Encapsulamiento celular de alto rendimiento para examen o selección.

Método para seleccionar un conjunto de secuencias de una biblioteca de secuencias de ácido nucleico expresadas,

en el que

- se proporciona una pluralidad de células, comprendiendo cada célula una secuencia de ácido nucleico expresada, expresada como una proteína diana en dicha célula,

- se encapsula dicha pluralidad de células en una etapa de encapsulamiento, que comprende

• tratar dicha pluralidad de células con un polisacárido catiónico en una etapa de tratamiento catiónico,

• tratar dicha pluralidad de células con un polisacárido aniónico en una etapa de tratamiento aniónico, dando lugar dicha etapa de encapsulamiento a una pluralidad de células encapsuladas,

- solubilizar la membrana de dichas células encapsuladas en una etapa de solubilización, dando lugar a una pluralidad de compartimentos solubilizados,

- poner en contacto dicha pluralidad de compartimentos solubilizados, en una etapa de marcaje, con

• un ligando para dicha proteína diana, portando dicho ligando un marcador detectable, o con

• un indicador de una actividad enzimática de dicha proteína diana, convirtiendo dicha actividad enzimática 15 dicho indicador en un marcador detectable,

- seleccionar un subconjunto de dicha pluralidad de compartimentos solubilizados como función de marcador detectable presente en dichos compartimentos solubilizados en una etapa de selección, dando lugar a una selección, y

- aislar dichas secuencias de ácido nucleico expresadas de la selección como un conjunto de secuencias seleccionado en una etapa de aislamiento.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2013/050330.

Solicitante: UNIVERSITAT ZURICH.

Nacionalidad solicitante: Suiza.

Dirección: PROREKTORAT MNW RÄMISTRASSE 71 8006 ZÜRICH SUIZA.

Inventor/es: SCOTT, DANIEL, PLUCKTHUN, ANDREAS.

Fecha de Publicación: 19 de Octubre de 2016.

Clasificación Internacional de Patentes:

C07K14/47 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de mamíferos.
C12N15/10 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
C40B30/06 C […] › C40 TECNOLOGIA COMBINATORIA. › C40B QUIMICA COMBINATORIA; BIBLIOTECAS, p. ej. QUIMIOTECAS (bibliotecas combinatorias in silico de ácidos nucleicos, proteínas o péptidos G16B 35/00; química combinatoria in silico G16C 20/60). › C40B 30/00 Procedimientos de selección de bibliotecas. › midiendo los efectos sobre organismos vivos, tejidos o células.
C40B50/06 C40B […] › C40B 50/00 Procedimientos de creación de bibliotecas, p. ej. síntesis combinatoria. › Procedimientos bioquímicos, p. ej. empleando enzimas o microorganismos enteros viables.

PDF original: ES-2611736_T3.pdf

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