Productos de combinación para tratar el cáncer.

Productos que contienen:

(i) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína del receptor de somatostatina 2 humana(sst2) que presenta la secuencia SEC ID nº:

1, o una secuencia que presenta un porcentaje de identidad de almenos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:1,

(ii) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína desoxicitidina cinasa (dck) humana quepresenta la secuencia SEC ID nº:2, o una secuencia que presenta un porcentaje de identidad de al menos80% con la secuencia completa SEC ID nº:2,

(iii) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína uridina monofosfato cinasa (umk) humanaque presenta la secuencia SEC ID nº:3, o una secuencia que presenta un porcentaje de identidad de almenos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:3, y

(iv) gemcitabina,

como una preparación combinada para la utilización simultánea, separada o secuencial en el tratamiento de cánceren un sujeto.

Productos de combinación para tratar el cáncer.

Campo de la invención La invención se refiere al campo del cáncer, y en particular a nuevos productos, composiciones, vectores plasmídicos y métodos para la terapia contra el cáncer.

Antecedentes de la invención Entre el cáncer, el cáncer pancreático es una de las neoplasias humanas más agresivas y devastadoras. Su agresividad se ilustra por el hecho de que el número de casos de cáncer pancreático estimados y el número de muertes relacionadas con cáncer pancreático son casi idénticos, con una tasa de supervivencia mínima de 5 años del 2%. El cáncer pancreático se encuentra en la quinta causa principal de muertes relacionadas con cáncer en los países occidentales. Hasta ahora, no es posible ni la detección temprana ni el tratamiento de la enfermedad avanzada: el 85% de las lesiones no son extirpables en el momento del diagnóstico, dando como resultado un tiempo de supervivencia medio de 4-5 meses.

Estas sombrías estadísticas son consistentes principalmente con la propensión de estos tumores a metastatizarse cuando son pequeños e indetectables, y a la resistencia intrínseca de las células de cáncer pancreático a agentes citotóxicos y a radioterapia.

Como otro cáncer agresivo, el carcinoma hepatocelular (hepatocarcinoma HCC) es la neoplasia primaria más habitual del hígado y el cuarto cáncer más habitual a nivel mundial, con una incidencia de 1.000.000 nuevos casos por año. Representa la 3ª causa de muerte por cáncer en el mundo. En Francia, como en otros países industrializados, su incidencia está aumentando de manera constante debido a la pandemia del virus de la hepatitis C. HCC se desarrolla a partir de cirrosis. La probabilidad de 5 años para que los pacientes cirróticos desarrollen HCC es casi 20%. Las tres modalidades terapéuticas curativas principales usadas actualmente para HCC es la estirpación hepática, la destrucción percutánea del tumor (radiofrecuencia) y el transplante hepático ortotópico. Estas opciones se pueden usar en pacientes con el denominado HCC «pequeño» (< 5 cm) , con buenos resultados (70% de supervivencia durante 5 años y < 25% de tasa de recurrencia para el transplante) . Desafortunadamente, tales opciones terapéuticas son sólo accesibles a menos del 50% de los pacientes diagnosticados con HCC. Por lo tanto, el grueso de los pacientes no se puede beneficiar de opciones terapéuticas curativas debido al gran tamaño tumoral o a la enfermedad hepática subyacente. Por estas razones, se necesitan nuevas modalidades de diagnóstico y terapias. Hasta ahora, ninguna quimioterapia es eficaz, y de este modo está indicada en HCC.

En consecuencia, existe una necesidad urgente de terapias para tratar cáncer, como cáncer pancreático o cáncer hepatocelular, y específicamente cáncer metastásico, que sean más eficaces que los regímenes actuales.

Sumario de la invención En un primer aspecto, la presente invención se refiere a productos que contienen:

(i) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína del receptor de somatostatina 2 humana (SST2) que presenta la secuencia SEC ID nº:1, o una secuencia que tiene un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:1, preferentemente de al menos 90%, como ejemplo de al menos 95%, y más preferentemente de al menos 99%,

(ii) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína desoxicitidina cinasa (DCK) humana que presenta la secuencia SEC ID nº:2, o una secuencia que tiene un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:2, preferentemente de al menos 90%, como ejemplo de al menos 95%, y más preferentemente de al menos 99%,

(iii) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína uridina monofosfato cinasa (UMK) humana que presenta la secuencia SEC ID nº:3, o una secuencia que tiene un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:3, preferentemente de al menos 90%, como ejemplo de al menos 95%, y más preferentemente de al menos 99%,

(iv) gemcitabina,

como una preparación combinada para el uso simultáneo, separado o secuencial en el tratamiento de cáncer en un sujeto.

