Sal de ácido p-toluensulfónico de 5-amino-3-(2''-O-acetil-3''-desoxi-beta-D-ribofuranosil)-3H-tiazolo[4,5-d]pirimidin-2-ona y procedimientos e preparación.

Un compuesto cristalino de fórmula (1) **Fórmula**

Sal de ácido p-toluensulfónico de 5-amino-3- (2’-O-acetil-3’-desoxi-beta-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona y procedimientos de preparación

CAMPO DE LA DIVULGACIÓN

La presente divulgación se refiere a la sal de ácido p-toluensulfónico de 5-amino-3- (2’-O-acetil-3’-desoxi-beta-Dribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona y a su uso en el tratamiento de afecciones tales como infecciones víricas, tumores y cáncer. Se dan a conocer también un procedimiento para preparar la sal de ácido p-toluensulfónico de 5amino-3- (2’-O-acetil-3’-desoxi-β-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona y procedimientos para producir compuestos de furanosa que son intermedios útiles en la preparación de compuestos farmacéuticos tales como la sal de ácido p-toluensulfónico d e 5-amino-3- (2’-O-acetil-3’-desoxi-β-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona y similares.

ANTECEDENTES DE LA DIVULGACIÓN

Los análogos de nucleósidos son una clase importante de compuestos que son útiles en el tratamiento de enfermedades. Por ejemplo, los análogos de nucleósidos se han usado en el tratamiento de cánceres e infecciones víricas. Después de entrar en una célula, los análogos de nucleósidos frecuentemente se fosforilan mediante rutas nativas de nucleósidos en que los análogos se fosforilan a los correspondientes mono-, di-y trifosfatos. Entre otros destinos intracelulares, los análogos de nucleósidos trifosforilados a menudo sirven como sustratos para ADN o ARN polimerasas y se incorporan al ADN y/o ARN. Cuando los análogos de nucleósidos trifosforilados son inhibidores fuertes de polimerasa, pueden inducir la terminación prematura de la molécula de ácido nucleico naciente. Cuando los análogos de nucleósidos trifosforilados se incorporan a replicaciones o transcripciones de ácido nucleico, pueden dar como resultado la expresión génica o la perturbación de la función.

Algunos análogos de nucleósidos pueden ser eficaces debido a su capacidad de inhibir la adenosina cinasa. La adenosina cinasa cataliza la fosforilación de adenosina a 5’-monofosfato de adenosina (AMP) . La inhibición de la adenosina cinasa puede aumentar eficazmente el nivel extracelular de adenosina en seres humanos y servir así como tratamiento de afecciones isquémicas tales como apoplejía, inflamación, artritis, convulsiones y epilepsia.

En las últimas décadas, se han observado esfuerzos significativos dedicados a explorar los usos terapéuticos de los análogos de nucleósidos. Por ejemplo, se dan a conocer ciertos nucleósidos de pirimido[4, 5-d]pirimidina en la patente de EE.UU. nº 5.041.542 de Robins et al. por ser eficaces en el tratamiento contra L1210 en ratones BDF1. Adicionalmente, se dan a conocer 3-β-D-ribofuranosiltiazolo[4, 5-d]pirimidinas que demuestran una inmunoactividad significativa, que incluye proliferación de células de bazo murinas y actividad in vivo contra el virus del bosque Semliki, en las patentes de EE.UU. nº 5.041.426 y 4.880.784 de Robins et al. Una serie de publicaciones han descrito también derivados no glucosilados del resto tiazolo[4, 5-d]pirimidina. Véanse, por ejemplo, las patentes de EE.UU. nº 5.994.321 y 5.446.045; Revankar et aI., J. HET. CHEM., 30, 1341-49 (1993) ; Lewis et aI., J. HET. CHEM., 32, 547-56 (1995) .

Se ha mostrado que los compuestos de 3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona 3, 5-disustituidos tienen actividad inmunomoduladora. La preparación y utilidad de esta clase de compuestos se discute en la publicación de solicitud de EE.UU. nº US2006/0160830 (solicitud de EE.UU. nº 11/304.691) , que se incorpora a la presente memoria como referencia en su totalidad. Esta solicitud describe la síntesis del compuesto base libre de 5-amino-3- (2'-O-acetil-3'desoxi-beta-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona. La pureza de este compuesto puede variar basándose en los procedimientos de purificación debido a la naturaleza amoría de la base libre. La purificación adecuada de la base libre puede estar limitada por el uso de ciertos disolventes que no son aceptables para consumo humano. Además, la forma amoría (base libre) de este compuesto tiende a ser higroscópica, lo que hace al compuesto susceptible de hidrólisis. Por consiguiente, es deseable para aplicaciones farmacéuticas un procedimiento para producir una forma cristalina de este compuesto con alta pureza y estabilidad que tenga bajas cantidades de disolvente no tóxico.

