PROCEDIMIENTO DE MUTAGENESIS DIRIGIDA MASIVA.

Procedimiento de mutagénesis de un gen diana, que consiste en preparar una serie de N oligonucleótidos,

presentando cada oligonucleótido una secuencia complementaria de una región diferente del gen diana y de una a tres mutaciones colocadas en el centro de la secuencia del oligonucleótido, luego en hacer reaccionar dicha serie de oligonucleótidos con dicho gen diana en condiciones que permiten la producción de copias del gen diana que lleva al menos una mutación, caracterizado porque el gen diana es llevado por un plásmido circular de doble hebra, el conjunto N de dichos oligonucleótidos de la serie, con N superior a 5, cubriendo la totalidad o parte de la secuencia de dicho gen diana, y porque se hace reaccionar dicha serie de oligonucleótidos con el gen diana en presencia de una polimerasa de tal modo que genere después de la selección por una enzima de restricción que permite suprimir las moléculas de ADN metiladas sobre las dos hebras y conservar las que no están metiladas o hemi-metiladas, un banco de genes mutados donde cada mutación procedente de un oligonucleótido diferente está presente en término medio en menos de 1/5 de los genes del banco.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: BIOMETHODES.

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: GENOPOLE INDUSTRIES, 4, RUE PIERRE FONTAINE,91000 EVRY.

Inventor/es: DELCOURT,MARC, BLESA,STEPHANE.

Fecha de Publicación: .

Fecha Concesión Europea: 21 de Febrero de 2007.

Clasificación PCT:

  • C12N15/09 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
  • C12N15/10 C12N 15/00 […] › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
  • C12N15/11 C12N 15/00 […] › Fragmentos de ADN o de ARN; sus formas modificadas (ADN o ARN no empleado en tecnología de recombinación C07H 21/00).
PROCEDIMIENTO DE MUTAGENESIS DIRIGIDA MASIVA.

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