(10/07/2019) Uso de un adaptador vesicular del oligonucleótido para la construcción de una biblioteca de ácidos nucleicos monocatenarios cíclicos en donde dicho adaptador comprende una región bicatenaria emparejada en 5' en un primer terminal del adaptador; una región bicatenaria emparejada en 3' en un segundo terminal del adaptador, que comprende una primera cadena y una segunda cadena complementarias entre sí, en la que la primera cadena comprende un saliente en el extremo 3' de la misma y la segunda cadena comprende una base fosforilada en su extremo 5' para proporcionar un terminal adherente y una región vesicular…

(01/05/2019) Un método para generar un anticuerpo monoclonal, que comprende las etapas de: a) crear una biblioteca de secuencias de ADNc de anticuerpo diana, comprendiendo la creación las etapas de: i) transcribir de forma inversa el ARNm a ADNc, en donde el ARNm se ha aislado de linfocitos aislados procedentes de un sujeto hospedador que se ha inmunizado con un antígeno; ii) amplificar las secuencias de ADNc del anticuerpo diana; y iii) secuenciar las secuencias de ADNc del anticuerpo diana, en donde las secuencias de ADNc del anticuerpo diana amplificadas se secuencian mediante secuenciación masiva paralela; y b) analizar la frecuencia de las secuencias de ADNc del anticuerpo diana secuenciadas, que comprende: i) comparar las frecuencias relativas de las secuencias de ADNc del…

(24/04/2019) Un método de producción de un ácido nucleico objetivo que tiene una secuencia predefinida, comprendiendo el método: proporcionar una pluralidad de fragmentos de ácido nucleico bicatenario de extremos romos que tienen una secuencia de reconocimiento de enzimas de restricción en cada extremo; en donde la pluralidad de fragmentos de ácido nucleico bicatenario de extremos romos se generan a partir de una pluralidad de oligonucleótidos monocatenarios inmovilizados sobre un soporte sólido y se amplifican usando un cebador de amplificación que se une a una secuencia de amplificación ubicada en el extremo 5' y/o el extremo 3', en donde el cebador de amplificación es un cebador universal…

(27/03/2019) Un método para preparar una biblioteca de ADNc a partir de una pluralidad de células individuales, comprendiendo el método las etapas de: (i) liberar ARNm de cada célula individual para proporcionar una pluralidad de muestras de ARNm individuales, en las que el ARNm en cada muestra de ARNm individual es de una única célula; (ii) sintetizar una primera cadena de ADNc a partir del ARNm en cada muestra de ARNm individual con un cebador de síntesis de una primera cadena de ADNc (CDS) que comprende una secuencia de un cebador de amplificación (APS) en 5' y una secuencia complementaria de ARN (RCS) que es al menos parcialmente complementaria a uno o más ARNm en una muestra de ARNm individual, en donde el RCS comprende oligo (dT), hexámeros aleatorios o una secuencia semi-aleatoria no auto-complementaria, e incorporar…

(27/03/2019) Un oligonucleótido aislado, que comprende una primera cadena y una segunda cadena, en las que un primer nucleótido terminal en el extremo 5' de la primera cadena tiene un grupo fosfato, y un segundo nucleótido terminal en el extremo 3' de la primera cadena es didesoxinucleótido; y un tercer nucleótido terminal en el extremo 5' de la segunda cadena no tiene un grupo fosfato, y un cuarto nucleótido terminal en el extremo 3' de la segunda cadena es un didesoxinucleótido, en el que la primera cadena es de una longitud más larga que aquella de la segunda cadena, y se forma una estructura de cadena doble entre la primera cadena y la segunda cadena y un…

(09/01/2019) Un adaptador vesicular de oligonucleótido para construir una biblioteca de ácidos nucleicos, que comprende: una región bicatenaria emparejada en 5' en un primer extremo terminal del adaptador; una región bicatenaria emparejada en 3' en un segundo extremo terminal del adaptador, que comprende una primera cadena y una segunda cadena complementarias entre sí, en donde la primera cadena comprende un saliente en el extremo 3' de esta y la segunda cadena comprende una base fosforilada en el extremo 5' de esta para proporcionar un extremo terminal adhesivo; y una región vesicular no emparejada entre la región bicatenaria emparejada en 5' y la región bicatenaria emparejada en 3', en donde la región vesicular no emparejada…

(11/12/2018) Un banco de mononucleosomas sintéticos que comprende dos o más tipos de mononucleosomas, en el que cada mononucleosoma comprende un complejo de (a) un octámero de proteína, que contiene 2 copias cada una de las histonas H2A, H2B, H3 y H4, y opcionalmente, la histona fijadora H1, en el que al menos una de las histonas no está modificada y/o en el que al menos una de las histonas se modifica para formar un patrón de modificaciones de histona, y (b) una molécula de ADN nucleosómico, que comprende (i) una secuencia de posicionamiento de nucleosoma (NPS) fuerte, (ii) uno o más códigos de barras de ADN situados en una posición/posiciones definida(s) en el ADN nucleosómico, y, opcionalmente, …

