Uso de proteína Anexina V, opcionalmente en forma de una sal, en la fabricación de una composición farmacéutica para evitar la ruptura de placa en humanos

CAMPO DE LA INVENCIÓN

Esta invención tiene relación con los campos de ateroesclerosis y aterotrombosis. La invención trata específicamente de mecanismos novedosos para la prevención o inhibición de la ruptura de las placas.

DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA RELACIONADA

Hay una interrelación entre ateroesclerosis y aterotrombosis.

La ateroesclerosis tiene muchas características de una enfermedad inflamatoria, incluyendo abundancia de células inflamatorias y la producción de citoquinas pro-inflamatorias en lesiones 1, 2.

El aumento de riesgo de mortalidad debido a las enfermedades cardiovasculares, específicamente en pacientes con lupus eritematoso sistémico (SLE), es un problema clínico serio.

Las enfermedades cardiovasculares en pacientes SLE están asociadas a la vez con factores tradicionales de riesgo como dislipidemia, y factores no tradicionales de riesgo incluyendo la oxidación aumentada de la lipoproteína de baja densidad (oxLDL), actividad elevada en el factor necrosis tumor (TNF)-sistema (cercanamente asociado con dislipidemia), inflamación sistémica según se determina por CRP, homocisteína y anticuerpos anti-fosfolípidos (aPL)3-7. Los anti-fosfolípidos pueden causar el síndrome de anticuerpo anti-fosfolípido (APS), común en pacientes SLE y caracterizado por la pérdida de embarazo recurrente y trombosis recurrente 8,9. Diferentes formas de anti-fosfolípidos han sido también implicadas en enfermedades cardiovasculares en la población general 10,11.

Las anexinas comparten la propiedad de unir calcio y fosfolípidos cargados negativamente, ambos de los cuales son requeridos para la coagulación de la sangre. Recientemente, Anexina V ha sido implicada en el síndrome de anticuerpo anti-fosfolípido ya que algunos anticuerpos anti-fosfolípidos rompen la capa antitrombótica de la Anexina-V en la placenta, predisponiendo a la placenta a la microtrombosis y al aborto recurrente 12-14 .

La unión de Anexina V a plaquetas activadas y células dañadas probablemente explique la retención selectiva de la proteína en trombos. Esto se ha mostrado en modelos experimentales de trombosis15 venosa y arterial en animales y la Anexina clasificada ha sido propuesta para la formación de imagen médica del trombo vascular en humanos, con reducido ruido y aumento en seguridad16.

Se ha informado18 que la Anexina V administrada de forma exógena tiene afinidad por las células apoptóticas o estresadas y que esta propiedad puede ser utilizada para crear una prueba molecular multifuncional útil en la representación óptica y en el tratamiento de placas inestables, en las cuales la Anexina está acoplada a moléculasdiana y efectoras. Las moléculas efectoras son utilizadas para destruir selectivamente o inhibir las células estresadas o apoptóticas. Sin embargo, no hay indicación de que la Anexina V sola (es decir, sin moléculas diana o efectoras) tendría algún efecto en las placas inestables.

La Anexina V ha sido sugerida para disminuir la actividad apoptótica de las células en las placas ateroscleróticas de modelos19 de ratón apoE -/-. Sin embargo, el informe falla en mostrar algún efecto de ruptura de las placas, y no dice nada sobre los modelos humanos.

Se ha mostrado también que la Anexina V inhibe la trombosis arterial en los conejos20 y que este efecto es mediado mediantesu interacción con fosfatidilserina (PS) en plaquetas. No hay discusión en esta referencia de aterotrombosis o rotura de placa, ni ningún dato relacionado con humanos.

Un problema importante asociado con el uso terapéutico de Anexina V en los trastornos de coagulación es su corta vida media en la circulación, estimada en animales experimentales de 5 a 15 minutos15, 17; la Anexina V tiene una corta vida media en la circulación de los humanos.

En EP1379266 “Proteínas Anexina modificadas y métodos para prevenir trombosis” se reivindica un proteína Anexina polietilen glicol-modificada para ser utilizada para evitar la trombosis sin aumentar la hemorragia. La vida media de Anexina V crece usando un conjugado PEG en un método para evitar la unión del complejo protrombinasa necesaria para la formación del trombo.

En la presente invención hemos mostrado que la Anexina V puede estabilizar la placa aterosclerótica. Cuando la Anexina V o un fragmento N-terminal de Anexina V es administrada según la invención, preferiblemente por inyección, se unirá a la placa endotelial en un primer paso. La corta vida media de Anexina V en la circulación no es así un problema como en el caso de EP1379266. Una composición para la inyección que comprende Anexina V o un fragmento N-terminal de Anexina V con o sin aditivos evitarán en consecuencia la aterotrombosis mediante la estabilización de la placa carótida a través de una unión instantánea.

La inmunoglobulina G o IgG es una proteína encontrada en adultos en concentraciones normales que están entre 900 mg/dl hasta 2400 mg/dl. Esto es aproximadamente 20% del total de proteína encontrada en el suero o plasma. IgG tiene una vida media de 23 días. Contribuye a la inmunidad a las bacterias, virus, parásitos, algunos hongos y proporciona actividad de anticuerpo en el tejido. IgG es capaz de activar un complemento que provoca la respuesta inflamatoria y es un sujeto en sí misma. IgG proporciona protección contra varios virus y similares para los animales a través de inoculaciones o exposición de corral natural. Una vez que ocurre la exposición, se desarrolla una memoria la cual permite al cuerpo fabricar rápidamente los anticuerpos necesarios para luchar contra las infecciones específicas. En humanos IgG es transferida al bebé a través de la placenta. Si no está presente IgG o está en bajos niveles, los mamíferos tienen pocas defensas contra cualquier agente infeccioso al que podrían ser expuestos.

