Escisión de ADN dirigida por ARN mediante el complejo Cas9-ARNcr.
Un procedimiento in vitro para la modificación específica de sitio de una molécula de ADN diana,
comprendiendo el procedimiento poner en contacto, en condiciones adecuadas,
una molécula de ADN diana; y
una endonucleasa de ADN guiada por ARN que comprende al menos una secuencia de ARN y al menos uno de un motivo de sitio activo RuvC y un motivo de sitio activo HNH;
en el que
la endonucleasa de ADN guiada por ARN es un complejo Cas9-ARNcr
comprendiendo dicho complejo Cas9-ARNcr una Cas9, ARNcr y ARNtracr
para dar como resultado la molécula de ADN diana modificada en una región que está determinada por la unión complementaria del ARNcr a la molécula de ADN diana,
comprendiendo el procedimiento adicionalmente ensamblar el complejo polipéptido-polirribonucleótidos in vitro incubando dichos componentes del complejo en condiciones adecuadas para el ensamblaje del complejo, en el que el ADN diana es bicatenario o monocatenario, y en el que un ADN diana bicatenario contiene un motivo adyacente al protoespaciador.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2013/033106.
Solicitante: Vilnius University.
Inventor/es: SIKSNYS,VIRGINIJUS, GASIUNAS,GIEDRIUS, KARVELIS,TAUTVYDAS, LUBYS,ARVYDAS, ZALIAUSKIENE,LOLITA, GLEMZAITE,MONIKA, SMITH,ANJA.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/10 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
- C12N15/113 C12N 15/00 […] › Acidos nucleicos no codificantes que modulan la expresión de genes, p.ej. oligonucleótidos antisentido.
- C12N15/90 C12N 15/00 […] › Introducción estable de ADN extraño en el cromosoma.
- C12N9/22 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Ribonucleasas.
- C12Q1/6811 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › Métodos de selección para la producción o el diseño de oligonucleótidos específicos de diana o moléculas de unión.
PDF original: ES-2749108_T3.pdf
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