Un anticuerpo humano, humanizado o quimérico aislado que se une a IL-13,

donde el anticuerpo humano aislado se une a IL-13 humana con una KD de menos de 55 pM, donde dicha KD se determina por medio de un análisis Biacore o KinExA basado en una solución y donde: i. el anticuerpo se une específicamente a un polipéptido que consiste en los aminoácidos 20-29 del SEQ ID NO: 96; o ii. el anticuerpo se une a los residuos 21-33 o 70-80 del SEQ ID NO: 72; o iii. el anticuerpo comprende los aminoácidos del SEQ ID NO: 50 de la cadena pesada y comprende los aminoácidos del SEQ ID NO: 52 de la cadena ligera; o iv. el anticuerpo comprende los aminoácidos del SEQ ID NO: 38 de la cadena pesada y comprende los aminoácidos del SEQ ID NO: 40 de la cadena ligera; o v. el anticuerpo comprende los aminoácidos de las CDR1, CDR2 y CDR3 del SEQ ID NO: 50 de la cadena pesada, como se muestra en la Tabla 18 y comprende los aminoácidos de las CDR1, CDR2 y CDR3 del SEQ ID NO: 52 de la cadena ligera, como se muestra en la Tabla 20; o vi. el anticuerpo comprende los aminoácidos de las CDR1, CDR2 y CDR3 del SEQ ID NO: 38 de la cadena pesada, como se muestra en la Tabla 18 y comprende los aminoácidos de las CDR1, CDR2 y CDR3 del SEQ ID NO: 40 de la cadena ligera, como se muestra en la Tabla 20

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención hace referencia a anticuerpos humanos que se unen específicamente a interleuquina-13 y pueden afectar a la actividad de IL-13, así como a los ácidos nucleicos que codifican tales anticuerpos, a las células anfitrionas transformadas con dicho ácido nucleico, a un método para elaborar los anticuerpos reivindicados, a un medicamento que contiene los anticuerpos reivindicados y al uso de los anticuerpos en el tratamiento de un trastorno relacionado con IL-13.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La interleuquina 13 (IL-13) es una citoquina que fue reconocida primero por sus efectos sobre las células B y los monocitos, donde regula al alza la expresión de clase II, promueve el cambio de clase IgE e inhibe la producción de citoquinas inflamatorias. El receptor de IL-13 comparte la cadena alfa del receptor de IL-4 con el receptor de IL-4. Como resultado, la IL-13 tiene muchas actividades biológicas similares a IL-4.

La IL-13 inhibe la liberación de citoquinas proinflamatorias y tiene actividad anti-inflamatoria in vivo. La IL-13 juega un papel en las respuestas alérgicas mediadas por IgE y es un mediador central del asma alérgica (Wills-Karp M., Curr. Opin. Pulm. Med., 2003; 9:21-27). En el pulmón regula la inflamación eosinofílica, la secreción de mucus, y la hipersensibilidad de las vías respiratorias. Además del asma, la IL-13 está implicada en la patogénesis de un gran número de enfermedades (Wynn TA. Annu. Rev. Immunol. 2003, 21:425-456).

La solicitud de Patente WO 03/0846451 describe el uso de un anticuerpo anti-IL-13 de ratón de rata monoclonal neutralizador en un modelo de asma aguda inducida por ovoalbúmina en ratones. El anticuerpo anti-IL-13 inhibe la hipersensibilidad de las vías respiratorias, la hiperplasia de las células caliciformes y la producción de mucus. Además, el tratamiento con el anticuerpo también inhibe la producción de IL-5, IL-6, eotaxina, KC, MIP-1 y MCP-1 en el pulmón.

COMPENDIO DE LA INVENCIÓN

La invención es la propuesta en las reivindicaciones.

Los aspectos de la invención hacen referencia a anticuerpos y medicamentos para tratar trastornos relacionados con IL-13.

Los anticuerpos aislados pueden ser anticuerpos monoclonales o anticuerpos quiméricos y/o anticuerpos humanos o humanizados.

Una realización incluye moléculas de ácido nucleico aisladas que codifican cualquiera de los anticuerpos descritos en la presente memoria.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

La invención se comprenderá mejor a partir de la Descripción Detallada y de los dibujos adjuntos, que están destinados a ilustrar y no a limitar la invención.

