Escisión de ADN dirigida por ARN mediante el complejo Cas9-ARNcr.

Un procedimiento in vitro para la modificación específica de sitio de una molécula de ADN diana,

comprendiendo el procedimiento poner en contacto, en condiciones adecuadas,

una molécula de ADN diana; y

una endonucleasa de ADN guiada por ARN que comprende al menos una secuencia de ARN y al menos uno de un motivo de sitio activo RuvC y un motivo de sitio activo HNH;

en el que

la endonucleasa de ADN guiada por ARN es un complejo Cas9-ARNcr

comprendiendo dicho complejo Cas9-ARNcr una Cas9, ARNcr y ARNtracr

para dar como resultado la molécula de ADN diana modificada en una región que está determinada por la unión complementaria del ARNcr a la molécula de ADN diana,

comprendiendo el procedimiento adicionalmente ensamblar el complejo polipéptido-polirribonucleótidos in vitro incubando dichos componentes del complejo en condiciones adecuadas para el ensamblaje del complejo, en el que el ADN diana es bicatenario o monocatenario, y en el que un ADN diana bicatenario contiene un motivo adyacente al protoespaciador.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2013/033106.

Solicitante: Vilnius University.

Inventor/es: SIKSNYS,VIRGINIJUS, GASIUNAS,GIEDRIUS, KARVELIS,TAUTVYDAS, LUBYS,ARVYDAS, ZALIAUSKIENE,LOLITA, GLEMZAITE,MONIKA, SMITH,ANJA.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N15/10 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
  • C12N15/113 C12N 15/00 […] › Acidos nucleicos no codificantes que modulan la expresión de genes, p.ej. oligonucleótidos antisentido.
  • C12N15/90 C12N 15/00 […] › Introducción estable de ADN extraño en el cromosoma.
  • C12N9/22 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Ribonucleasas.
  • C12Q1/6811

PDF original: ES-2749108_T3.pdf

 

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