SUMARIO DE LA DIVULGACIÓN

La divulgación está dirigida a la forma cristalina de sal de ácido p-toluensulfónico de 5-amino-3- (2’-O-acetil-3’-desoxibeta-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona, mostrada a continuación en la fórmula (1) , y a composiciones farmacéuticas que comprenden la sal.

El compuesto de fórmula 1 se usa para tratar o prevenir enfermedades. Por ejemplo, se usa un compuesto de fórmula 1 para tratar o prevenir el inicio y/o la progresión de tumores o cánceres o para tratar o prevenir una infección por virus que incluyen virus de la hepatitis B o virus de la hepatitis C. El compuesto de fórmula 1 se usa también para modular la actividad de citocinas inmunitarias.

En otra realización, la presente divulgación se dirige a un procedimiento para preparar la sal de ácido p-toluensulfónico de 5-amino-3- (2’-O-acetil-3’-desoxi-β-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (1)

El procedimiento comprende las etapas de:

(i) acoplar 5-amino-3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (2) con una desoxirribofuranosa (3) , formando un compuesto de fórmula (4)

(ii) escindir selectivamente el 5’-acetato del compuesto de fórmula (4) , formando 5-amino-3- (2'-O-acetil-3'-desoxiβ-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (5)

(iii) hacer reaccionar la 5-amino-3- (2'-O-acetil-3'-desoxi-β-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (5) con ácido p-toluensulfónico, formando la sal de ácido p-toluensulfónico d e 5-amino-3- (2’-O-acetil-3’-desoxi-β-Dribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (1)

En otra realización, la etapa (i) comprende acoplar 5-amino-3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (2) con una desoxirribofuranosa de fórmula (3B) formando un compuesto de fórmula (4)

Otra realización está orientada a procedimientos para preparar un compuesto de fórmula (3) que es útil como intermedio en la preparación de un compuesto de fórmula (1) .

El procedimiento comprende:

(i) sulfonar un compuesto de fórmula (6) con un agente sulfonante en presencia de una base,

formando un compuesto sustituido con sulfonilo de fórmula (7)

en la que R es un alquilo o arilo opcionalmente sustituido;

(ii) reducir el compuesto sustituido con sulfonilo de fórmula (7) con un agente reductor, formando un compuesto de fórmula (8)

(iii) hidrolizar el compuesto de fórmula (8) con un ácido, formando un compuesto de fórmula (9)

(iv) oxidar el compuesto de fórmula (9) con un agente oxidante, seguido de reducción con un agente reductor, formando un compuesto de fórmula (10)

(v) acetilar el compuesto de fórmula (10) con un agente acetilante en presencia de un catalizador ácido, formando el compuesto de fórmula (3)

Otra realización de la presente divulgación está orientada a procedimientos de preparación de un compuesto de fórmula (3B) que es útil como intermedio en la preparación de un compuesto de fórmula (1)

El procedimiento comprende:

(i) sulfonar un compuesto de fórmula (6B) , fórmula (6C) , o mezclas de los mismos con un agente sulfonante en presencia de una base

formando un compuesto sustituido con sulfonilo de fórmula (7B) , fórmula (7C) o mezclas de los mismos,

en las que R es un alquilo o arilo opcionalmente sustituido;

(ii) reducir el compuesto sustituido con sulfonilo de fórmula (7B) , fórmula (7C) o mezclas de los mismos con un agente reductor, formando un compuesto de fórmula (8B)

(iii) hidrolizar el compuesto de fórmula (8B) con un ácido, formando un compuesto de fórmula (9B)

(iv) oxidar el compuesto de fórmula (9B) con un agente oxidante, seguido de reducción con un agente... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto cristalino de fórmula (1)

2. El compuesto de la reivindicación 1

en el que la forma cristalina tiene una difracción de rayos X (2-teta) con la línea más fuerte observada a un ángulo de 5, 5º± 0, 3º .

3. El compuesto de la reivindicación 2, en el que la forma cristalina tiene una difracción de rayos X (2-teta) con líneas de intensidad menor a 11, 8º, 12, 3º, 17, 9º, 18, 2º, 19, 7º, 20, 2º, 21, 3º, 21, 9º, 23, 8º, 24, 1º y 25, 9º ± 0, 3º y bandas de absorción características de IR a 1356, 1130, 804, 498 y 435 cm-1, con bandas medias a 1637, 1602, 1054, 1037, 609 y

530 cm-1.

