Compuestos y composiciones farmacéuticas para el tratamiento de infecciones víricas.

Un compuesto diastereoisoméricamente puro que tiene la fórmula**Fórmula**

o

o una de sus sales,

solvatos o hidratos farmacéuticamente aceptables.

Compuestos y composiciones farmacéuticas para el tratamiento de infecciones víricas Se proporcionan aquí compuestos y composiciones farmacéuticas, para uso en el tratamiento de infecciones víricas, incluyendo la infección del virus de la hepatitis C en un hospedante que lo necesite.

Virus de la familia Flaviviridae La familia Flaviviridae de virus comprende al menos tres géneros definidos: pestivirus, que causan enfermedad en el ganado vacuno y en los cerdos; flavivirus, que son la causa principal de enfermedades tales como la fiebre del dengue y la fiebre amarilla; y hepacivirus, cuyo único miembro es el virus de la hepatitis C (VHC) . El género flavivirus incluye más de 68 miembros separados en grupos en base a su parentesco serológico (Calisher et al., J. Gen. Virol, 1993, 70, 37-43) . Los síntomas clínicos varían e incluyen fiebre, encefalitis y fiebre hemorrágica (Fields Virology, Editors: Fields, B. N., Knipe, D. M., and Howley, P. M., Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia, PA, 1996, Chapter 31, 931-959) . Los flavivirus objeto de preocupación a escala mundial que se asocian con la enfermedad humana incluyen el virus de la fiebre hemorrágica del dengue (DHF) , el virus de la fiebre amarilla, el virus del síndrome de shock y el virus de la encefalitis japonesa (Halstead, S. B., Rev. Infect. Dis., 1984, 6, 251-264; Halstead, S. B., Science, 239:476-481, 1988; Monath, T. P., New Eng. J. Med., 1988, 319, 641-643) .

El género pestivirus incluye el virus de la diarrea vírica bovina (BVDV) , el virus de la fiebre porcina clásica (CSFV, denominado también virus del cólera porcino) y el virus de la enfermedad de la frontera (BDV) de las ovejas (Moennig, V. et al. Adv. Vir. Res. 1992, 41, 53-98) . Las infecciones por pestivirus de los animales domésticos (ganado, cerdos y ovejas) causan importantes pérdidas económicas en todo el mundo. El virus de la diarrea vírica bovina causa una enfermedad mucosal en el ganado y tiene una importancia económica significativa en la industria ganadera (Meyers, G. and Thiel, H. J., Advances in Virus Research, 1996, 47, 53-118; Moennig V., et al, Adv. Vir. Res. 1992, 41, 53-98) . Los pestivirus humanos no han sido caracterizados tan exhaustivamente como los pestivirus animales. Sin embargo, los análisis serológicos indican una considerable exposición a los pestivirus por parte de los humanos.

Los pestivirus y hepacivirus son grupos de virus estrechamente relacionados dentro de la familia Flaviviridae. Otros virus estrechamente relacionados en esta familia incluyen los virus GB A, agentes tipo virus GB A, virus GB B y virus GB C (también denominado virus de la hepatitis G, VHG) . El grupo de hepacivirus (virus de la hepatitis C; VHC) consiste en una serie de virus estrechamente relacionados pero distinguibles genotípicamente que infectan a los seres humanos. Hay aproximadamente 6 genotipos de VHC y más de 50 subtipos. Debido a las similitudes entre pestivirus y hepacivirus, combinadas con la escasa capacidad de los hepacivirus para crecer eficientemente en cultivo celular, a menudo se usa el virus de la diarrea vírica bovina (BVDV) como un sustituto para el estudio del virus VHC.

La organización genética de los pestivirus y hepacivirus es muy similar. Estos virus con ARN de cadena positiva tienen un único gran marco de lectura abierto (ORF) que codifica todas las proteínas víricas necesarias para la replicación del virus. Estas proteínas se expresan como una poliproteína que es procesada co-traducionalmente y post-traducionalmente tanto por las proteinasas celulares como por las proteinasas codificadas por el virus para obtener las proteínas víricas maduras. Las proteínas víricas responsables de la replicación del ARN del genoma vírico están localizadas hacia el carboxi terminal. Dos tercios del marco de lectura abierto se califican como proteínas no estructurales (NS) . La organización genética y el procesamiento de las poliproteínas de la porción de proteína no estructural del marco de lectura abierto para los pestivirus y hepacivirus son muy similares. Tanto para los pestivirus como para los hepacivirus, las proteínas no estructurales (NS) maduras, en orden secuencial desde el terminal amino de la región codificadora de la proteína no estructural hasta el terminal carboxi del marco de lectura abierto, consisten en p7, NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A, y NS5B.

