COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS QUE CONTIENEN UN EPÍTOPE DE LA PROTEÍNA GPIIIA DE PLAQUETA SANGUÍNEA.

El uso de un antígeno plaquetario humano eficaz inmunológicamente (HPA) o un fragmento péptido suyo en la fabricación de un medicamento para la prevención o gestión de una condición causada por la exposición a un alelo antihético de una plaqueta por transfusión o durante el embarazo por la tolerización en donde el medicamento se formula para la liberación a través de rutas no invasivas

Composiciones farmacéuticas que contienen un epítope de la proteína GPIIIa de plaqueta sanguínea.

La presente invención se refiere a las composiciones y métodos para el tratamiento de enfermedades relacionadas con las plaquetas, en concreto, la trombocitopenia fetomaternal aloinmune.

Las plaquetas desempeñan una función importante en la hemostasis primaria y secundaria. Los antígenos del grupo sanguíneo plaquetario están presentes en las glucoproteínas de superficie y se expresan como pares de alelos [a o b], que son codominantes. Esto resulta en individuos que presentan genotipos a/a, a/b o b/b del antígeno de plaquetas humanas (HPA). Los individuos que son negativos para un alelo concreto, pueden inmunizarse si se expone al alelo antihético (por embarazo o transfusión de sangre) y producir respuestas aloanticuerpos. Estos anticuerpos son clínicamente importantes y pueden ocasionar la trombocitopenia fetomaternal aloinmune (FMAI), o reacciones y resistencia a las transfusiones de plaquetas dadas para evitar el sangrado.

El antígeno HPA-1a ha sido reconocido como el más antígeno más inmunogénico y clínicamente más importante del sistema HPA en los caucásicos. Localizado en la membrana plaquetaria GPIIIa, este antígeno a menudo provoca FMAIT cuando se produce la incompatibilidad entre los antígenos de plaquetas maternales y fetales. HPA-1a, considerado como un antígeno B-celular conformacional, surge como resultado del polimorfismo, ocasionando un cambio de citosina a timina en la posición 196 del gen para la glucoproteína plaquetaria IIia. Esto provoca la sustitución de prolina (HPA-1b) por leucina (HPA-1a) en el aminoácido 33 de la proteína GPIIIa. FMAIT se produce cuando los anticuerpos antiplaquetarios de una madre sensibilizada con HPA-1b1b cruza la placenta y provoca la trombocitopenia en un feto HPA-1a o en el neonato.

Aproximadamente el 2-3% de la población son homocigotos HPA-1b y el 10% desarrolla anticuerpos anti-HPA-1a durante el embarazo. La producción de aloanticuerpos está fuertemente asociada con la herencia de los genes MHC, con más del 99% que transporta el DRB3*0101, sugiriendo que el desarrollo del aloanticuerpo es restringido a HLA. Los trabajos anteriores se han limitado al estudio del péptido-MHC, Clase II. Se ha mostrado, utilizando moléculas DRB3*Q101 recombinantes y péptidos que corresponden al polimorfismo HPA-1a y HPA-1b, que la molécula MHC de la clase II se vincula sólo al péptido que contiene el polimorfismo HPA-1a. Se ha demostrado que sólo el 35% de las mujeres con homocigoto HPA-1b que portan DRB3*0101 desarrollarán realmente aloanticuerpos, lo que indica que la presentación de MHC clase II de péptidos a células T es compleja. En concreto, dichos estudios de MHC clase II vinculante no tienen en cuenta el aparente efecto protector de los alelos DRB1*15.

La incidencia estimada de la trombocitopenia aloinmune grave es aproximadamente 1 de cada 1100 neonatos. Las manifestaciones clínicas varían desde la púrpura leve a la hemorragia intracraneal, en donde los casos graves derivan en la muerte o en la discapacidad permanente. En FMAIT el primer nacido está afectado en un 40-60% de los casos. En la actualidad no existen medidas preventivas ni procedimientos de análisis de rutina antenatales en marcha para identificar a las mujeres con riesgo de aloinmunización a HPA-1a. El diagnóstico de los bebés afectados se realiza después de un descubrimiento inesperado de trombocitopenia grave después cuando ha nacido. Transfundir una dosis adecuada de ABO, Rh compatible y plaquetas negativas HPA-1a suele ser el tratamiento que se elige después que haya nacido el bebé, lo cual puede ser angustioso para madre e hijo. La transfusión plaquetaria intrauterina y la administración de altas dosis de inmunoglobulina intravenosa (IVIg) y esteroides a las madres es un tema controvertido y, generalmente, se reserva para casos donde el riesgo estimado de trombocitopenia grave fetal o neonatal es considerable. En la actualidad, no existen predictores fiables de la enfermedad fetal grave y el tratamiento se basa en la medición de niveles de anticuerpos maternales y recuentos de plaquetas fetales, que todos tienen sus limitaciones.

Se ha prestado una atención especial a la caracterización y a la definición de la molécula GPIIIa y a resolver exactamente la estructura molecular de la célula B aloantigénica determinante en GPIIIa responsable por provocar anticuerpos anti HPA-1a. Mientras que la identificación molecular del epitopo aloantigénico para los anticuerpos anti-HPA-1a y la función de las células B han mejorado el entendimiento de los requisitos estructurales para el reconocimiento por parte de aloanticuerpos patogénicos, hay pocos estudios para entender la implicación de la célula T y, además, no son concluyentes.

