Lacasas para bioblanqueo de pulpa.
Un polipéptido aislado, que comprende: una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad de secuencia de al menos 80%,
90%, 95%, 97%, 99% o 100% con la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 4, en la que dicho polipéptido aislado comprende actividad lacasa, oxida la lignina en condiciones de pH superior o igual a 8,0 y conserva actividad lacasa durante más de al menos 5 minutos a una temperatura superior o igual a 60 ºC; y, además, tiene un pH de reacción óptimo pH ≥8,0 para la oxidación de siringaldazina (SGZ) a temperatura ambiente y/o tiene un pH de reacción óptimo de 8,0 para la oxidación de**Fórmula**
(Mediador 71) a temperatura ambiente.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2007/019124.
Solicitante: VERENIUM CORPORATION.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 4955 DIRECTORS PLACE SAN DIEGO, CA 92121 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.
Inventor/es: ROBERTSON, DAN, HAREMZA, SYLKE, DR., DESANTIS,GRACE, HABICHER,TILO, KOCH,OLIVER, LUGINBUHL,Peter, KEROVUO,Janne Samuli, MCCANN,Ryan.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- A61K38/44 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 38/00 Preparaciones medicinales que contienen péptidos (péptidos que contienen ciclos beta-lactama A61K 31/00; dipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina 2,5-dionas, A61K 31/00; péptidos basados en la ergolina A61K 31/48; que contienen compuestos macromoleculares que tienen unidades aminoácido repartidas estadísticamente A61K 31/74; preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos A61K 39/00; preparaciones medicinales caracterizadas por los ingredientes no activos, p. ej. péptidos como soportes de fármacos, A61K 47/00). › Oxidoreductasas (1).
- C07H21/04 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07H AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS; ACIDOS NUCLEICOS (derivados de ácidos aldónicos o sacáricos C07C, C07D; ácidos aldónicos, ácidos sacáricos C07C 59/105, C07C 59/285; cianohidrinas C07C 255/16; glicales C07D; compuestos de constitución indeterminada C07G; polisacáridos, sus derivados C08B; ADN o ARN concerniente a la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos o su aislamiento, preparación o purificación C12N 15/00; industria del azúcar C13). › C07H 21/00 Compuestos que contienen al menos dos unidades mononucleótido que tienen cada una grupos fosfato o polifosfato distintos unidos a los radicales sacárido de los grupos nucleósido, p. ej. ácidos nucleicos. › con desoxirribosilo como radical sacárido.
- C07K1/00 C07 […] › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Procedimientos generales de preparación de péptidos.
- C12N1/20 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Bacterias; Sus medios de cultivo.
- C12N15/00 C12N […] › Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K).
- C12N9/02 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Oxidorreductasas (1.), p. ej. luciferasa.
- C12P21/04 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › Péptidos o polipéptidos cíclicos o puenteados, p. ej. bacitracina.
- C12P21/06 C12P 21/00 […] › preparados por hidrólisis de un enlace peptídico, p. ej. hidrolizados.
- C12Q1/00 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones.
- C12Q1/34 C12Q […] › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que interviene una hidrolasa.
- C12Q1/68 C12Q 1/00 […] › en los que intervienen ácidos nucleicos.
PDF original: ES-2380605_T3.pdf
Fragmento de la descripción:
Lacasas para bioblanqueo de pulpa Referencia cruzada con solicitudes relacionadas Esta solicitud reivindica prioridad de la Solicitud U.S. Provisional Nº 60/824, 402, titulada "Lacasas para bioblanqueo de pulpa".
Partes del acuerdo de inventigación conjunta La materia divulgada en este documento está sujeta a un acuerdo de investigación conjunta entre Verenium Corporation y BASF Aktiengesellschaft.