4. El compuesto de la reivindicación 1, en el que la suma de las sustancias debidas a reacciones secundarias durante la síntesis es menor del 1% y los disolventes y agua residuales son menores del 1%.

5. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto cristalino de fórmula (I) y un portador farmacéuticamente aceptable.

6. Un compuesto cristalino de fórmula (1)

para uso como medicamento.

7. Un compuesto cristalino de fórmula (1) para uso en la prevención o el tratamiento de una enfermedad. en el que la enfermedad es una infección vírica,

en el que la infección vírica es preferiblemente una infección por virus de la hepatitis B o infección por virus de la hepatitis C; o en el que la enfermedad es un tumor o cáncer.

8. Un procedimiento de síntesis de la sal de ácido p-toluensulfónico de 5-amino-3- (2'-O-acetil-3'-desoxi-β-Dribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (1) que comprende las etapas de:

(i) acoplar 5-amino-3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (2) con una desoxirribofuranosa (3) , formando un compuesto de fórmula (4) (ii) escindir selectivamente el 5’-acetato del compuesto de fórmula (4) , formando 5-amino-3- (2'-O-acetil-3'-desoxiβ-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (5)

(iii) hacer reaccionar la 5-amino-3- (2'-O-acetil-3'-desoxi-β-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (5) con ácido p-toluensulfónico, formando la sal de ácido p-toluensulfónico d e 5-amino-3- (2’-O-acetil-3’-desoxi-β-Dribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (1)

9. El procedimiento de la reivindicación 8, en el que la etapa (i) comprende acoplar 5-amino-3H-tiazolo[4, 5d]pirimidin-2-ona (2) con una desoxirribofuranosa (3B) , formando un compuesto de fórmula (4)

en el que la reacción de acoplamiento de la etapa (i) se efectúa sin disolvente, o en el que la reacción de acoplamiento de la etapa (i) se efectúa en acetonitrilo, o en el que la reacción de acoplamiento de la etapa (i) se efectúa en presencia de un ácido, en el que el ácido es preferiblemente TMSOTf, o

en el que la reacción de acoplamiento de la etapa (i) se efectúa en presencia de un reactivo sililante, en el que el reactivo sililante es preferiblemente N, O-bis (trimetilsilil) acetamida, en el que la reacción de acoplamiento de la etapa (i) se efectúa en acetonitrilo en presencia de TMSOTf y N, O

bis (trimetilsilil) acetamida, en el que se añade preferiblemente agua tras la terminación de la reacción de acoplamiento para inactivar el TMSOTf y 20 BSA en exceso, formando ácido tríflico acuoso y hexametildisiloxano, o

en el que la reacción de acoplamiento de la etapa (i) usa un exceso de 5-amino-3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (2) con respecto a la desoxirribofuranosa (3) basado en la estequiometría de la reacción, o en el que el 5’-acetato del compuesto de fórmula (4) en la etapa (ii) se escinde selectivamente por una enzima, en el que la enzima es Candida Antarctica.

10. El procedimiento de la reivindicación 8, en el que la etapa (iii) comprende hacer reaccionar 5-amino-3- (2'-Oacetil-3'-desoxi-β-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (5) con ácido p-toluensulfónico en un disolvente, formando la sal de ácido p-toluensulfónico de 5-amino-3- (2'-O-acetil-3'-desoxi-β-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5

d]pirimidin-2-ona (1) ,

en el que el disolvente se selecciona del grupo consistente en etanol, metanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, acetato de etilo, acetonitrilo, acetato de isopropilo, THF y mezclas de los mismos, o

en el que el disolvente comprende una mezcla de acetato de isopropilo y acetonitrilo.

11. El procedimiento de la reivindicación 8, que comprende adicionalmente aislar la sal de ácido p-toluensulfónico 10 de 5-amino-3- (2'-O-acetil-3'-desoxi-β-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2-ona (1) ,

en el que la sal de ácido p-toluensulfónico de 5-amino-3- (2'-O-acetil-3'-desoxi-β-D-ribofuranosil) -3H-tiazolo[4, 5d]pirimidin-2-ona (1) aislada es al menos un 95% pura.