La FIG.1 muestra una representación gráfica de la concentración de anticuerpo relativa frente a los datos de neutralización para cada pocillo. Los datos se utilizan para identificar pocillos con los anticuerpos de potencia más elevada.

La FIG. 2 es una representación gráfica que representa la relación de un DO- ELISA de cada anticuerpo frente a la concentración de anticuerpo a un recubrimiento con antígeno de 31 ng/mL.

La FIG. 3 es un gráfico que representa el porcentaje de inhibición de la liberación de eotaxina inducida por IL-13 por anticuerpos recombinantes 643 y 731 en comparación con un control de isotipo coincidente.

La FIG. 4 es un diagrama de barras que compara la capacidad de IL-13 o IL-13Q110R par inhibir la unión de 731 o 623 a placas de ELISA recubiertas con IL-13.

La FIG. 5A es un diagrama de barras que compara la competición de receptores sobre la célula entre el anticuerpo 643 y un control de isotipo.

La FIG. 5B es un diagrama de barras que compara la competición de receptores sobre la célula entre el anticuerpo 731 y un control de isotipo.

**(Ver fórmula)**

La FIG. 5C es una viñeta que representa el protocolo y los diferentes resultados pronosticados a partir de la FIG. 5A y la FIG. 5E. La FIG. 5D es una viñeta que representa el protocolo y los diferentes resultados pronosticados a partir de la FIG. 5B. La FIG. 5E es un diagrama de barras que compara la competición de receptores sobre la célula entre el anticuerpo

623 y un control de isotipo.

La FIG. 6A muestra el alineamiento de un péptido derivado de la presentación en fagos reconocido por el anticuerpo 693 y parte de la secuencia de IL-13. La FIG. 6B es un diagrama que muestra la estructura secundaria de IL-13 (SEQ ID NO: 72) e indica qué regiones de

la IL-13 humana fueron remplazadas por IL-13 de ratón para la construcción de las proteínas quiméricas.

La FIG. 7A y la FIG. 7B son diagramas de barras que demuestran que las células T CD4+ de ratones inmunizados con IL-13 producen IL-13 humana pero no IL-13 murina. La FIG. 8 es un gráfico que demuestra que los anticuerpos anti-IL-13 731 y 623 inhiben la hipersensibilidad de las

vías respiratorias. La FIG. 9 es un diagrama de barras que demuestra que 731 y 623 inhiben la producción de mucus. La FIG. 10 es una descripción de una secuencia de aminoácidos que pone de relieve un sitio de unión de mAb 623. Las FIG. 11A-D son gráficos que representan el porcentaje de inhibición de liberación de eotaxina inducida por IL-13

o la variante IL-13Q110R por los anticuerpos recombinantes 623 y 731 en comparación con un control de isotipo coincidente.

Las FIG. 12A y 12B son gráficos que demuestran la inhibición de la proliferación de la línea celular L-1236 (A) y HDLM-2 (B) por 623 y 731. Se añadieron mAb 623, mAb 731 o control de isotipo coincidente a la placa para concentraciones finales de 0,017 a 330 nM (titulado 1:3).

La FIG. 13 es un gráfico que presenta el impacto de mAb 623 y 731 y hIL-13Ralfa2Fc sobre la expresión de CD23 en células B de sangre completa.

La FIG. 14 es un gráfico que presenta la inhibición de la producción de mucus inducida por OVA por mAb 623 y mAb 731 en ratones humanizados para IL-13.

La FIG. 15 es un gráfico que presenta un experimento en el cual el tratamiento con mAb 623 o 731 tuvo un pequeño efecto observable sobre el reclutamiento de leucocitos inducido por OVA en BALF.

La FIG. 16 es un gráfico que presenta la inhibición de AHR inducida por OVA por 623 y 731 en ratones humanizados para IL-13 de una manera sensible a la dosificación.

La FIG. 17 es un gráfico que presenta la inhibición de mucus inducida por OVA por 623 y 731 en ratones humanizados para IL-13 de una manera sensible a la dosificación.

La FIG. 18 es un gráfico que presenta el efecto de 623 y 731 sobre la infiltración de leucocitos inducida por OVA en BALF de ratones humanizados para IL-13 de una manera sensible a la dosificación.

La FIG. 19 es un gráfico que presenta una inhibición de la respuesta a la dosis de AHR inducida por HDM por 623 y

La FIG. 20 es un gráfico que presenta una inhibición de la respuesta a la dosis de la producción de mucus inducida por HDM por 623 y 731 en ratones humanizados para IL-13.