Referencia a listado de secuenhcias, tabla o programa de listado de secuencias La presente solicitud se presenta con un listado de secuencia en formato electrónico. El listado de secuencias está provisto como un archivo titulado DIVERSA.014VPC.TXT, creado el 30 de agosto de 2007, el cual tiene un tamaño de 15, 7 KB. La información en formato electrónico del listado de secuencias se incorpora aquí por referencia en su totalidad.
Antecedentes de la invención Campo de la invención La invención se refiere al campo de la bioquímica. En el presente documento se proporcionan enzimas lacasas aisladas y ácidos nucleicos que las codifican. También se proporcionan mediadores para las reacciones de las lacasas. En el presente documento también se proporcionan procedimientos para usar lacasas para oxidar ligninas y otros compuestos fenólicos y aromáticos, tal como para decoloración por bioblanqueo de pulpa de la madera en condiciones de temperatura alta y pH para facilitar una reducción sustancial en el uso de productos químicos blanqueantes, así como para el tratamiento de fibras.
Descripción de la técnica relacionada La fibra de madera es una estructura de múltiples capas que consiste principalmente en celulosa, hemicelulosa y lignina. La lignina es un polímero complejo insoluble de compuestos fenólicos. Hasta el 90 % de la lignina se solubiliza y elimina durante el proceso de pulpeo. La lignina restante es una causa principal de color residual en la pulpa y debe eliminarse mediante degradación oxidativa o blanqueo. El procedimiento de blanqueo requiere aplicación de productos químicos duros y condiciones de energía intensa. El uso de enzimas que ayudan al procedimiento de blanqueo puede permitir el uso reducido de productos químicos de blanqueo, mayor eficiencia energética de las plantas de pulpeo y obtener beneficios ambientales debido a las menores corrientes de residuos químicos.
Los hongos filamentosos pueden degradar la lignina con eficacia mediante la acción de varias clases de enzimas secretadas. De estas, las lacasas han atraído un considerable interés para aplicación en el bioblanqueo de la pulpa. Las lacasas son oxidasas de multicobre que acoplan la oxidación directa de compuestos aromáticos con la reducción del oxígeno molecular en agua. Durante la degradación de la lignina, se piensa que las lacasas actúan sobre pequeños fragmentos de lignina fenólica que, después, reaccionan con el polímero lignina y dan como resultado su degradación. Como alternativa, se pueden proporcionar compuestos mediadores artificiales para acelerar el procedimiento de deslignificación.
El proceso de pulpeo de la madera puede implicar condiciones alcalinas. No obstante, la mayoría de las lacasas conocidas son enzimas ácidas. Solo se han notificado unas pocas lacasas neutras o alcalinas; una lacasa de Rhus vernificera tiene un pHopt de 9 y una lacasa de Melanocarpus albomyces tiene un pHopt sobre sustratos fenólicos. No obstante, ambas lacasas solo son capaces de oxidar los mediadores de potencial redox relativamente bajo que no es probable que oxiden la lignina. Asimismo, es probable que las lacasas estén expuestas a temperaturas relativamente altas en la aplicación del bioblanqueo de la pulpa. Son deseables las enzimas lacasas que funcionan bien en condiciones de temperatura y pH altas de los procedimientos de pulpeo típicos.
Hernández y col. en Applied Microbiology and Biotechnology, Springer, Berlin, DE, vol 70, nº 2, Marzo de 2006, páginas 212-221 describen la producción, caracterización parcial y estudio espectrométrico de masas de la actividad lacasa extracelular de Fusarium proliferatum. Ruijssenaars y col. en Applied Microbiology and
Biotechnology, Springer Verlag, Berlin, DE, vol, 65, nº 2, 24 Febrero de 2004, páginas 177-182 describen una oxidasa multicobre clonada de Bacillus holodurans que exhibe actividad de lacasa alcalina. Sulistyaningdyah y col. En FEMS microbiology letters, vol, 230, nº 2, 30 de enero de 2004, páginas 209-214 describen la caracterización de la actividad de lacasa alcalina en el sobrenadante del cultivo de Myrothecium verrucaria 24G-4.
