Procedimiento para la purificación de mogrósidos de alta pureza.

Procedimiento para la preparación de una mezcla de mogrósidos muy purificados a partir de la mezcla demogrósidos de baja pureza,

comprendiendo dicho procedimiento las etapas siguientes:

a. proporcionar una mezcla de mogrósidos de baja pureza;

b. disolver la mezcla de mogrósidos de baja pureza en agua o en una solución acuosa de alcohol para formaruna solución inicial de mogrósidos;

c. pasar la solución inicial a través de un sistema de columnas, en el que el sistema de columnas comprende unapluralidad de columnas, y cada columna está rellena con un adsorbente que presenta diferentes afinidades a lasimpurezas y los mogrósidos de manera que una o más columnas retienen más mogrósidos que las otrascolumnas;

d. lavar las columnas para eliminar las impurezas con una solución acuosa ácida, una solución acuosa básica yuna solución acuosa alcohólica sucesivamente;

e. eluir las columnas con una solución acuosa alcohólica que contiene un contenido de alcohol mayor que lasolución acuosa alcohólica utilizada en la etapa de lavado, en el que el eluido de las columnas con alto contenidode mogrósidos se combinan; y

f. secar el eluido combinado para obtener mogrósidos de alta pureza siendo el contenido de los mogrósidos totalsuperior a 70% (p/p).

Procedimiento para la purificación de mogrósidos de alta pureza Campo de la invención La invención se refiere a un procedimiento para la purificación de mogrósidos de alta pureza a partir del extracto de la fruta Siraitia grosvenorii, especialmente de mezclas de mogrósidos de alta pureza mogrósidos con alto contenido en mogrósido V.

Descripción de la técnica relacionada Luo han guo generalmente hace referencia a una fruta de Siraitia grosvenorii, un miembro de la familia de las cucurbitáceas, es una planta originaria de algunas regiones del sur de Asia y China. El sabor dulce de luo han guo proviene principalmente de glucósidos de triterpenos conocidos generalmente como mogrósidos o glucósidos de mogrol. Los mogrósidos comprenden sólo aproximadamente 1% de la fruta luo han guo. Existen numerosos mogrósidos identificados en luo han guo, pero en general el mogrósido V (CAS nº: 88901-36-4) presenta la concentración más alta en comparación con los demás (Tabla 1) . Los glucósidos de mogrol tienen la misma molécula principal - mogrol u oxo-mogrol y se diferencian entre sí por el número y tipo de restos glucosídicos unidos a moléculas de mogrol u oxo-mogrol.

TABLA 1. Mogrósidos presentes en frutas Luo han guo Sustancia Fórmula mol. Peso mol.

Mogrósido IIE C42H72O14 801, 01

Mogrósido III C48H82O19 963, 15

Mogrósido IV C54H92O24 1125, 29

Mogrósido V C60H102O29 1287, 43

Mogrósido VI C66H112O34 1449, 58

11-oxo-Mogrósido V C60H100O29 1285, 42

Siamenósido I C54H92O24 1125, 29

Grosmomósido I C54H92O24 1125, 29

Para aislar los mogrósidos de la frutas luo han guo se utilizan diversas técnicas de extracción. Como resultado se están preparando extractos en polvo de luo han guo que normalmente contienen 30-65% p/p de mogrósidos totales, y el contenido en mogrósido V de esos materiales puede oscilar tanto como entre 18 y 55%. Dichos extractos generalmente no se pueden utilizar como edulcorantes en alimentos y bebidas, ya que contienen cantidad sustancial de impurezas; algunas de las impurezas poseen propiedades organolépticas indeseables, afectando por lo tanto las características de color, aroma, olor y sabor del extracto de luo han guo.

El documento WO-A-2007/062087 da a conocer un procedimiento de preparación de extracto de frutas integral de los frutos de la familia de las cucurbitáceas. El documento WO-A-2008/030121 se refiere a composiciones edulcorantes del fruto Luo Han Guo. El documento WO-A-2009/023975 da a conocer el edulcorante y potenciador de dulzor iso-migrósido V. El documento CN-A-101 407 535 da a conocer el preparado de mogrósido V de alta pureza Momordica grosvenorii. El documento CN-A-101 029 071 da a conocer un procedimiento de preparación de un mogrósido V de alta pureza. El documento CN-A-101 050 230 da a conocer un procedimiento para la preparación de un extracto de Siraitia grosvenorii.