Es objeto de la presente invención solucionar las desventajas de la técnica anterior.

Según un aspecto de la presente invención, se proporciona el uso del antígeno plaquetario humano (HPA) efectivo inmunológicamente o un fragmento péptido suyo en la fabricación de un medicamento para la prevención o la gestión de una condición provocada por la exposición a un alelo anthético de una plaqueta por transfusión o durante el embarazo por tolerización en donde el medicamento se formula para la liberación por medio de vías no invasivas.

La presente invención permite la prevención o gestión de un estado provocado por exposición a un alelo antihético (por ejemplo FMAIT o refractoriedad de transfusión plaquetaria) por tolerización. La tolerización es un método no invasivo, que implica proporcionar cantidades relativamente pequeñas de una proteína a un paciente, generalmente, a través del tejido mucoso. Posteriormente, el sistema inmunitario del paciente se convierte en tolerante al péptido o la proteína y, por tanto, no considera extraños a la proteína o el péptido. En consecuencia, no surge ninguna respuesta inmuno-efectora.

Si, por ejemplo, una mujer es HPA-1b1b, entonces los fragmentos efectivos inmunológicamente del antígeno HPA-1a se le pueden administrar por medio de una ruta tolerogénica (por ejemplo, la mucosa). Si la mujer se queda embarazada con un feto que sea HPA-1a1b, entonces no es probable que el feto desarrolle FMAIT porque la mujer es menos propensa a establecer una respuesta inmune contra las plaquetas del feto. Además, si una mujer ya había tenido un bebé con FMAIT, entonces se le podría administrar un fragmento efectivo inmunológicamente o fragmentos de antígeno HPA-1a para reducir la probabilidad de que su siguiente hijo nazca con FMAIT.

Las condiciones cuyas composiciones de la presente invención pueden evitar o gestionar, incluye FMAIT, púrpura postransfusional debido a anti-HPA-1a o refractoriedad plaquetaria.

La tolerización como terapia preventiva o de gestión para estas condiciones es más aceptable y menos penosa que tener que dar una transfusión coincidente, un tratamiento de esteroides o IVIgG, que son los tratamientos actuales para FMAIT.

El tratamiento para la refractoriedad plaquetaria (resistencia) implica la tipificación plaquetaria extensa y la administración de plaquetas coincidentes, que consume tiempo y es costoso.

La púrpura postransfusional puede poner en peligro la vida y el tratamiento actual de elección sería evitar las transfusiones plaquetarias y la administración de IVIgG.

FMAIT es una enfermedad provocada por la destrucción de plaquetas como resultado de una madre que tiene una respuesta inmune a las plaquetas del neonato.

HPA es una clase de proteína plaquetaria que cambia con el genotipo. Esto puede resultar en aloanticuerpos producidos si un individuo que es negativo para un alelo HPA concreto se expone a dicho alelo. A este respecto, sólo un individuo que sea homocigoto (es decir, 1a1a o 1b1b) está en riesgo de aloinmunización.

El HPA, que se utiliza en la composición de la presente invención, puede ser, pero está limitado a HPA-1a, HPA-1b, HPA-2a, HPA-2b, HPA-3a, HPA-3b, HPA-4a, HPA-4b, HPA-5a, HPA-5b, HPA-6a, HPA-6b, HPA-7a, HPA-7b, HPA-8a, HPA-8b, HPA-9a, HPA-9b, HPA-10a, HPA-10b, HPA-11a, HPA-11b u otros derivados o secuencias con reacción cruzada con ellos.

El genotipo "a" es el genotipo más común de los dos.

HPA-1a se encuentra predominantemente en los caucásicos y tiene el polimorfismo con nucleótido sencillo citosina a timina en la posición 196 que resulta en la sustitución de...

1. El uso de un antígeno plaquetario humano eficaz inmunológicamente (HPA) o un fragmento péptido suyo en la fabricación de un medicamento para la prevención o gestión de una condición causada por la exposición a un alelo antihético de una plaqueta por transfusión o durante el embarazo por la tolerización en donde el medicamento se formula para la liberación a través de rutas no invasivas.

2. El uso según la reivindicación 1 en donde la condición es la trombocitopenia con respuesta aloinmune fetomaternal (FMAIT), púrpura postransfusional o refractoriedad plaquetaria.

3. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2 en donde HPA se selecciona a partir de HPA-1a, HPA-1b, HPA-2a, HPA-2b, HPA-3a, HPA-3b, HPA-4a, HPA-4b, HPA-5a, HPA-5b, HPA-6a, HPA-6b, HPA-7a, HPA-7b, HPA-8a, HPA-8b, HPA-9a, HPA-9b, HPA-10a, HPA-10b, HPA-11a, HPA-11b.

4. El uso según cualquier reivindicación anterior en donde HPA tiene el genotipo HPA-1a.

5. El uso según la reivindicación 4 en donde HPA-1a tiene la secuencia ID. SEC. Número: 1, 2, 3, 4, 5, 6 o 7.

6. El uso según cualquier reivindicación anterior en donde la composición se formula para la liberación a través del tejido mucoso.