Miembro de unión para el receptor GM-CSF.

Un miembro de unión aislado para el GM-CSFRα humano, en donde miembro de unión comprende una molécula deanticuerpo que inhibe la unión de GM-CSF a GM-CSFRα

, y en donde el miembro de unión se une a una secuenciaTyr-Leu-Asp-Phe-Gln en las posiciones 226 a 230 del GM-CSFRα humano como se muestra en la sec. con núm. deident.: 206, y en donde el miembro de unión se une al dominio extracelular de GM-CSFRα con una afinidad (KD) demenos que 4 nM en un ensayo de resonancia de plasmón superficial.

Miembro de unión para el receptor GM-CSF

La presente invención se refiere a los miembros de unión para la cadena alfa del Receptor del Factor de Estimulación de la Colonia de Granulocito/Macrófago (GM-CSFRa) , especialmente las moléculas de anticuerpo anti-GMCSFRa. Además se refiere al uso de estos miembros de unión en el tratamiento de enfermedades inflamatorias, respiratorias y autoinmunes mediadas a través de GMCSFRa, que incluyen la artritis reumatoide, la enfermedad pulmonar obstructiva crónica y la esclerosis múltiple.

El GM-CSF es una citocina proinflamatoria de tipo I, que mejora la supervivencia, la proliferación y/o la diferenciación de una amplia gama de tipos de células hematopoyéticas que incluyen los neutrófilos, eosinófilos, macrófagos y sus células progenitoras. El receptor GM-CSF es un miembro de la superfamilia del receptor de la hematopoyetina. Es heterodimérico, consistente de una subunidad alfa y una beta. La subunidad alfa es altamente específica para el GM-CSF mientras que la subunidad beta es compartida con otros receptores de citocinas, que incluyen la IL3 y la IL5. Esto se refleja en una distribución tisular más amplia de la subunidad beta del receptor. La subunidad alfa, GM-CSFRa, se expresa principalmente en las células mieloides y las células no hematopoyéticas, tales como los neutrófilos, los macrófagos, los eosinófilos, las células dendríticas, las células endoteliales y las células epiteliales respiratorias. El GM-CSFRa de longitud completa es una glicoproteína de membrana de tipo I de 400 aminoácidos que pertenece a la familia de receptores de citocinas de tipo I, y consiste de un péptido señal de 22 aminoácidos (posiciones 1-22) , un dominio extracelular de 298 aminoácidos (posiciones 23-320) , un dominio transmembrana de las posiciones 321 - 345 y un corto dominio intra-celular de 55 aminoácidos. El péptido señal se escinde para proporcionar la forma madura de GM-CSFRa como una proteína de 378 aminoácidos. Están disponibles los clones de ADNc de GM-CSFRa humano y murino y, a nivel de proteína, las subunidades del receptor tienen 36% de identidad. El GM-CSF es capaz de unirse con una afinidad relativamente baja a la subunidad a sola (Kd 1-5 nm) pero no en absoluto a la subunidad º sola. Sin embargo, la presencia de ambas subunidades a y º dan lugar a un complejo ligando-receptor de alta afinidad (Kd " 100pM) . La señalización de GM-CSF se produce a través su unión inicial a la cadena a de GM-CSFR y después el entrecruzamiento con una subunidad más grande de la cadena º común para generar la interacción de alta afinidad, que fosforila la ruta JAK-STAT. La unión de GM-CSFR al GMCSF se examina en la ref.

[1]. Esta interacción además es capaz de señalizar a través de la fosforilación de tirosina y la activación de la ruta de la cinasa MAP.

Patológicamente, se ha demostrado que el GM-CSF desempeña un papel en la exacerbación de las enfermedades inflamatoria, respiratoria y autoinmune. La neutralización de la unión de GM-CSF al GM-CSFRa es por lo tanto un enfoque terapéutico para el tratamiento de las enfermedades y las afecciones mediadas a través de GM-CSFR.

Nicola y otros. [2] describieron un anticuerpo murino contra el GM-CSFRa humano, que se designó 2B7-17-A o "2B7", que se informó que tiene una afinidad relativamente alta por el GM-CSFRa humano y es un potente inhibidor de la acción biológica del GM-CSF humano en varios biensayos diferentes. El anticuerpo 2B7 está disponible comercialmente de Chemicon como MAB1037, y la ficha de especificaciones técnicas para el MAB1037 nota que este es un potente inhibidor de la acción biológica de GM-CSF.El 2B7 además se describió en WO94/09149.