Las preparaciones de inmunoglobulina intravenosa (p.e, IGIV; Baxter y otros es una preparación altamente purificada de IgG comercialmente disponible y es utilizada en los tratamientos de pacientes que no tienen, o tienen bajos niveles de producción de anticuerpo. Las preparaciones de inmunoglobulina incluyen las disponibles de las siguientes fabricaciones: Baxter (US) eg Gammagard®, Isiven (Antimo Naples, Italy), Omrix (Tel-Hashomer, Israel), Miles (Biological Products Division, West Heaven, CT), Sclavo (Lucca, Italy), Sandoz (Novartis, Basel, Switzerland eg Sandoglobulin®), Biotest Diagnostic Corporation (Deville, NJ). Examples of immunoglobulin preparations are Gammagard S/D®, Gammar IV®, Gammar-P IV® Gammimune N®, Iveegam®, Panglobulin®, Polygam S/D®, Sandoglobulin®, Venoglobulin®. Las preparaciones de inmunoglobulina típicamente contienen algún IgM así como IgG. Trazas de IgM están presentes en Gammagard®. Pentaglobin (Biotest) es una preparación de lgM enriquecida que ha sido utilizada para el tratamiento de SARS.

Tales preparaciones de lvlg de plasma colectivo derivado de muchos donantes son a menudo utilizadas también en condiciones autoinmunes, donde un modo reconocido de acción es la presencia de anticuerpos anti-idiótipicos, p.e; anticuerpos que reaccionan con y neutralizan otros anticuerpos que son patogénicos.

En US6613328 se ha descrito un método para tratar enfermedades de trombosis con anticuerpos específicos de factor von Willebrand. Los anticuerpos humanizados son específicamente producidos. No hay sin embargo información sobre que inmunoglobulinas directamente disponibles tales como IGIV o subfracciones de estas inmunoglobulinas puedan ser utilizadas para prevenir aterotrombosis o ruptura de placa. Además, no hay información en la literatura de que IgG pueda inhibir la unión de anticuerpos a Anexina V nativa, que es una posible razón de la disminución de unión de Anexina V al endotelio, presentada en esta invención.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

La invención proporciona el uso de Anexina V, opcionalmente en forma de sal, para impedir la ruptura de placa en humanos.

La invención también proporciona el uso de una preparación inmunoglobulina (IVIG) intravenosa para evitar la ruptura de placa en un paciente humano SLE.

La invención también proporciona el uso de una subfracción de anticuerpo anti lg purificado de una preparación colectiva de inmunoglobulina conteniendo anticuerpos anti-aPAF y/o anticuerpos anti-IgG con la capacidad de disminuir el efecto inhibidor de plasma de un paciente con lupus eritematoso sistémico al unir Anexina V a células endoteliales,... [Seguir leyendo]

REINVIDICACIONES

1. Uso de proteína Anexina V, opcionalmente en forma de una sal, en la fabricación de una composición farmacéutica para evitar la ruptura de placa en humanos.

2. Una composición farmacéutica que contiene la proteína Anexina V, opcionalmente en forma de una sal, para uso en la prevención de ruptura de placa en humanos.

3. El uso de acuerdo a la reivindicación 1 o la composición farmacéutica de acuerdo a la reivindicación 2, donde la composición farmacéutica contiene una cantidad eficaz de la proteína Anexina V, opcionalmente en combinación con un portador y aditivos.

4. El uso de acuerdo a la reivindicación 1 o reivindicación 3 o la composición farmacéutica de acuerdo a la reivindicación 2 o reivindicación 3, donde la cantidad eficaz de la Anexina V en la composición farmacéutica es determinada de un análisis de estado diagnóstico de la unión Anexina V-endotelio.

5. Un uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1, 3 o 4 o la composición farmacéutica de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4 para evitar la ruptura de placas en un paciente con lupus eritematoso sistémico (SLE).

6. Uso de una preparación de inmunoglobulina intravenosa (IVIG) en la fabricación de un medicamento para evitar la ruptura de placa en un paciente humano SLE.

7. Una preparación de inmunoglobulina intravenosa (IVIG) para uso en la prevención de rotura de placa en un paciente humano SLE.

8. Uso de una subfracción purificada de una preparación de inmunoglobulina colectiva con la capacidad de disminuir el efecto inhibidor de plasma de un paciente con lupus eritematoso sistemático (SLE) en la unión de Anexina V a células endoteliales, en la fabricación de un medicamento para prevenir la ruptura de placa en un paciente humano SLE, donde la subfracción purificada es:

a) Una subfracción purificada anticuerpo anti lg que contiene anticuerpos anti-aPAF, y/o

b) Una subfracción purificada anticuerpo anti lg que contiene anticuerpos anti-IgG.

9. Una subfracción purificada de una preparación de inmunoglobulina colctiva con la capacidad de disminuir el efecto inhibidor de plasma del paciente con lupus eritematoso sistemático (SLE) en la unión de Anexina V a células endoteliales, para uso en la prevención de ruptura de placa en un paciente humano SLE, donde la subfracción purificada es:

c) Una subfracción purificada anticuerpo anti lg conteniendo anticuerpos anti-aPAF, y/o

d) Una subfracción purificada anticuerpo anti lg conteniendo anticuerpos anti-IgG.

10. Un uso de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 1, 3 a 6, u 8, la composición farmacéutica de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, la preparación IVIG de acuerdo con la reivindicación 7 o la subfracción purificada de una preparación de inmunoglobulina colectiva de acuerdo a la reivindicación 9 para prevenir la ruptura de placas en un paciente con placas vulnerables.