Cepa de Lactobacillus helveticus I-3434 depositada el 25.05.05 en la CNCM (Colección Nacional de Cultivos de Microorganismos),

28 rue du Docteur Roux, 75724 París, Francia, según las disposiciones del Tratado de Budapest

Sector de la técnica

La presente invención se refiere a cepas novedosas de Lactobacillus helveticus, así como a sus aplicaciones en el campo agroalimentario. Más particularmente, la presente invención propone cepas de Lactobacillus helveticus que presentan grandes capacidades de producción de péptidos antihipertensión.

Estado de la técnica

La hipertensión afecta a una parte importante de la población. El uso del péptido VPP (Val Pro Pro) y de péptidos que contienen la secuencia VPP como agentes que pueden reducir la tensión arterial mediante la inhibición de la enzima de conversión de la angiotensina (ACE) se ha descrito en el documento EP 0 583 074. También se ha descrito un efecto similar del tripéptido IPP (Ile Pro Pro) en la bibliografía. Estos péptidos inhiben la ACE bloqueando su sitio activo e impiden así que se vuelva activa la angiotensina.

Se conoce que las dos secuencias VPP e IPP están presentes en la beta-caseína bovina y que la hidrólisis adecuada de esta caseína (o más generalmente de la leche que la contiene) permite obtener dichos tripéptidos. Numerosos estudios en animales y en el ser humano han demostrado que la ingesta diaria de algunos miligramos de estos tripéptidos permite reducir eficazmente la tensión arterial, particularmente en los sujetos hipertensos, reduciendo en la misma proporción el riesgo de accidente cardiovascular.

Péptidos procedentes de una leche fermentada por Lactobacillus helveticus han mostrado in vivo su efecto inhibidor de la ACE (ACEI) y estos péptidos han podido encontrarse a nivel de la aorta de las ratas que participaron en el estudio (Masuda O. et al., 1996. J. Nutr. 126, 3063-8). Otros estudios también han mostrado más específicamente una disminución de la tensión arterial en ratas hipertensas tras la ingesta de péptidos procedentes de una leche fermentada por L. helveticus (Yamamoto N. et al., 1994. Biosci. Biotech. Biochem. 58, 776-8).

En el ser humano, la misma leche fermentada también ha permitido disminuir la tensión arterial sistólica (Hata. et al.; 1996. Am. J. Clin. Nutr., 64, 767-71). Un estudio más reciente confirma que los péptidos presentes en el producto AMEAL S® comercializado por la empresa CALPIS reducen de manera significativa la tensión arterial en sujetos que tienen una tensión arterial superior a la normal (Mizuno et al., 2005. British Journal of Nutrition; vol. 94, número 1, 84-91).

En otro estudio reciente (Jauhiainen et al.; 2005. Am. J. of Hypertension, 18: 1600-1605) se plantea la hipótesis según la cual el mecanismo de acción mencionado anteriormente (inhibición de la ACE) para explicar el efecto antihipertensivo de una leche fermentada por un L. helveticus podría no obstante no ser el mecanismo de acción determinante en el ser humano.

Una gran mayoría de los Lactobacillus helveticus puede producir los tripéptidos IPP y VPP mediante fermentación de leche, pero las cantidades producidas pueden ser variables. El documento EP 1 016 709 describe un medio para producir los tripéptidos VPP y IPP mediante fermentación de leche con ayuda de cepas de bacterias lácticas específicas que pertenecen a la especie Lactobacillus helveticus.

Sin embargo, resulta útil poder disponer de cepas que presenten capacidades para producir cantidades de tripéptidos VPP y/o IPP lo más elevadas posible.

Objeto de la invención

La presente invención propone cepas que presentan tales capacidades. En particular, la presente invención propone cepas de Lactobacillus helveticus que permiten la preparación de productos alimenticios que presentan contenidos muy grandes en IPP y/o VPP.

Por cepa se entiende, en el sentido de la presente invención, cualquier cultivo, generalmente puro, de un microorganismo, obtenido a partir de una única célula o de una colonia aislada.

Por variante o mutante de una cepa X se pretende designar, en el sentido de la presente invención, cualquier cepa obtenida a partir de una cepa de referencia X. En el presente contexto, se usarán más particularmente los términos “variante” para designar una cepa obtenida principalmente mediante mutación y selección a partir de una cepa de referencia X y “mutante” para designar más específicamente una cepa obtenida mediante técnicas de mutagénesis al azar o dirigida (por ejemplo transformación genética con ayuda de vectores), aplicadas a la cepa X.

Los mutantes o variantes de las cepas según la presente invención se verán afectados evidentemente por la protección conferida por esta patente dado que conservan los aspectos esenciales de la invención, concretamente la capacidad para producir grandes cantidades de IPP y/o VPP.

Por cepa con “fenotipo de fructosa negativo”, se entiende cualquier cepa que no tiene la capacidad para metabolizar la fructosa.

Por medio lácteo se entiende cualquier medio que contiene proteínas de la leche, por ejemplo una leche bovina normalizada al 4% en proteínas con leche bovina en polvo (desnatada o no) o con leche concentrada.