Sumario de la invención La presente invención proporciona un polipéptido aislado, que comprende: Una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad de secuencia de al menos 80%, 90%, 95%, 97%, 99% o 100% con la secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº 4, en la que dicho polipéptido aislado comprende actividad lacasa, oxida la lignina en condiciones de pH superior o igual a 8 y conserva actividad lacasa durante más de al menos 5 minutos a una temperatura superior o igual a 60 º C tiene un pH reacción óptimo de ≥ 8, 0 para la oxidación de siringaldazina (SGZ) a temperatura ambiente y/o tiene un pH de reacción óptimo de 8, 0 para la oxidación de (Mediador 71) a temperatura ambiente.
Algunas realizaciones se refieren a variantes de la SEC ID Nº 4 que tienen al menos una sustitución de aminoácido, en las que la posición de la al menos una sustitución en la SEC ID Nº 4 se selecciona del grupo que consiste en los residuos de aminoácidos 162, 163, 164, 166, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 208, 210, 212, 213, 214, 215, 216, 218, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 351, 352, 353, 354, 452, 454, 470, 529, 530, 531, 532, 533, 534, 535, 536, 537, 538, 540, 541 , 542, 545, 546, 547, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 597, 598, 599, 603, 604, 605, 607, 608, 609, 610, 611, 612, 613, 614, 615, 616, 616, 618, 619 y 620, o cualquier combinación de los mismos.
En algunas realizaciones, las variantes polipeptídicas de lacasa carecen de su péptido señal asociado, mientras que en otras realizaciones, los polipéptidos de lacasa o variantes polipeptídicas de lacasa incluyen una secuencia señal.
De acuerdo con otro aspecto, la invención proporciona un polipéptido aislado, que comprende: una secuencia que tiene una identidad de secuencia de al menos 80%, 90%, 95%, 97%, 99% o 100% con el polinucleótido de la SEC ID Nº 3, en la que dicho polinucleótido codifica un polipéptido que tiene actividad lacasa que oxida la lignina en condiciones de pH superior o igual a 8 y conserva actividad lacasa durante al menos aproximadamente 5 minutos a una temperatura superior o igual a 60 º C tiene un pH de reacción óptimo pH ≥ 8, 0 para la oxidación de siringaldazina (SGZ) a temperatura ambiente y/o tiene un pH de reacción óptimo de 8, 0 para la oxidación de (Mediador 71) a temperatura ambiente.
En el presente documento también se proporcionan procedimientos para mediar la oxidación de un sustrato fenólico o aromático como se describe en la reivindicación 10. En algunas realizaciones, el mediador es
En algunas realizaciones, , el sustrato fenólico o aromático también está en contacto con un mediador seleccionado del grupo que consiste en ácido violúrico; 2, 6, 6-tetrarmetilpiperidin-1-iloxi (TEMPO) ; 1-hidroxibenzotriazol (HBT) ; ácido 2, 2'-azino-bis (3-etilbenztiazolina-6-sulfónico) (ABTS) ; siringaldazina; N-benzoil-N-fenil hidroxilamina (BPHA) ; N-hidroxiftalimida, 3-Hidroxi-1, 2, 3-benzotriazin-4-ona; promazina; 1, 8-dihidroxi-4, 5-dinitroantraquinona; fenoxazina; antraquinona; 2-hidroxi-1, 4-naftoquinona; fenotiazina; antrona; antraceno; antrarufina; antrarobina; dimetoxifenol (DMP) ; ácido ferúlico; catequina; epicatequina; ácido homovanílico (HMV) ; y ácido 2, 3-dihidroxibenzoico (2, 3-DHB) ; o cualquier combinación de los mismos.
En el presente documento también se proporcionan procedimientos de deslignificar una composición que comprende lignina, que comprende poner en contacto dicho sustrato fenólico con el polipéptido aislado de la reivindicación 1.