Los ejemplos no limitativos de dichas impurezas comprenden proteínas, pigmentos, polisacáridos, aldehídos, aldehídos insaturados, cetonas de metilo, crotonato de butilo y compuestos fenólicos.

Por lo tanto existe una necesidad de un proceso comercialmente viable para mejorar el contenido de mogrósidos, particularmente el contenido de mogrósido V de los preparados de luo han guo de baja pureza y eliminar las impurezas no deseadas a fin de mejorar significativamente las características organolépticas de los preparados de luo han guo y así permitir su utilización en los alimentos.

No se dispone actualmente de técnicas para la purificación del extracto de luo han guo de baja pureza en mogrósidos de alta pureza. Por lo tanto, existe una necesidad de un proceso para la purificación de mogrósidos de alta pureza a partir de extracto del fruto de Siraitia grosvenorii.

Sumario de la invención La invención se refiere a un procedimiento para la preparación de mezclas de alta pureza de mogrósidos de extracto de la fruta Siraitia grosvenorii.

En una forma de realización, el procedimiento para la preparación de la mezcla de mogrósidos muy purificada a partir de una mezcla de mogrósidos de baja pureza comprende:

a. proporcionar una mezcla de mogrósidos de baja pureza;

b. disolver la mezcla de mogrósidos de baja pureza en agua o en una solución acuosa de alcohol para formar una solución inicial de mogrósidos;

c. pasar la solución inicial a través de un sistema de columna, en el que el sistema de la columna comprende un gran número de columnas, y cada columna está rellena de un adsorbente que tiene diferentes afinidades a las impurezas y mogrósidos de manera que una o más columnas retienen más mogrósidos que otras columnas;

d. lavar las columnas para eliminar las impurezas con una solución acuosa ácida, una solución acuosa básica y una solución acuosa alcohólica sucesivamente;

e. eluir las columnas con una solución acuosa alcohólica que contiene mayor contenido de alcohol que la solución acuosa alcohólica utilizada en la etapa de lavado, en la que se combinan los eluidos de las columnas con alto contenido de mogrósidos; y

f. secar el eluido combinado para obtener mogrósidos de alta pureza siendo el contenido de los mogrósidos totales más del 70% (p/p) .

En otra forma de realización del procedimiento, en la etapa de lavado (d) , la proporción de agua a alcohol (vol/vol) en la solución acuosa alcohólica es 99, 9:0, 1 a 60:40, y en la que en la etapa de elución (e) , la proporción de agua a alcohol (vol/vol) de la solución acuosa alcohólica es de 60:40 a 0, 1:99, 9.

En otra forma de realización del procedimiento, en la etapa de lavado (d) , la solución acuosa ácida comprende HCl y la solución acuosa básica comprende NaOH.

En otra forma de realización del procedimiento, la solución acuosa alcohólica comprende alcohol que se selecciona de entre el grupo que consiste en metanol, etanol, n-propanol, 2-propanol, 1-butanol y 2-butanol.

En otra forma de realización del procedimiento, el adsorbente es una resina de adsorción polimérica macroporosa capaz de adsorber mogrósidos.

En otra forma de realización del procedimiento, la pluralidad de columnas están conectadas consecutivamente.

En otra forma de realización del procedimiento, la pluralidad de columnas están conectadas en paralelo.

En otra forma de realización del procedimiento, éste comprende además:

g. disolver los mogrósidos de alta pureza en agua o en una solución acuosa alcohólica para producir una solución de mogrósidos;

h. pasar las soluciones de mogrósidos a través de una secuencia de membranas de ultrafiltración y/o nanofiltración con un tamaño de MWCO de 1.000 a 2.500 para aumentar la pureza de la mezcla de mogrósidos (contenido de mogrósidos totales, % en seco) ; e

i. secar la solución de la mezcla de mogrósidos obtenida para obtener la mezcla mogrósidos muy purificada.

Un objetivo de la invención es para desarrollar un procedimiento eficiente de preparación de mezcla de mogrósidos muy purificados.