Las proteínas no estructurales (NS) de pestivirus y hepacivirus comparten dominios de secuencia que son característicos de funciones específicas de la proteína. Por ejemplo, las proteínas NS3 de los virus de ambos grupos poseen motivos en la secuencia de aminoácidos característicos de serina proteinasas y de helicasas (Gorbalenya et al. (1988) Nature 333:22; Bazan and Fletterick (1989) Virology 171:637-639; Gorbalenya et al. (1989) Nucleic Acid Res. 17, 3889-3897) . Similarmente, las proteínas NS5B de pestivirus y hepacivirus tienen los motivos característicos de las ARN polimerasas dirigidas por ARN (Koonin, E.V. and Dolja, V.V. (1993) Crit. Rev. Biochem. Molec. Biol. 28:375-430) .

Los papeles y funciones reales de las proteínas NS de pestivirus y hepacivirus en el ciclo vital de los virus son directamente análogos. En ambos casos, la serina proteinasa NS3 es responsable de todos los procesos proteolíticos de los precursores poliproteicos aguas abajo de su posición en el marco de lectura abierto (ORF) (Wiskerchen and Collett (1991) Virology 184:341-350; Bartenschlager et al. (1993) J. Virol. 67:3835-3844; Eckart et al. (1993) Biochem. Biophys. Res. Comm. 192:399-406; Grakoui et al. (1993) J Virol. 67:2832-2843; Grakoui et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:10583-10587; Hijikata et al. (1993) J Virol. 67:4665-4675; Tome et al. (1993) J. Virol. 67:4017-4026) . La proteína NS4A, en ambos casos, actúa como un cofactor con la serina proteasa NS3 (Bartenschlager et al. (1994) J Virol. 68:5045-5055; Failla et al. (1994) J Virol. 68: 3753-3760; Lin et al. (1994)

68:8147-8157; Xu et al. (1997) J Virol. 71:5312-5322) . La proteína NS3 de ambos virus funciona también como una helicasa (Kim et al. (1995) Biochem. Biophys. Res. Comm. 215: 160-166; Jin and Peterson (1995) Arch. Biochem. Biophys., 323:47-53; Warrener and Collett (1995) J. Virol. 69:1720-1726) . Finalmente, las proteínas NS5B de pestivirus y hepacivirus han pronosticado la actividad de las ARN polimerasas dirigidas por ARN (Behrens et al. (1996) EMBO J. 15:12-22; Lehmann et al. (1997) J Virol. 71:8416-8428; Yuan et al. (1997) Biochem. Biophys. Res. Comm. 232:231-235; Hagedorn, PCT WO 97/12033; patentes de Estados Unidos números 5.981.247; 6.248.589 y

6.461.845 Zhong et al. (1998) J. Virol. 72, 9365-9369)

Virus de la hepatitis C

El virus de la hepatitis C (VHC) es la causa principal de la enfermedad hepática crónica en todo el mundo. (Boyer, N. et al. J Hepatol. 32:98-112, 2000) . El VHC causa un lento crecimiento de la infección vírica y es la principal causa de cirrosis y de carcinoma hepatocelular (Di Besceglie, A. M. and Bacon, B. R., Scientific American, Oct.: 80-85, (1999) ; Boyer, N. et al. J Hepatol. 32:98-112, 2000) . Un estimado de 170 millones de personas están infectadas con VHC en todo el mundo. (Boyer, N. et al. J Hepatol. 32:98-112, 2000) . La cirrosis causada por la infección de hepatitis C crónica es responsable de 8.000-12.000 muertes al año en Estados Unidos, y la infección de VHC es la principal indicación para el trasplante de hígado.

Se sabe que el VHC causa al menos el 80 % de las hepatitis post-transfusión y una proporción sustancial de hepatitis agudas esporádicas. Indicios preliminares implican también al VHC en muchos casos de hepatitis crónica "idiopática", cirrosis "criptogénica", y probablemente carcinoma hepatocelular no relacionados con otros virus de hepatitis, tales como el virus de la hepatitis B (VHB) . Una pequeña proporción de personas sanas parece que son portadores crónicos de VHC, variando con la geografía y otros factores epidemiológicos. Los números pueden exceder sustancialmente de los de VHB, aunque la información es todavía preliminar; no está claro cuántas de estas personas tienen enfermedad hepática crónica subclínica. (The Merck Manual, 18th ed., (2006) ) .