Por producto lácteo, en el sentido de la presente invención, se entiende, además de la leche, cualquier producto derivado de la leche, tal como nata, helado, mantequilla, queso, yogur, leche fermentada; los productos secundarios, como suero de la leche, caseína así como diversos alimentos preparados que contienen como ingrediente principal leche o constituyentes de la leche. Entre los productos lácteos, los productos lácteos fermentados comprenden entre otros yogures, leches fermentadas, quesos blancos, kéfires, quesos, productos lácteos probióticos y más generalmente cualquier producto lácteo que se haya sometido al menos a una etapa de fermentación. Dicha leche es generalmente leche de vaca, pero también puede ser leche de otros mamíferos, tales como cabra, oveja, yegua, camella, búfala.

Por producto alimenticio, en el sentido de la presente invención, se entiende cualquier producto destinado a la nutrición humana o animal. En particular, los productos alimenticios comprenden productos destinados a la alimentación de lactantes, de niños pequeños, de adolescentes y de adultos. Los productos alimenticios según la invención pueden contener en su totalidad o en parte, al menos un producto lácteo fermentado según la invención. Los productos alimenticios según la invención también pueden contener otros ingredientes usados habitualmente en la industria agroalimentaria, tales como aditivos, conservantes, frutas o extractos de frutas, aromas, colorantes, agentes de textura, cereales, trozos de chocolate, etc.

Por fermento se entiende, en el sentido de la presente invención, cualquier composición que contiene al menos una cepa viva de microorganismo susceptible de fermentar un medio dado. Entre los fermentos, los fermentos lácticos son composiciones que contienen al menos una cepa viva de microorganismo susceptible de fermentar un medio lácteo.

Según un modo de realización, la invención se refiere a la cepa de Lactobacillus helveticus I-3434 depositada el

25.05.05 en la CNCM (Colección Nacional de Cultivos de Microorganismos), 28 rue du Docteur Roux, 75724 París, Francia, según las disposiciones del Tratado de Budapest.

Según un modo de realización, la presente invención se refiere a las variantes y los mutantes de la cepa de Lactobacillus helveticus 1-3434 depositada el 25.05.05 en la CNCM (Colección Nacional de Cultivos de Microorganismos), 28 rue du Docteur Roux, 75724 París, Francia, según las disposiciones del Tratado de Budapest.

Según un modo de realización, la presente invención se refiere a una cepa de Lactobacillus helveticus que puede, mediante fermentación a una temperatura de entre 25 y 40ºC, más preferiblemente entre 27 y 37ºC e incluso más preferiblemente a 32ºC de un medio lácteo con un contenido total en proteínas superior o igual al 2% (p/p), preferiblemente entre el 2 y el 10% (p/p), más preferiblemente entre el 2,5 y el 6% e incluso más preferiblemente igual al 4%, producir los tripéptidos de secuencia IPP y/o VPP en grandes concentraciones.

Un medio de expresar la concentración en tripéptidos de manera sencilla es expresarla en concentración equivalente de VPP [VPPeq].

Se expresa en mg/kg: [VPPeq] = [VPP] + (9/5 x [IPP])

Así, según un modo de realización, las cepas de Lactobacillus helveticus según la invención pueden ventajosamente, mediante fermentación, producir los tripéptidos de... [Seguir leyendo]

1. Cepa de Lactobacillus helveticus I-3434 depositada el 25.05.05 en la CNCM (Colección Nacional de Cultivos de Microorganismos), 28 rue du Docteur Roux, 75724 París, Francia, según las disposiciones del Tratado de Budapest.

2. Uso de la cepa de Lactobacillus helveticus según la reivindicación 1, para la preparación de un producto alimenticio o farmacéutico, concretamente de un producto lácteo fermentado.

3. Uso según la reivindicación 2, tal que dicho producto alimenticio o farmacéutico tiene propiedades antihipertensivas.

4. Producto alimenticio, concretamente producto lácteo fermentado, que comprende la cepa de Lactobacillus helveticus según la reivindicación 1.

5. Producto alimenticio según la reivindicación 4, que contiene al menos 106, preferiblemente al menos 107, preferiblemente al menos 108 UFC/ml de bacterias Lactobacillus helveticus vivas.

6. Producto alimenticio según una cualquiera de las reivindicaciones 4-5, que contiene al menos 25 mg, preferiblemente al menos 50 mg, más preferiblemente al menos 75 mg de VPPeq por kg de dicho producto alimenticio.

7. Producto alimenticio según una cualquiera de las reivindicaciones 4-6, que comprende además preparaciones de fruta(s), concretamente trozos y/o zumo de fruta(s).

8. Producto alimenticio según una cualquiera de las reivindicaciones 4-7, que presenta propiedades antihipertensivas.

9. Procedimiento de preparación de un producto alimenticio que comprende las siguientes etapas:

• seleccionar una materia prima que contiene proteínas de la leche, concretamente proteínas que contienen las secuencias peptídicas IPP y/o VPP;

• seleccionar la cepa de Lactobacillus helveticus según la reivindicación 1,

• sembrar dicha materia prima con dicha cepa,

• fermentar dicha materia prima durante 12-30 horas a 25-40ºC, • opcionalmente, termizar el producto fermentado obtenido.