La FIG. 21 es un gráfico que presenta una inhibición de la respuesta a la dosis de 623 y 731 sobre la infiltración de leucocitos inducida por HDM en BALF de ratones humanizados para IL-13.

La FIG. 22A y 22B son gráficos que presentan el efecto de la administración profiláctica y terapéutica de 623 sobre la AHR inducida por HDM y la infiltración de leucocitos en BALF de ratones humanizados para IL-13.

La FIG. 23 es un gráfico que presenta los niveles de TARC en suero inducidos por OVA en ratones de tipo salvaje.

**(Ver fórmula)**

La FIG. 24 es un gráfico que presenta los niveles de eotaxina en suero inducidos por OVA en ratones de tipo salvaje.

La FIG. 25 es un gráfico que presenta los niveles de C10 en suero inducidos por OVA en ratones de tipo salvaje.

La FIG. 26 es un gráfico que presenta la inhibición por el mAb 623 de los niveles de TARC en suero inducidos por OVA en ratones humanizados para IL-13.

La FIG. 27 es un gráfico que presenta la inhibición por el mAb 623 de los niveles de eotaxina en suero inducidos por OVA en ratones humanizados para IL-13.

La FIG. 28 es un gráfico que presenta el efecto del tratamiento con el mAb 623 sobre los niveles... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo humano, humanizado o quimérico aislado que se une a IL-13, donde el anticuerpo humano aislado se une a IL-13 humana con una KD de menos de 55 pM, donde dicha KD se determina por medio de un análisis Biacore o KinExA basado en una solución y donde:

i. el anticuerpo se une específicamente a un polipéptido que consiste en los aminoácidos 20-29 del SEQ ID NO: 96; o

ii. el anticuerpo se une a los residuos 21-33 o 70-80 del SEQ ID NO: 72; o

iii. el anticuerpo comprende los aminoácidos del SEQ ID NO: 50 de la cadena pesada y comprende los aminoácidos del SEQ ID NO: 52 de la cadena ligera; o

iv. el anticuerpo comprende los aminoácidos del SEQ ID NO: 38 de la cadena pesada y comprende los aminoácidos del SEQ ID NO: 40 de la cadena ligera; o

v. el anticuerpo comprende los aminoácidos de las CDR1, CDR2 y CDR3 del SEQ ID NO: 50 de la cadena pesada, como se muestra en la Tabla 18 y comprende los aminoácidos de las CDR1, CDR2 y CDR3 del SEQ ID NO: 52 de la cadena ligera, como se muestra en la Tabla 20; o

vi. el anticuerpo comprende los aminoácidos de las CDR1, CDR2 y CDR3 del SEQ ID NO: 38 de la cadena pesada, como se muestra en la Tabla 18 y comprende los aminoácidos de las CDR1, CDR2 y CDR3 del SEQ ID NO: 40 de la cadena ligera, como se muestra en la Tabla 20.

2. El anticuerpo humano aislado de la reivindicación 1, donde el anticuerpo humano aislado se une a IL-13 con una KD de menos de 50 pM.

3. El anticuerpo aislado, según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, donde el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.

4. Un medicamento que comprende un anticuerpo aislado, como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

5. Un ácido nucleico que codifica un anticuerpo como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

6. Un vector viral que comprende el ácido nucleico de la reivindicación 5.

7. Una célula anfitriona transformada con un ácido nucleico como se reivindica en la reivindicación 5 o un vector viral como se reivindica en la reivindicación 6.

8. Un método para elaborar un anticuerpo, como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende la expresión del anticuerpo a partir de una célula anfitriona como se reivindica en la reivindicación 7.

9. El anticuerpo humano aislado de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 o semejante anticuerpo en un medicamento como se reivindica en la reivindicación 4, para su uso en el tratamiento de un trastorno relacionado con IL-13.

10. Un anticuerpo aislado o medicamento para su uso como se reivindica en la reivindicación 9, donde el trastorno relacionado con IL-13 es una enfermedad inflamatoria, una enfermedad pulmonar obstructiva crónica o asma.

11. El uso de un anticuerpo, como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno relacionado con IL-13.

12. El uso de un anticuerpo como se reivindica en la reivindicación 11, donde el trastorno relacionado con IL-13 es una enfermedad inflamatoria, una enfermedad pulmonar obstructiva crónica o asma.