El VHC es un virus con envoltura que contiene un genoma de ARN monocatenario de sentido positivo de aproximadamente 9, 4 kb. El genoma vírico consiste en una región en 5' no traducida (UTR) , un marco de lectura abierto largo que codifica un precursor poliproteico de aproximadamente 3011 aminoácidos, y una UTR corta en 3'. La UTR en 5' es la parte más altamente conservada del genoma del VHC y es importante para la iniciación y el control de la traducción de poliproteínas. La traducción del genoma de VHC es iniciada por un mecanismo independiente de cap (proteína... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto diastereoisoméricamente puro que tiene la fórmula o una de sus sales, solvatos o hidratos farmacéuticamente aceptables.

2. Un compuesto purificado que tiene la fórmula

o una de sus sales, solvatos, hidratos, formas estereoisómeras o tautómeras farmacéuticamente aceptables, en donde R1 es hidroxilo, amino o bencilamino; y

R2 es de tal modo que cuando R1 es bencilamino, entonces R2 es distinto de 3. El compuesto purificado de la reivindicación 2, en donde el compuesto tiene la fórmula II:

o una de sus sales, solvatos, hidratos, formas estereoisómeras o tautómeras farmacéuticamente aceptables, en donde R2 es,

4. El compuesto purificado de la reivindicación 2, en donde el compuesto tiene la fórmula III:

o una de sus sales, solvatos, hidratos, formas estereoisómeras o tautómeras farmacéuticamente aceptables, en

donde R2 es,

5. El compuesto purificado de la reivindicación 2, en donde el compuesto tiene la fórmula IV:

o una de sus sales, solvatos, hidratos, formas estereoisómeras o tautómeras farmacéuticamente aceptables, en donde R2 es 6. El compuesto purificado de la reivindicación 2, en donde el compuesto tiene la fórmula V:

o una de sus sales, solvatos, hidratos, formas estereoisómeras o tautómeras farmacéuticamente aceptables, en donde R1 es hidroxilo o amino.

7. El compuesto purificado de la reivindicación 2, en donde el compuesto se selecciona de:

8. El compuesto purificado de la reivindicación 2, en donde el compuesto se selecciona de:

y

9. Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-8 y un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

10. La composición farmacéutica de la reivindicación 9, en donde la composición es una formulación oral.

11. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-8, para uso en un método para el tratamiento de un hospedante infectado con un virus de la familia Flaviviridae.

12. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-8, para uso en el método de la reivindicación 11, en donde el virus es el virus de la hepatitis C, y/o en donde el hospedante es un ser humano.

13. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-8, para uso en el método de la reivindicación 11, en donde el método comprende además administrar un segundo agente antiviral seleccionado del grupo que consiste en un interferón, una ribavirina, una interleucina, un inhibidor de la proteasa NS3, un inhibidor de la cisteína proteasa, una fenantrenoquinona, un derivado de tiazolidina, una tiazolidina, una benzanilida, un inhibidor de helicasa, un inhibidor de polimerasa, un análogo de nucleótido, una gliotoxina, una cerulenina, un oligodesoxinucleótido antisentido con fosforotioato, un inhibidor de la traducción dependiente del IRES, y una ribozima;

en donde el segundo agente se selecciona del grupo que consiste en interferón alfa 2a pegilado, interferón alfacon1, interferón natural, albuferón, interferón beta-1a, interferón omega, interferón alfa, interferón gamma, interferón tau, interferón delta e interferón γ-1b; o

en donde el segundo agente es opcionalmente ribavirina.

14. Un método para preparar el compuesto purificado de cualquiera de las reivindicaciones 2-8, que comprende:

(a) poner en contacto un compuesto I precursor que tiene la fórmula:

con composiciones de hepatocitos o microsomas hepáticos para dar una mezcla; y

(b) aislar el compuesto de la mezcla;

en donde el aislamiento comprende opcionalmente eluir el compuesto de una columna de fase inversa que contiene un medio.

FIG. 1

FIG. 2

FIG. 3

FIG. 4

FIG. 5

FIG. 6