12. El procedimiento de la reivindicación 8 en el que el compuesto de fórmula (3)

se prepara con un procedimiento que comprende:

(i) sulfonar un compuesto de fórmula (6) con un agente sulfonante y una base,

formando un compuesto sustituido con sulfonilo de fórmula (7)

en la que R es un alquilo o arilo opcionalmente sustituido;

(ii) reducir el compuesto sustituido con sulfonilo de fórmula (7) con un agente reductor, formando un compuesto de fórmula (8)

(iii) hidrolizar el compuesto de fórmula (8) con un ácido, formando un compuesto de fórmula (9)

(iv) oxidar el compuesto de fórmula (9) con un agente oxidante, seguido de reducción con un agente reductor, formando un compuesto de fórmula (10)

(v) acetilar el compuesto de fórmula (10) con un agente acetilante en presencia de un catalizador ácido, formando 10 el compuesto de fórmula (3)

13. El procedimiento de la reivindicación 9, en el que el compuesto de fórmula (3B)

se preparara con un procedimiento que comprende:

(i) sulfonar un compuesto de fórmula (6B) , fórmula (6C) , o mezclas de los mismos con un agente sulfonante y una base

formando un compuesto sustituido con sulfonilo de fórmula (7B) , fórmula (7C) o mezclas de los mismos

en las que R es un alquilo o arilo opcionalmente sustituido;

(ii) reducir el compuesto sustituido con sulfonilo de fórmula (7B) , fórmula (7C) o mezclas de los mismos con un 10 agente reductor, formando un compuesto de fórmula (8B)

(iii) hidrolizar el compuesto de fórmula (8B) con un ácido, formando un compuesto de fórmula (9B)

(iv) oxidar el compuesto de fórmula (9B) con un agente oxidante, seguido de reducción con un agente reductor, formando un compuesto de fórmula (10B)

(v) acetilar el compuesto de fórmula (10B) con un agente acetilante en presencia de un catalizador ácido, formando el compuesto de fórmula (3B)

14. El procedimiento de la reivindicación 12, en el que el agente sulfonante se selecciona del grupo consistente en

anhídrido alquilsulfónico, haluro alquilsulfónico, anhídrido sulfónico aromático, haluro sulfónico aromático y mezclas de 10 los mismos, o

en el que el agente sulfonante se selecciona del grupo consistente en anhídrido tríflico, cloruro de tosilo, anhídrido metanosulfónico y haluro metanosulfónico y mezclas de los mismos, o

en el que el agente sulfonante es anhídrido tríflico.

15. El procedimiento de la reivindicación 12, en el que el agente reductor es un compuesto de borohidruro o un

compuesto de hidruro de aluminio, en el que el agente reductor se selecciona preferiblemente del grupo consistente en borohidruro de tetrabutilamonio, borohidruro de tetraalquilamonio, borohidruro de sodio, borohidruro de litio, borohidruro de potasio, cianoborohidruro de sodio, borohidruro de magnesio, borohidruro de calcio, triacetoxiborohidruro de sodio y mezclas de los mismos; o

en el que el ácido de la secuencia de reacción (iii) es un ácido orgánico o un ácido inorgánico opcionalmente diluido en 20 agua, o

en el que el agente oxidante se selecciona del grupo consistente en per y odato de sodio y acetato de plomo, o en el que el catalizador ácido se selecciona del grupo consistente en ácido nítrico, ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido sulfuroso, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido alquilsulfónico, ácido arilsulfónico y mezclas de los mismos, o

en el que R es CF3, CH3 o -C6H4CH3, o

en el que la base de la secuencia de reacción (i) es al menos una seleccionada del grupo consistente en piridina, trietilamina, imidazol y diisopropiletilamina, o en el que se utiliza diclorometano en la secuencia de reacción (i) , o en el que se utiliza un disolvente aromático en la secuencia de reacción (ii) , o

en el que se realiza la secuencia de reacción (iv) en un disolvente metanol, un disolvente cloruro de metileno, un disolvente metanol/cloruro de metileno o un disolvente metanol/agua, o

en el que la secuencia de reacción (v) se realiza en un disolvente ácido acético, disolvente ácido acético/orgánico o disolvente ácido acético/agua.

16. El procedimiento de la reivindicación 12, en el que reducir el compuesto sustituido con sulfonilo de fórmula (7)

comprende reducir el compuesto sustituido con sulfonilo con un agente reductor borohidruro, formando un compuesto de fórmula (8)

17. El procedimiento de la reivindicación 16, en el que el compuesto de fórmula (7) es un compuesto de glucofuranosa de fórmula 7B

un compuesto de alofuranosa de fórmula 7C

o una mezcla de ambos, o en el que el compuesto sustituido con sulfonilo es un compuesto sustituido con triflato, en el que la furanosa sustituida con triflato se reduce preferiblemente con borohidruro de tetrabutilamonio, en el que el agente reductor borohidruro es borohidruro de tetrabutilamonio, o en el que el agente acetilante es anhídrido acético o cloruro acético.

0, 5 0, 4 0, 3 0, 2 0, 1 , 0