La invención también proporciona un procedimiento de oxidación de una composición que comprende una fibra, que comprende poner en contacto dicha composición con el polipéptido aislado de la reivindicación 1.
La invención también proporciona un procedimiento de blanqueo de una composición que comprende pulpa o papel, que comprende poner en contacto la composición con el polipéptido aislado de la reivindicación... [Seguir leyendo]
Reivindicaciones:
1. Un polipéptido aislado, que comprende: una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad de secuencia de al menos 80%, 90%, 95%, 97%, 99% o 100% con la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 4, en la que dicho polipéptido aislado comprende actividad lacasa, oxida la lignina en condiciones de pH superior o igual a 8, 0 y conserva actividad lacasa durante más de al menos 5 minutos a una temperatura superior o igual a 60 º C; y, además, tiene un pH de reacción óptimo pH ≥ 8, 0 para la oxidación de siringaldazina (SGZ) a temperatura ambiente y/o tiene un pH de reacción óptimo de 8, 0 para la oxidación de (Mediador 71) a temperatura ambiente.
2. El polipéptido aislado de la reivindicación 1 que comprende al menos una sustitución de aminoácido, en el que la posición de la al menos una sustitución en la SEC ID Nº 4 se selecciona del grupo que consiste en los residuos de aminoácidos 162, 163, 164, 166, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 208, 210, 212, 213, 214, 215, 216, 218, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 351, 352, 353, 354, 452, 454, 470, 529, 530, 531, 532, 533, 534, 535, 536, 537, 538, 540, 541, 542, 545, 546, 547, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 597, 598, 599, 603, 604, 605, 607, 608, 609, 610, 611, 612, 613, 614, 615, 616, 616, 618, 619 y 620, o cualquier combinación de los mismos.
3. El polipéptido aislado de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, que carece de su péptido señal asociado.
4. El polipéptido aislado de la reivindicación 1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 4
5. Un polinucleótido aislado, que comprende: una secuencia que tiene una identidad de secuencia de al menos 80%, 90%, 95%, 97%, 99% o 100% con la secuencia de la SEC ID Nº 3, en la que dicho polinucleótido codifica un polipéptido que tiene actividad lacasa, oxida la lignina en condiciones de pH superior o igual a
8, 0 y conserva actividad lacasa durante más de al menos 5 minutos a una temperatura superior o igual a 60 º C; y que, además, tiene un pH de reacción óptimo pH ≥ 8, 0 para la oxidación de SGZ a temperatura ambiente y/o tiene un pH de reacción óptimo de 8, 0 para la oxidación del Mediador 71 a temperatura ambiente.
6. El polinucleótido aislado de acuerdo con la reivindicación 5, en el que dicho polinucleótido aislado 30 comprende una secuencia que codifica el polipéptido de la SEC ID Nº 4.
7. El polipéptido aislado de la reivindicación 1 o el polinucleótido aislado de la reivindicación 5, en el que el polipéptido aislado o el polipéptido codificado tiene un pH de reacción óptimo de ≥ 8, 0 para la oxidación de SGZ a temperatura ambiente.
8. El polipéptido aislado de la reivindicación 1 o el polinucleótido aislado de la reivindicación 5, en el que el
polipéptido aislado o el polipéptido codificado tiene un pH de reacción óptimo de 8, 0 para la oxidación del Mediador 71 a temperatura ambiente.
9. El polipéptido aislado de la reivindicación 1 o el polinucleótido aislado de la reivindicación 5, en el que el polipéptido aislado o el polipéptido codificado tiene un pH de reacción óptimo de ≥ 8, 0 para la oxidación de SGZ a temperatura ambiente y un pH de reacción óptimo de 8, 0 para la oxidación del Mediador 71.
