Etiquetado y evaluación de una secuencia diana.

Un método para modificar un ácido nucleico, que comprende:

(a) poner en contacto un ácido nucleico de cadena sencilla con una actividad de transferasa terminal y una mezcla de dos o más nucleótidos diferentes en condiciones en las que los nucleótidos en la mezcla se añaden secuencial y aleatoriamente al extremo 3' del ácido nucleico mediante la actividad de transferasa terminal,

añadiendo con ello un heteropolinucleótido que comprende nucleótidos en la mezcla al extremo 3' del ácido nucleico y generando un primer ácido nucleico modificado;

(b) poner en contacto el primer ácido nucleico modificado con una actividad de transferasa terminal y una composición que comprende monómeros de un solo nucleótido en condiciones en las que los monómeros se añaden al extremo 3' del primer ácido nucleico modificado mediante la actividad de transferasa terminal, añadiendo con ello un homopolinucleótido que comprende los monómeros al extremo 3' del primer ácido nucleico modificado y generando un segundo ácido nucleico modificado que comprende, 5' a 3', el heteropolinucleótido y homopolinucleótido; y

(c) poner en contacto el segundo ácido nucleico modificado con un segundo ácido nucleico de cadena sencilla que comprende una secuencia que es complementaria al, o sustancialmente complementaria al homopolinucleótido del segundo ácido nucleico modificado y una actividad de ligasa, en condiciones en las que se ligan el extremo 3' del segundo ácido nucleico modificado y el extremo 5' del segundo ácido nucleico de cadena sencilla, generando con ello un ácido nucleico ligado, en donde el extremo 5' del segundo ácido nucleico de cadena sencilla está fosforilado o adenilado.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2015/039080.

Solicitante: RhoDx, Inc.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: BioGenerator Labs, Suite 234 4340 Duncan Ave St Louis, MO 63110-1110 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: RODI,CHARLES.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N15/10 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
  • C12N15/66 C12N 15/00 […] › Métodos generales para insertar un gen en un vector para formar un vector recombinante, utilizando la escisión y la unión; Utilización de "linkers" no funcionales o de adaptadores, p. ej. "linkers" que contienen la secuencia para una endonucleasa de restricción.

PDF original: ES-2810300_T3.pdf

 

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