Descripción detallada de la invención Las ventajas de la presente invención resultarán más evidentes a partir de la descripción detallada proporcionada a continuación. Sin embargo, debe apreciarse que la descripción detallada y los ejemplos específicos, aunque indican formas de realización preferidas de la invención, son proporcionados únicamente a título ilustrativo, ya que diversos cambios y modificaciones comprendidos en el espíritu y el alcance de la invención resultarán evidentes para los expertos en la materia a partir de esta descripción detallada.

La presente invención proporciona un procedimiento para la purificación de mogrósidos de alta pureza con alto contenido en mogrósido V a partir del extracto de la fruta Siraitia grosvenorii.

En adelante, el término "mogrósidos" se refiere a mogrol y glucósidos de oxo-mogrol , entre ellos mogrósido IIE, mogrósido IIB, mogrósido III, mogrósido IV, mogrósido V, 11-oxo-mogrósido V, mogrósido VI, siamenósido I y grosmomósido I.

En adelante, la expresión "contenido de TM" se refiere al contenido total de mogrósidos, y se calcula como la suma de 4 mogrósidos entre ellos mogrósido V, 11-oxo-mogrósido V, Siamenósido I y Grosmomósido I.

En adelante, la expresión "muy purificado" o "alta pureza" se refiera al contenido de TM de por lo menos 70% (p/p) en seco.

En adelante, la expresión "contenido alto en mogrósido V" se refiere al contenido en mogrósido V de por lo menos el 60% (p/p) en seco.

En adelante, la expresión "baja pureza" se refiere al contenido de TM inferior al 70% (p/p) en seco.

En adelante, la expresión "bajo... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento para la preparación de una mezcla de mogrósidos muy purificados a partir de la mezcla de mogrósidos de baja pureza, comprendiendo dicho procedimiento las etapas siguientes: 5

a. proporcionar una mezcla de mogrósidos de baja pureza;

b. disolver la mezcla de mogrósidos de baja pureza en agua o en una solución acuosa de alcohol para formar

una solución inicial de mogrósidos; 10

c. pasar la solución inicial a través de un sistema de columnas, en el que el sistema de columnas comprende una pluralidad de columnas, y cada columna está rellena con un adsorbente que presenta diferentes afinidades a las impurezas y los mogrósidos de manera que una o más columnas retienen más mogrósidos que las otras columnas;

d. lavar las columnas para eliminar las impurezas con una solución acuosa ácida, una solución acuosa básica y una solución acuosa alcohólica sucesivamente;

e. eluir las columnas con una solución acuosa alcohólica que contiene un contenido de alcohol mayor que la

solución acuosa alcohólica utilizada en la etapa de lavado, en el que el eluido de las columnas con alto contenido de mogrósidos se combinan; y

f. secar el eluido combinado para obtener mogrósidos de alta pureza siendo el contenido de los mogrósidos total

superior a 70% (p/p) . 25

2. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la etapa de lavado (d) , la proporción de agua a alcohol (vol/vol) en la solución acuosa alcohólica es 99, 9:0, 1 a 60:40, y en el que en la etapa de elución (e) , la proporción de agua a alcohol (vol/vol) de la solución acuosa alcohólica es de 60:40 a 0, 1:99, 9.

3. Procedimiento según la reivindicación 1 o 2, en el que en la etapa de lavado (d) , la solución acuosa ácida comprende HCl, y la solución acuosa básica comprende NaOH.

4. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la solución acuosa alcohólica comprende alcohol que se selecciona de entre el grupo que consiste en metanol, etanol, n-propanol, 2-propanol, 135 butanol y 2-butanol.

5. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el adsorbente es una resina de adsorción polimérica macroporosa que puede adsorber mogrósidos.

6. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la pluralidad de columnas están conectadas consecutivamente.

7. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que la pluralidad de columnas están conectadas en paralelo. 45

8. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende además las etapas siguientes:

g. disolver los mogrósidos de alta pureza en agua o en una solución acuosa alcohólica para producir una 50 solución de mogrósidos;

h. pasar las soluciones de mogrósidos a través de una secuencia de membranas de ultrafiltración y/o nanofiltración con un tamaño de MWCO de 1.000 a 2.500 para aumentar la pureza de la mezcla de mogrósidos (contenido de mogrósidos total, % en seco) ; e i. secar la solución de la mezcla de mogrósidos obtenida para obtener la mezcla de mogrósidos muy purificada.