En un segundo aspecto, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende:

(i) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína del receptor de somatostatina 2 humana (SST2) que presenta la secuencia SEC ID nº:1, o una secuencia que tiene un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:1, preferentemente de al menos 90%, como ejemplo de al menos 95%, y más preferentemente de al menos 99%,

(ii) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína desoxicitidina cinasa (DCK) humana que presenta la secuencia SEC ID nº:2, o una secuencia que tiene un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:2, preferentemente de al menos 90%, como ejemplo de al menos 95%, y más preferentemente de al menos 99%,

(iii) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína uridina monofosfato cinasa (UMK) humana que presenta la secuencia SEC ID nº:3, o una secuencia que tiene un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:3, preferentemente de al menos 90%, como ejemplo de al menos 99%,

(iv) opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable.

En un tercer aspecto, la presente invención se refiere finalmente a un vector plasmídico que presenta la secuencia SEC ID nº:11, y que comprende secuencias de ácido nucleico que codifican la proteína del receptor de somatostatina 2 de Homo sapiens y un polipéptido que comprende las dos proteínas, proteína desoxicitidina cinasa (dck) de Homo sapiens y proteína uridina monofosfato cinasa (umk) de Homo sapiens, enlazadas mediante el péptido FMDV (virus de la glosopeda) 2A escindible.

Breve descripción de los dibujos La figura 1 muestra el mapa esquemático del plásmido pHNeo Sst2 DCK::UMK (7548 pb) (SEC ID nº: 11) .

La figura 2 muestra el mapa esquemático del vector plasmídico pHDuol4 LGFP-dckumk2A (7368 pb) .

Descripción de las formas de realización preferidas En el sentido de la presente solicitud, el cáncer es preferentemente un cáncer metastásico, como el cáncer pancreático y el carcinoma hepatocelular, y muy preferentemente un cáncer pancreático exocrino.

La metástasis corresponde al proceso mediante el cual un cáncer se extiende desde el lugar en el que surge en primer lugar como tumor primario hacia localizaciones distantes en el cuerpo. Puesto que este proceso es muy particular en la progresión del cáncer, generalmente es necesario usar un régimen específico a fin de inhibir la metástasis.

Se ha establecido que la inyección intratumoral combinada de un vector de expresión que codifica SST2, DCK y UMK, asociada con la administración de gemcitabina da como resultado una disminución amplia y sorprendente de los sitios de metástasis.

En consecuencia, y en una forma de realización preferida, la presente invención se refiere a la inhibición de la extensión de tumores, es decir, la inhibición de la metástasis tumoral.

El término sujeto se refiere a un mamífero, y preferentemente a un ser humano.

Como se usa en la presente memoria, gemcitabina se refiere a gemcitabina HCl/clorhidrato, comercializado por ELI LILLY con la marca GEMZAR®, que es un análogo nucleosídico que muestra actividad antitumoral y pertenece a un grupo general de fármacos quimioterapéuticos conocidos como antimetabolitos. La gemcitabina evita que las células produzcan ADN y ARN interfiriendo con la síntesis de ácidos nucleicos, deteniendo de este modo el crecimiento de células cancerosas y haciendo que mueran.

La gemcitabina, que se describe en la solicitud PCT Internacional WO 97/21719, es un análogo glucosídico sintético de citosina, que se describe químicamente como hidrocloruro de 1- (2’-desoxi-2’, 2’-difluoro-[beta]-D-ribofuranosil) -4aminopirimidin-2-ona o isómero [beta] del monohidrocloruro de 2’-desoxi-2’, 2’-difluorocitidina.

Como se usa aquí, “porcentaje de identidad” entre dos secuencias de aminoácidos significa el porcentaje de aminoácidos idénticos, entre las dos secuencias a comparar, obtenido con el mejor alineamiento de dichas secuencias, siendo este porcentaje puramente estadístico, y estando las diferencias entre estas dos secuencias extendidas al azar a lo largo de las secuencias de aminoácidos. Como se usa aquí, “mejor alineamiento” o “alineamiento óptimo” significa... [Seguir leyendo]

1. Productos que contienen:

(i) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína del receptor de somatostatina 2 humana (sst2) que presenta la secuencia SEC ID nº:1, o una secuencia que presenta un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:1,

(ii) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína desoxicitidina cinasa (dck) humana que presenta la secuencia SEC ID nº:2, o una secuencia que presenta un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:2,

(iii) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína uridina monofosfato cinasa (umk) humana que presenta la secuencia SEC ID nº:3, o una secuencia que presenta un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:3, y

(iv) gemcitabina,

como una preparación combinada para la utilización simultánea, separada o secuencial en el tratamiento de cáncer en un sujeto.

