducción de 8 con hidruros de boro como el triacetoxiborohidruro, en presencia o en ausencia de tricloruro de cerio. La hidrólisis de 9, de 10 o de mezclas de 9 y 10 para dar 6 15 se lleva a cabo en medio acuoso y catálisis ácida o básica.

Esquema 2.

Procedimiento de síntesis de (3.4-dihidroxifenil)diac¡lalicoles

Consistente en la preparación de (3,4-dihidroxifenil)diacilglicoles 12 mediante el procedimiento descrito en el Esquema 3 que se expondrá a continuación. El intermedio clave es el glicol 5 al que se puede acceder desde el HT (Esquema 1), o por protección de 6, sintético o extraído de diversas fuentes naturales, con reactivos como haluro de bencilo

o dihaluro de o-xilileno. La acilación exhaustiva de 11 conduce a los diacil derivados 11 cuya desprotección conduce a 12.

HO.

OH

X.OH

HO'

PO.

PO'

O

o

O^R

HO

HO

V

o

Esquema 3.

Así mismo, la presente invención incluye las propiedades antiinflamatorias del 3,4- dihidroxifenilglicol presente en la pulpa de aceituna, en el aceite de oliva virgen extra y en alperujo. Es decir, la presente invención también remarca la actividad antiinflamatoria del 3,4-dihidroxifenilglicol (6), de los 4-(1,2-diaciloxietil)benceno-1,2-diol (12), de los alcanoatos de hidroxitirosilo (13), y de los tioderivados de HT 14-16 en macrófagos perifonéales de ratón estimulados con lipopolisacárido bacteriano (LPS) comparándolos con HT (1).

HO,

HO

S

HO

SH HO

HO'

HO'

,SS

.OH

OH

Es decir, se recalcan las propiedades antiinflamatorias de los derivados lipófilos del HT y del3,4-dihidroxifenilglicol, conteniendo grupos acilo en la cadena lateral. Gracias a la lipofilia aportada por los grupos acilo los nuevos antiinflamatorios puede ser añadidos a matrices lipídicas como por ejemplo aceites vegetales y de pescado, con lo que se obtendrían alimentos funcionales con propiedades antiinflamatorias potenciadas. Además, mostramos las propiedades anti-inflamatorias de... [Seguir leyendo]

2.

3.

Uso del compuesto 6 para la elaboración de formulación farmacéutica o composición alimentaria para la prevención y tratamiento de procesos inflamatorios.

Uso del compuesto de fórmula general 12 para la elaboración de formulación farmacéutica o composición alimentaria para la prevención y tratamiento de procesos inflamatorios.

Donde R es un grupo alquilo (^^23), un grupo alquenilo C2-C23, un grupo alcadienilo C4-C23, un grupo alcatrlenllo o alcapolienilo de hasta 23 carbonos.

Uso del compuesto de fórmula general 13 para la elaboración de formulación farmacéutica o composición alimentaria para la prevención y tratamiento de procesos inflamatorios.

Donde R es un grupo alquilo (CrC23), un grupo alquenilo C2-C23, un grupo alcadienilo C4-C23, un grupo alcatrienilo o alcapolienilo de hasta 23 carbonos.

4. Uso de los tioderivados del HT 14-16 para la elaboración de formulación farmacéutica o composición alimentaria para la prevención y tratamiento de procesos inflamatorios.

5. Uso de los compuestos reivindicados en 1 a 4 donde los procesos inflamatorios conducen o están originados por enfermedades inflamatorias, sistémicas, enfermedades cardiovasculares, enfermedades neurodegenerativas o cáncer.

6. Uso del compuesto según la reivindicación 5 donde la enfermedad inflamatoria sistémica es la artritis.

7. Uso de los compuestos según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde los procesos inflamatorios están relacionados con procesos infecciosos provocados por microorganismos.

8. Uso de los compuestos de las reivindicaciones 1 a 4 donde los procesos inflamatorios son enfermedades inflamatorias del tracto digestivo.

9. Uso de los compuestos de las reivindicaciones 1 a 4 donde las enfermedades inflamatorias son del intestino.

10. Uso de los compuestos de las reivindicaciones 1 a 4 donde las enfermedades inflamatorias del tracto digestivo se seleccionan de la lista que comprende el

síndrome del colon irritable, colitis indeterminada, colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn.

11. Compuesto de fórmula general 12.

Donde R es un grupo alquilo (Ci-C23), un grupo alquenilo C2-C23, un grupo alcadienilo C4-C23, un grupo alcatrienilo o alcapolienilo de hasta 23 carbonos.

12. Compuesto 4-{1,2-Dibutanoiloxietil)benceno-1,2-diol (12a).

13. Compuesto 4-(1,2-Dilauroiloxietil)benceno-1,2-diol (12b).

14. Compuesto 4-(1,2-Diacetoxietil)benceno-1,2-diol (12c)

16. Procedimientos de síntesis química de 6 según una de las dos opciones que se indican a continuación;

A partir de HT 1 a la vista del Esquema 1, mediante la protección de los hidroxilos fenólicos con grupos tales como grupos bencilos o un grupo o-xilileno par a dar 2. La halogenación de la cadena lateral de 2 por sustitución del hidroxilo alifático por halógeno y posterior deshidrohalogenación de 3 conduce al vinilcatecol O-protegido 4 que es dihidroxilado para dar 6, usando por ejemplo con tetróxido de osmio. Por último la desprotección del fragmento de catecol conduce a 6.

Opción 1 Procedimiento de síntesis del 3,4-dihidroxifenilglicol a partir del HT

Esquema 1.

Opción 2 Procedimiento de síntesis del 3,4-dihidroxifenilglicol a partir de cloruro de 3,4-dihidroxifenacilo

El segundo procedimiento de preparación de 3,4-dihidroxifenilglicol 6 a la vista del Esquema 2 parte de haluro de 3,4-dihidroxifenacilo 7 que se transforma en la triacetoxiacetofenona 8 siguiendo una modificación del procedimiento de H. Voswinckel, Ber. Dtsch. Chem. Ges. 42, 1910, 4651-4654. La hidrogenación de 8 se puede llevar a cabo con distintos catalizadores tales como Pd/C, Pd(OH)2/C, Nickel Raney, en disolventes como etanol, metanol, THF, conteniendo o no anhídrido acético. Se forma en dichas condiciones mezclas de 9 y 10 que se convierten en 10 por acetilación convencional, con rendimiento de 10 del 80% calculado a partir de 8. También obtenemos 9 por reducción de 8 con hidruros de boro como el triacetoxiborohidruro, en presencia o en ausencia de tricloruro de cerio. La hidrólisis de 9, de 10 o de mezclas de 9 y 10 para dar 6 se lleva a cabo en medio acuoso y catálisis ácida o básica.

Esquema 2.

17. Uso del compuesto según cualquiera de la reivindicación 1 a 4 para la elaboración de un medicamento.

18. Uso del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para la elaboración de una composición alimenticia.

19. Uso del compuesto según la reivindicación anterior donde la composición alimenticia se puede seleccionar de entre un alimento, complemento alimenticio, alimento funcional o nutracéutico.

20. Uso del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 como antioxidantes.

21. Uso del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 como antioxidantes alimentarios.

22. Composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto de fórmula 6, 12, 13, 14, 15 y 16 con un vehículo farmacéuticamente aceptable, con actividad antiinflamatoria.

23. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 que además comprende otro principio activo.