(19/09/2018) Una biblioteca de polipéptidos que comprende una pluralidad de polipéptidos diferentes, que comprenden: i) una región variable de cadena pesada de anticuerpo (VH) que comprende una región de armazón que es al menos el 95 % idéntica a la región de armazón de IGHV3-23 tal como se establece en la SEQ ID NO: 3; y i) una región variable de cadena ligera de anticuerpo (VL) que comprende una región de armazón que es al menos el 95 % idéntica a la región de armazón de uno cualquiera de IGLV1-40 (tal como se establece en la SEQ ID NO: 18), IGLV1-44 (tal como se establece en la SEQ ID NO: 21), IGLV1-47 (tal como se establece en la SEQ ID NO: 24), IGLV3-1…

(18/09/2018) Un método para preparar una biblioteca para la secuenciación usando una muestra de ADN de una muestra de sangre, que comprende: (a) aislar una muestra de ADN de la muestra de sangre, (b) desfosforilación de la muestra de ADN para obtener un producto de fragmentación desfosforilado, y (c) someter los fragmentos de ADN desfosforilados de dicho producto de fragmentación a las siguientes etapas para obtener una biblioteca de ADN cíclicos para secuenciación: (i) reparación final para obtener un fragmento de ADN de cadena doble que tiene dos extremos romos con cuatro nucleótidos terminales que carecen cada uno de un grupo fosfato; (ii) ligar un primer adaptador y un segundo adaptador que son diferentes entre sí con el fragmento de ADN de cadena doble respectivamente en los dos extremos…

(02/05/2018) Un método para sintetizar una pluralidad de variantes de polinucleótidos que tienen una mezcla estocástica de diferencias de nucleótidos definidas en relación a una secuencia de polinucleótido de referencia, en donde el polinucleótido de referencia codifica un polipéptido de referencia y cada una de la pluralidad de variantes del polinucleótido codifica un polipéptido que tiene por lo menos una diferencia de secuencia de aminoácidos en relación al polipéptido de referencia, el método comprendiendo: (a) proporcionar una pluralidad de parejas de cebadores directos e inversos, en donde cada una de la pluralidad de cebadores directos e inversos comprende una mezcla de cebadores mutagénicos y no mutagénicos, cada cebador mutagénico comprendiendo una diferencia definida en una posición seleccionada y cada cebador no mutagénico no comprendiendo…

(17/01/2018) Un método para detectar una mutación verdadera en una molécula de ácido nucleico, que comprende: amplificar un banco de ácidos nucleicos de doble cadena, en donde el banco de ácidos nucleicos de doble cadena comprende una pluralidad de moléculas de ácidos nucleicos diana y una pluralidad de códigos de doble cadena, en donde el banco de ácidos nucleicos comprende moléculas que tienen una fórmula de Xa-Y-Xb (en orden 5' a 3'), en donde: (a) Xa comprende un primer código; (b) Y comprende una molécula de ácido nucleico diana, y (c) Xb comprende un segundo código, en donde cada una de la pluralidad de moléculas de ácidos nucleicos diana está asociada con un par único de primero y segundo códigos de doble cadena, en donde cada uno de la pluralidad de códigos comprende una…

(19/07/2017) Un método de síntesis de división y mezcla para la síntesis de una biblioteca de complejos bifuncionales diferentes que comprenden una molécula pequeña y un oligonucleótido identificador que identifica los reactivos que han participado en la síntesis de la molécula pequeña, en la que una pluralidad de complejos bifuncionales nacientes obtenidos después de una primera síntesis ronda se dividen en múltiples fracciones, en el que, en cada fracción, un complejo bifuncional naciente se hace reaccionar secuencialmente o simultáneamente con un reactivo diferente y una etiqueta de oligonucleótido correspondiente que identifica cada reactivo diferente, en el que las etiquetas de oligonucleótidos se ensamblan en un oligonucleótido identificador mediante ligación química o ligación enzimática, …

(19/04/2017) Un método para generar ácido nucleico circular monocatenario a partir de una muestra del ácido nucleico diana, comprendiendo dicho método: a) formar un complejo que comprende una transposasa y una pluralidad de polinucleótidos en horquilla, teniendo cada uno de dichos polinucleótidos en horquilla una región dúplex que comprende una secuencia de reconocimiento de la transposasa. b) mezclar dicho complejo con dicho ácido nucleico diana, fragmentando de este modo dicho ácido nucleico diana y ligando dichos polinucleótidos en horquilla a dicho ácido nucleico diana, para formar fragmentos de ácido nucleico unidos en horquilla, teniendo cada fragmento de ácido nucleico unido en horquilla una región del fragmento del ácido nucleico diana dúplex y un hueco del segmento de la base nucleotídica entre cada región del fragmento de ácido nucleico diana…