10. Un procedimiento para mediar en la oxidación de un sustrato fenólico o aromático, que comprende:
poner en contacto el sustrato fenólico con un mediador, en el que dicho mediador es un compuesto representado por la Fórmula I o la Fórmula II, en el que la Fórmula I está representada por Fórmula (I)
en la que R1 R2, R3, R4, R5, R6 se seleccionan de forma independiente del grupo que consiste en H, CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH (CH3) 2, CH2CH2 (CH3) 2, C (CH3) 3, CH2CH2CH2, CH3, alquilo, arilo, fenilo, CF3, OC (CH3) 3, OCH (CH3) 2, CH2CH3, C (O) OCH3, COOH, OCH3, OH, O-, OCF3, NH2, NH (CH3) , N (CH3) 2, CH2NH2, CH2CH2NH2, Br y Cl, y en el que la Fórmula II está representado por
Fórmula II, en la que R1 R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 y R10 se seleccionan de forma independiente del grupo que 15 consiste en H, CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH (CH3) 2, CH2CH2 (CH3) 2, C (CH3) 3, CH2CH2CH2, CH3, alquilo, arilo, fenilo, CF3, OC (CH3) 3, OCH (CH3) 2, CH2CH3, C (O) OCH3, COOH, OCH3, OH, OCF3, NH2, NH (CH3) , N (CH3) 2, CH2NH2, CH2CH2NH2, Br y Cl, y que además comprende poner en contacto dicho sustrato fenólico o aromático con una lacasa seleccionada del grupo que consiste en: a) un polipéptido aislado que comprende la secuencia de SEC ID Nº 4; y 20 b) un polipéptido aislado que tiene una identidad de secuencia de al menos el 80 % con la SEC ID Nº 4, en la que dicho polipéptido aislado comprende actividad lacasa, oxida la lignina en condiciones de pH superior o igual a 8, 0 y conserva actividad lacasa durante más de al menos 5 minutos a una temperatura superior o igual a 60 º C; y que, además, tiene un pH de reacción óptimo pH ≥ 8, 0 para la oxidación de SGZ a temperatura ambiente y/o tiene un pH de reacción óptimo de 8, 0 para la oxidación 25 del Mediador 71 a temperatura ambiente. 11. El procedimiento de la reivindicación 10, en el que el mediador es12. El procedimiento de la reivindicación 10 o la reivindicación 11, que además comprende poner en contacto el sustrato fenólico o aromático con un mediador seleccionado del grupo constituido por: ácido violúrico; 5 2, 2, 6, 6-tetrarmetilpiperidin-1-iloxi (TEMPO) ; 1-hidroxibenzotriazol (HBT) ; ácido 2, 2'-azinobis (3-etilbenztiazolina-6-sulfónico) (ABTS) ; siringaldazina; N-benzoil-N-fenil hidroxilamina (BPHA) ; Nhidroxiftalimida, 3-Hidroxi-1, 2, 3-benzotriazin-4-ona; promazina; 1, 8-dihidroxi-4, 5-dinitroantraquinona; fenoxazina; antraquinona; 2-hidroxi-1, 4-naftoquinona; fenotiazina; antrona; antraceno; antrarufina; antrarobina; dimetoxifenol (DMP) ; ácido ferúlico; catequina; epicatequina; ácido homovanílico (HMV) ; y ácido 2, 3-dihidroxibenzoico (2, 3-DHB) ; o cualquier combinación de los mismos.
13. Un procedimiento de deslignificar una composición que comprende lignina, que comprende: poner en contacto dicho sustrato fenólico con el polipéptido aislado de la reivindicación 1.
14. Un procedimiento de oxidar una composición que comprende fibra, que comprende: poner en contacto dicha composición con el polipéptido aislado de la reivindicación 1.
15. Un procedmiento de blanqueo de una composición que comprende pulpa o papel, que comprende: poner en contacto dicha composición con el polipéptido aislado de la reivindicación 1.
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