Por medio del uso de una combinación de selecciones en las genotecas de fago scFv vírgenes, mutagénesis aleatoria y ensayos biológicos y bioquímicos diseñados adecuadamente (ver la Parte Experimental más abajo) , se han identificado moléculas de anticuerpo muy potentes que se unen al GM-CSFRa humano e inhiben la acción de GM-CSF humano a su receptor. Los resultados presentados en la presente descripción indican que nuestros anticuerpos se unen a una región o epítopo diferente de GM-CSFRa comparado con el anticuerpo 2B7 anti-GM-CSFRa conocido, y sorprendentemente son aún más potentes que 2B7 como se demostró en una variedad de ensayos biológicos.

En consecuencia, esta invención se refiere a los miembros de unión que comprenden moléculas de anticuerpo que se unen al GM-CSFRa humano e inhiben la unión de GM-CSF humano al GM-CSFRa. Los miembros de unión de la invención pueden ser antagonistas de GM-CSFR. Los miembros de unión pueden ser inhibidores reversibles competitivos de la señalización de GM-CSF a través de GM-CSFR.

Los anticuerpos de la invención son especialmente útiles en la unión y neutralización de GM-CSFRa, y así son de uso en tratamientos para enfermedades mediadas por el GM-CSFRa, que incluyen las enfermedades inflamatorias y autoinmunes, como se indica por la experimentación contenida en la presente descripción y en la literatura técnica de apoyo adicional. Por ejemplo, se ha demostrado en ensayos basados en células que los anticuerpos de la invención son capaces de inhibir la

liberación de citocinas (por ejemplo. IL-6 y TNFa) inducida por la unión de GM-CSF natural a su receptor. Como se explica en más detalle más abajo, la inhibición de la actividad de GM-CSF mediante el bloqueo de la unión al GM-CSFRa es un enfoque terapéutico para el tratamiento de enfermedades tales como la artritis reumatoide (RA) , el asma, la inflamación de las vías respiratorias inducida por el humo, la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) , la reacción alérgica, la esclerosis múltiple (MS) , la leucemia mieloide y la aterosclerosis.

Los miembros de unión de acuerdo con la invención generalmente se unen al dominio extracelular de GM-CSFRa. En un aspecto de la invención, un miembro de unión se une a una secuencia Tyr-Leu-Asp-Phe-Gln (YLDFQ) , sec. con núm. de ident.: 201, en las posiciones 226 a 230 de GM-CSFRa humano maduro (sec. con núm. de ident.: 206) . El miembro de unión puede unirse al menos a un residuo en la secuencia YLDFQ de GM-CSFRa humano, por ejemplo, se puede unir a uno, dos, tres o cuatro residuos de la secuencia YLDFQ. Así, el miembro de unión puede reconocer uno o más residuos dentro de esta secuencia, y opcionalmente puede unirse además a residuos flanqueantes adicionales o residuos estructuralmente vecinos en el dominio extra-celular de GM-CSFRa.

La unión se puede determinar por cualquier método adecuado, por ejemplo se puede usar una exploración de péptidos de unión, tal como un ensayo inmunoenzimático basado en PEPSCAN (ELISA) , como se describe en detalle en otra parte en la presente descripción. En una exploración de péptido de unión, tal como el tipo que ofrecen los sistemas PEPSCAN, péptidos cortos superpuestos, que se derivan de los antígenos se examinan sistemáticamente para la unión a un miembro de unión. Los péptidos se pueden acoplar covalentemente a una superficie de apoyo para formar una matriz de péptidos. En resumen, una exploración de péptido de unión (por ejemplo, "PEPSCAN") incluye la identificación de (por ejemplo, por medio del uso del ELISA) un conjunto de péptidos a los cuales se une el miembro de unión, en donde los péptidos tienen secuencias de aminoácidos que corresponden a los fragmentos de sec. con núm. de ident.: 206 (por ejemplo, los péptidos de aproximadamente 15 residuos contiguos de sec. con núm. de ident.: 206) , y la alineación de los péptidos con el fin de determinar una huella de los residuos unidos por el miembro de unión, donde la huella comprende los residuos comunes a los péptidos superpuestos. De acuerdo con la invención, la huella identificada mediante la exploración de los péptidos de unión o PEPSCAN puede comprender al menos un residuo de YLDFQ correspondiente a las posiciones 226 a 230 de la sec. con núm. de ident.: 206. La huella puede comprender uno, dos, tres, cuatro o todos los residuos de YLDFQ. Un miembro de unión de acuerdo con la presente invención se puede unir a un fragmento de péptido (por ejemplo, de 15 residuos) de sec. con núm. de ident.: 206 que comprende uno o más, preferentemente todos, los residuos de YLDFQ correspondientes a las posiciones 226 a 230 de la sec. con núm. de ident.: 206, por ejemplo, como se determina por un método de exploración de péptidos de unión o PEPSCAN descritos en la presente descripción. Así, un miembro de unión de la invención se puede unir a un péptido que tiene una secuencia de aminoácido de 15 residuos contiguos de la sec. con núm. de ident.: 206, en donde la secuencia de 15 residuos comprende al menos un residuo de, o al... [Seguir leyendo]