(19/10/2016) Método para seleccionar un conjunto de secuencias de una biblioteca de secuencias de ácido nucleico expresadas, en el que - se proporciona una pluralidad de células, comprendiendo cada célula una secuencia de ácido nucleico expresada, expresada como una proteína diana en dicha célula, - se encapsula dicha pluralidad de células en una etapa de encapsulamiento, que comprende • tratar dicha pluralidad de células con un polisacárido catiónico en una etapa de tratamiento catiónico, • tratar dicha pluralidad de células con un polisacárido aniónico en una etapa de tratamiento aniónico, dando lugar dicha etapa de encapsulamiento…

(13/04/2016) Un método para sintetizar una pluralidad de variantes de polinucleótidos donde cada una tiene por lo menos una diferencia definida de nucleótidos en relación a una secuencia referencial de polinucleótidos, donde el polinucleótido referencial codifica a un polipéptido referencial y cada una de las pluralidades de las variantes de polinucleótidos codifica a un polipéptido que tiene a por lo menos una diferencia de secuencias de aminoácidos en relación al polipéptido referencial, donde el método comprende: (a) amplificar por separado a una plantilla referencial de polinucleótidos con cada una de una pluralidad de parejas…

(30/03/2016) Un método para generar anticuerpos monoclonales, que comprende las etapas de: a) crear una biblioteca de secuencias de ADNc, comprendiendo la creación las etapas de: (i) aislar el ARNm de linfocitos aislados procedentes de un sujeto hospedador que se ha inmunizado con un antígeno; (ii) transcribir de manera inversa el ARNm a ADNc; (iii) amplificar las secuencias de ADNc del anticuerpo diana; y (iv) secuenciar las secuencias de ADNc del anticuerpo diana; y b) analizar la frecuencia de las secuencias de ADNc del anticuerpo diana, que comprende: (i) comparar las frecuencias relativas de las secuencias de ADNc del anticuerpo diana antes y después de la exposición al antígeno, donde las secuencias de ADNc…

(17/02/2016) Una biblioteca de diferentes complejos bifuncionales, donde cada complejo bifuncional comprende a una molécula portada que está adherida covalentemente a una plantilla de nucleótidos y que está adherida covalentemente a una plantilla complementaria de nucleótidos, Donde el número de diferentes complejos bifuncionales en la biblioteca es de por lo menos 103, Donde las moléculas portadas son seleccionadas de un grupo que consiste de policiclos alifáticos; policiclos aromáticos; poliheterociclos; hidrocarbonos de cadena abierta monofuncionales, difuncionales, o trifuncionales; carbociclos no aromáticos monofuncionales, difuncionales o trifuncionales; hidrocarbonos monocíclicos, bicíclicos o tricíclicos; hidrocarbonos policíclicos conectados; heterociclos no aromáticos monofuncionales,…

(31/12/2014) Un método de preparación de una biblioteca de levaduras mediante electroporación de células de levadura, comprendiendo el método las etapas de: incubar las células de levadura en una solución que comprende LiAc de 0,01 a 1,0 M y DTT de 1 a 100 mM, y proporcionar una suspensión que comprende ADN de vectores, ADN del inserto, las células de levadura, sorbitol de 0,1 a 10 M y CaCl2 o MgCl2 de 0,1 a 10 mM y electroporar la suspensión a 0,5 kV /cm a 12,5 kV/cm con una capacitancia de 10 a 50 μF.

(26/11/2014) Un método para obtener una biblioteca que presenta una familia diversa de péptidos, polipéptidos o proteínas en la superficie de un paquete genético, comprendiendo el método las etapas de: (i) escindir un ácido nucleico en una localización deseada mediante un método que comprende las etapas de: (a) poner en contacto un ácido nucleico monocatenario con un oligonucleótido monocatenario, siendo el oligonucleótido monocatenario complementario del ácido nucleico monocatenario en la región en la que se desea la escisión; en el que el ácido nucleico monocatenario y el oligonucleótido monocatenario se asocian para formar una región localmente bicatenaria del ácido nucleico monocatenario, en el que la región localmente bicatenaria comprende un sitio de reconocimiento de endonucleasa de restricción; y (b) escindir el ácido nucleico en el sitio de…

(02/07/2014) Una colección de anticuerpos sintéticos o de fragmentos funcionales de los mismos, que comprende regiones estructurales de la cadena pesada variable y la cadena ligera variable, en donde dichas regiones estructurales de la cadena pesada variable y dichas regiones estructurales de la cadena ligera variable comprenden secuencias de proteínas de la línea germinal de una pareja de proteínas de la línea germinal, en donde dicha pareja de proteínas de la línea germinal comprende las siguientes propiedades: i) una tasa de presentación relativa en formato Fab que comprende un valor dentro del 75% superior de los Fabs sometidos a ensayo; ii) un nivel de expresión en formato Fab de al menos 0,4 en comparación con Fab VH1-69 VLA_VI1-40 AYA cuyas secuencias…

(25/04/2012) Complejo que comprende una partícula de fago, comprendiendo dicha partícula de fago (i) un ácido nucleico que codifica un polipéptido; (ii) el polipéptido expresado por el ácido nucleico de (i) y expuesto en la superficie del fago; (iii) un compuesto conector unido a dicho polipéptido en el que dicho compuesto conector está unido al polipéptido mediante al menos tres enlaces covalentes independientes.