2. Productos para la utilización según la reivindicación 1, en los que dichos productos se dirigen a la inhibición de la metástasis tumoral.

3. Productos para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en los que dichos productos son útiles para tratar el cáncer pancreático.

4. Productos para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en los que dichos productos son útiles para tratar el carcinoma hepatocelular.

5. Productos para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en los que dicho sujeto es un ser humano.

6. Productos para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en los que dichos productos comprenden al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica simultáneamente la proteína desoxicitidina cinasa (dck) humana que presenta la secuencia SEC ID nº:2, o una secuencia que presenta un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:2, y la proteína uridina monofosfato cinasa (umk) humana que presenta la secuencia SEC ID nº:3, o una secuencia que presenta un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:3.

7. Productos para la utilización según la reivindicación 6, en los que dichos productos comprenden al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica un polipéptido que comprende las dos proteínas proteína desoxicitidina cinasa (dck) de Homo sapiens y proteína uridina monofosfato cinasa (umk) de Homo sapiens, enlazadas mediante el péptido FMDV (virus de la glosopeda) 2A escindible, presentando dicho polipéptido la secuencia SEC ID nº: 10.

8. Productos para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en los que dichas secuencias de ácidos nucleicos están comprendidas en al menos un vector, preferentemente un vector plasmídico.

9. Productos para la utilización según la reivindicación 8, en los que dicho vector plasmídico presenta la secuencia SEC ID nº: 11, y comprende unas secuencias de ácidos nucleicos que codifican la proteína del receptor de somatostatina 2 de Homo sapiens y un polipéptido que comprende las dos proteínas proteína desoxicitidina cinasa (dck) de Homo sapiens y proteína uridina monofosfato cinasa (umk) de Homo sapiens enlazadas mediante el péptido FMDV (virus de la glosopeda) 2A escindible.

10. Productos para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 8 o 9, en los que dichos vector o vectores plasmídicos están asociados con polímeros catiónicos no lipídicos, preferentemente con polietilenimina (PEI) .

11. Composición farmacéutica que comprende:

(i) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína del receptor de somatostatina 2 humana (SST2) que presenta la secuencia SEC ID nº:1, o una secuencia que presenta un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:1,

(ii) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína desoxicitidina cinasa (DCK) humana que presenta la secuencia SEC ID nº:2, o una secuencia que tiene un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:2,

(iii) al menos una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína uridina monofosfato cinasa (UMK) humana que presenta la secuencia SEC ID nº:3, o una secuencia que tiene un porcentaje de identidad de al menos 80% con la secuencia completa SEC ID nº:3, y

(iv) opcionalmente, un vehículo farmacéuticamente aceptable.

12. Composición farmacéutica según la reivindicación 11, en la que dichas secuencias de ácidos nucleicos están comprendidas en el interior de un vector plasmídico que presenta la secuencia SEC ID nº: 11, y que comprende unas secuencias de ácidos nucleicos que codifican la proteína del receptor de somatostatina 2 de Homo sapiens y un polipéptido que comprende las dos proteínas proteína desoxicitidina cinasa (dck) de Homo sapiens y proteína uridina monofosfato cinasa (umk) de Homo sapiens enlazadas mediante el péptido FMDV (virus de la glosopeda) 2A escindible.

13. Composición farmacéutica según la reivindicación 12, en la que dicho vector plasmídico está asociado con la polietilenimina (PEI) .

14. Vector plasmídico que presenta la secuencia SEC ID nº: 11, y que comprende unas secuencias de ácidos nucleicos que codifican la proteína del receptor de somatostatina 2 de Homo sapiens y un polipéptido que comprende las dos proteínas proteína desoxicitidina cinasa (dck) de Homo sapiens y proteína uridina monofosfato cinasa (umk) de Homo sapiens enlazadas mediante el péptido FMDV (virus de la glosopeda) 2A escindible.

15. Productos para la utilización según la reivindicación 3, en los que dicha gemcitabina se administrará a una dosis igual o inferior a 750 mg/m2 por día. 25