1. Un miembro de unión aislado para el GM-CSFRa humano, en donde miembro de unión comprende una molécula de anticuerpo que inhibe la unión de GM-CSF a GM-CSFRa, y en donde el miembro de unión se une a una secuencia Tyr-Leu-Asp-Phe-Gln en las posiciones 226 a 230 del GM-CSFRa humano como se muestra en la sec. con núm. de ident.: 206, y en donde el miembro de unión se une al dominio extracelular de GM-CSFRa con una afinidad (KD) de menos que 4 nM en un ensayo de resonancia de plasmón superficial.

2. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 1, que se une a una una huella de los residuos que comprende Tyr-Leu-Asp-Phe-Gln correspondiente a las posiciones 226 a 230 de la sec. con núm. de ident.: 206 como se determinó mediante una exploración de los péptidos de unión.

3. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 2, que comprende un dominio VH de anticuerpo que comprende un conjunto de regiones determinantes de la complementariedad CDR1, CDR2 y CDR3 y un marco, en donde el conjunto de regiones determinantes de la complementariedad comprende una CDR1 con la secuencia de aminoácidos de sec. con núm. de ident. : 3 o sec. con núm. de ident.: 173, una CDR2 con una secuencia de aminoácidos de sec. con núm. de ident.: 4, y una CDR3 con una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste de sec. con núm. de ident.: 5; sec. con núm. de ident.: 15; sec. con núm. de ident.: 35; sec. con núm. de ident.: 45; sec. con núm. de ident.: 55; sec. con núm. de ident.: 65; sec. con núm. de ident.: 75; sec. con núm. de ident.: 85; sec. con núm. de ident.: 95; sec. con núm. de ident.: 105; sec. con núm. de ident.: 115; sec. con núm. de ident.: 125; sec. con núm. de ident.: 135; sec. con núm. de ident.: 145; sec. con núm. de ident.: 155; sec. con núm. de ident.: 165; sec. con núm. de ident.: 175; sec. con núm. de ident.: 185; y sec. con núm. de ident.: 195; o comprende ese conjunto de secuencias CDR con una o dos sustituciones de aminoácido.

4. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende un dominio VH de anticuerpo que comprende regiones determinantes de la complementariedad CDR1, CDR2 y CDR3 y un marco, y en donde el residuo de Kabat H97 en VH CDR3 es S.

5. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 4, en donde VH CDR3 comprende además uno o más de los

siguientes residuos: V, N, A o L en el residuo de Kabat H95; S, F, H, P, T o W en el residuo de Kabat H99; A, T, P, S, V o H en el residuo de Kabat H100B.

6. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 5, en donde el residuo de Kabat H95 es V.

7. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 5 o reivindicación 6, en donde residuo de Kabat H99 es S.

8. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en dondeel residuo de Kabat H100B es A o T.

9. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 5, en donde VH CDR3 tiene una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste de la sec. con núm. de ident.: 5, sec. con núm. de ident.: 15, sec. con núm. de ident.: 35, sec. con núm. de ident.: 45, sec. con núm. de ident.: 55, sec. con núm. de ident.: 65, sec. con núm. de ident.: 75, sec. con núm. de ident.: 85, sec. con núm. de ident.: 95, sec. con núm. de ident. : 105, sec. con núm. de ident. : 115, sec. con núm. de ident.: 125, sec. con núm. de ident.: 135, sec. con núm. de ident.: 145, sec. con núm. de ident.: 155, sec. con núm. de ident.: 165, sec. con núm. de ident.: 175, sec. con núm. de ident.: 185 y sec. con núm. de ident.:

195.

10. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 9, en donde el residuo de Kabat H34 en VH CDR1 es I.

11. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 10, en donde VH CDR1 tiene una secuencia de aminoácidos sec. con núm. de ident.: 3.

12. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 11, en donde VH CDR2 comprende E en el residuo de Kabat H54 y/o I en el residuo de Kabat H57.

13. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 12, en donde VH CDR2 tiene una secuencia de aminoácidos sec. con núm. de ident.: 4.

14. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 13, en donde el residuo de Kabat H17 en el marco de dominio VH es S.

15. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 14, que comprende un dominio de anticuerpo que comprende regiones determinantes de la complementariedad CDR1, CDR2 y CDR3 y un marco.

16. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 15, en donde VL CDR3 comprende uno o más de los siguientes

residuos: S, T o M en el residuo de Kabat L90; D, E, Q, S, M o T en el residuo de Kabat L92; S, P, I o V en el residuo de Kabat L96.

17. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 16, en donde el residuo de Kabat L90 es S.

18. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 16 o reivindicación 17, en donde el residuo de Kabat L92 es D o

E.

19. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 16 a 18, en donde el residuo de Kabat L95A es

S.

20. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 16 a 19, en donde el residuo de Kabat L96 es

S.

21. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 15 o 16, en donde VL CDR3 tiene una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste de la sec. con núm. de ident.: 10, sec. con núm. de ident.: 20, sec. con núm. de ident.: 40, sec. con núm. de ident.: 50, sec. con núm. de ident.: 60, sec. con núm. de ident.: 70, sec. con núm. de ident.: 80, sec. con núm. de ident.: 90, sec. con núm. de ident.: 100, SEQ ID NO : 110, sec. con núm. de ident.: 120, sec. con núm. de ident.: 130, sec. con núm. de ident.: 140, sec. con núm. de ident.: 150, sec. con núm. de ident.: 160, SEQ ID NO : 170, sec. con núm. de ident.: 180, sec. con núm. de ident.: 190 y sec. con núm. de ident.: 200.

22. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 15 a 21, en donde VL CDR1 comprende uno o

más de los siguientes residuos: S en el residuo de Kabat 27A; N en el residuo de Kabat 27B ; I en el residuo de Kabat 27C; D en el residuo de Kabat 32.

23. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 15 a 22, en donde VL CDR1 tiene una secuencia de aminoácidos sec. con núm. de ident. : 8.

24. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 15 a 23, en donde VL CDR2 comprende uno o

más de los siguientes residuos: N en el residuo de Kabat 51; N en el residuo de Kabat 52; K en el residuo de Kabat 53.

25. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 15 a 24, en donde VL CDR2 tiene una secuencia de aminoácidos sec. con núm. de ident.: 9.

26. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2 a 25, que comprende un dominio VH de anticuerpo en el cual el residuo de Kabat H94 es I.

27. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26, que se une al dominio extra-celular humano de GM-CSFRa con una afinidad (KD) de 1 nM o menos en un ensayo de resonancia de plasmón superficial.

28. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 27, que se une al dominio extra-celular humano de GM-CSFRa con una afinidad (KD) de 0.5 nM o menos en un ensayo de resonancia de plasmón superficial.

29. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que tiene una potencia neutralizante IC50 de 60 pM o menos en un ensayo de proliferación de células TF-1 con GM-CSF humano 7 pM.

30. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 29, que tiene una potencia neutralizante IC50 de 10 pM o menos en un ensayo de proliferación de células TF-1con GM-CSF humano 7 pM.

31. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que tiene una potencia neutralizante IC50 de 50 pM o menos en un ensayo de cambio de forma del granulocito humano con GM-CSF humano 7 pM.

32. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 31, que tiene una potencia neutralizante IC50 de 25 pM o menos en un en un ensayo de cambio de forma del granulocito humano con GM-CSF humano 7 pM.

33. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que tiene una potencia neutralizante IC50 de 100 pM o menos en un ensayo de liberación de monocitos TNFa con GM-CSF humano 1 nM.

34. Un miembro de unión aislado para GM-CSFRa humano, en donde el miembro de unión comprende una molécula de anticuerpo que comprende un conjunto de regiones determinantes de la complementariedad HCDR1, HCDR2 y HCDR3, LCDR1, LCDR2 y LCDR3, en donde:

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 3, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 4, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 5, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 8, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 9 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 10;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 13, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 14, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 15, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 18, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 19 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 20;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 33, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 34, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 35, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 38, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 39 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 40;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 43, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 44, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 45, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 48, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 49 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 50;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 53, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 54, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 55, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 58, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 59 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 60;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 63, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 64, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 65, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 68, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 69 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 70;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 73, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 74, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 75, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 78, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 79 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 80;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 83, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 84, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 85, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 88, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 89 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 90;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 93, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 94, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 95, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 98, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 99 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 100;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 103, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 104, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 105, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 108, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 109 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 110 ;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 113, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 114, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 115, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 118, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 119 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 120;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 123, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 124, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 125, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 128, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 129 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 130;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 133, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 134, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 135, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 138, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 139 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 140;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 143, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 144, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 145, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 148, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 149 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 150;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 153, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 154, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 155, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 158, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 159 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 160;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 163, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 164, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 165, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 168, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 169 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 170;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 173, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 174, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 175, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 178, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 179 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 180;

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 183, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 184, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 185, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 188, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 189 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 190; or

HCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 193, HCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 194, HCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 195, LCDR1 es la sec. con núm. de ident.: 198, LCDR2 es la sec. con núm. de ident.: 199 y LCDR3 es la sec. con núm. de ident.: 200.

35. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 34, en donde:

HCDR1 es la secuencia de aminoácido sec. con núm. de ident.: 53; HCDR2 es la secuencia de aminoácido sec. con núm. de ident.: 54; HCDR3 es la secuencia de aminoácido sec. con núm. de ident.: 55; LCDR1 es la secuencia de aminoácido sec. con núm. de ident.: 58; LCDR2 es la secuencia de aminoácido sec. con núm. de ident.: 59; y LCDR3 es la secuencia de aminoácido sec. con núm. de ident.: 60.

36. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 35, en donde el miembro de unión es una molécula de anticuerpo que comprende una secuencia de aminoácido del dominio VH de anticuerpo sec. con núm. de ident.: 52 y una secuencia de aminoácido del dominio VL sec. con núm. de ident.: 57.

37. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 36, en donde la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo humana o humanizada.

38. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 37, en donde el marco de dominio VH es un marco de la línea germinal humana VH1 DP5 o VH3 DP47 .

39. Un miembro de unión de acuerdo con la reivindicación 37 o reivindicación 38, que comprende un dominio VL en donde el marco de dominio VL 3 es un marco de la línea germinal humana VLambda 1 DPL8, VLambda 1 DPL3 o VLambda 6_6a .

40. Una molécula de anticuerpo aislada para GM-CSFRa humano, que inhibe la unión de GM-CSF a GM-CSFRa, en donde el miembro de unión se une al dominio extracelular de GM-CSFRa humano con una afinidad (Ko) de menos que 1 nM en un ensayo de resonancia de plasmón superficial, y en donde el miembro de unión comprende un dominio VH con la secuencia de aminoácidos del dominio VH mostrada en la sec. con núm. de ident.: 52 o una variante de la misma con una o dos alteraciones de aminoácidos, yun dominio VL con la secuencia de aminoácidos del dominio VL mostrada en la sec. con núm. de ident.: 57 o una variante de la misma con una o dos alteraciones de aminoácidos; en donde las alteraciones de aminoácidos se seleccionan del grupo que consiste de sustituciones, inserciones y deleciones.

41. Una molécula de anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 40, en donde la secuencia de aminoácidos del dominio VH es la sec. con núm. de ident.: 52 y la secuencia de aminoácidos del dominio VL es la sec. con núm. de ident.: 218.

42. Un miembro de unión de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 39, o una molécula de anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 40 o reivindicación 41, en donde la molécula de anticuerpo es IgG4.

43. Una molécula de ácido nucleico aislada que comprende una secuencia de ácido nucleico que codifica un miembro de unión o molécula de anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 39.

44. Una célula hospedera in vitro que contiene una molécula de ácido nucleico de acuerdo con la reivindicación 43.

45. Un método para producir un miembro de unión o molécula de anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 41, que comprende cultivar células huésped de acuerdo con la reivindicación 44.

46. Un método de acuerdo con la reivindicación 45, que además comprende purificar el miembro de unión.

47. Uso de un miembro de unión o molécula de anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 41 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la artritis reumatoide, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica o leucemia mieloide.

48. Un miembro de unión o molécula de anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 41 para usar en el tratamiento de artritis reumatoide, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica o leucemia mieloide.