Compuestos y métodos para inhibir la interacción de proteínas Bcl con compañeros de unión.

Un compuesto seleccionado entre el grupo que consiste en: **Fórmula**

Compuestos y métodos para inhibir la interacción de proteínas Bcl con compañeros de unión Campo de la invención La invención se encuentra en el campo de los agentes terapéuticos para el cáncer. Específicamente, la presente invención se encuentra en el campo de los agentes terapéuticos para el cáncer que promueven la apoptosis en células tumorales usando análogos de isoxazolidina. Los compuestos de isoxazolidina de la invención se unen a proteínas Bcl y bloquean la función anti-apoptótica de Bcl en células cancerosas y tejido tumoral que expresan proteínas Bcl. Los compuestos, y composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos, pueden usarse en el tratamiento de la enfermedad cancerosa bien solos o en combinación con agentes quimioterapéuticos u otros fármacos.

Antecedentes de la invención La apoptosis, o muerte celular programada, es importante para el desarrollo embriológico/anatómico normal, la defensa del hospedador y la supresión de la oncogénesis. La regulación defectuosa de la apoptosis se ha implicado en el cáncer y otras muchas enfermedades humanas que son el resultado de un desequilibrio entre el proceso de la división celular y la muerte celular. Originalmente, Bcl-2 se identificó en el punto de rotura cromosómico de linfomas de células B que portan t (14;18) y pertenece a una familia creciente de proteínas que regulan la apoptosis. (Gross, A; McDonnell, JM; Korsmeyer, S. J. BCL-2 family members and the mitochondria in apoptosis. Genes & Development 1999, 13, 1899-1911, Cor y , S.; Huang, D.C.S.; Adams, J.M. The Bcl-2 family: roles in cell survival and oncogenesis. Oncogene, 2003 22, 8590-8607. Danial, N.N.; Korsmeyer, S. J. Cell death: Critical control points. Cell 2004, 116, 205-218. Chao, D. T.; Korsmeyer, S. J. Bcl-2 family: regulators of cell death. Annu. Rev. Immunol. 1998, 16, 395-419) . Apoptosis, Christopher Potten, James Wilson, Cambridge University Press, 2004) . La familia de proteínas de Bcl-2 incluyen moléculas antiapoptóticas, tales como Bcl-2 y Bcl-XL, y moléculas pro-apoptóticas, tales como Bax, Bak, Bid y Bad. Bcl-2 contribuye a la progresión celular del cáncer previniendo la regeneración celular normal causada por los mecanismos fisiológicos de muerte celular. La sobreexpresión de Bcl-2 se ha observado en el 70 % de los cánceres de mama y muchas otras formas de cáncer (Buolaniwini, J. K. Novel anticancer drug discover y . Curr. Opin. Chem. Biol. 1999, 3, 500-509) . Los niveles de expresión de proteínas Bcl-2 también se correlacionan con la resistencia a un amplio espectro de fármacos quimioterapéuticos y a la terapia con radiación γ (Reed, J. C.; Miyashita, T.; Takayama, S.; Wang, H. G.; Sato, T.; Krajewski, S.; Aime-Sempe, C.; Bodrug, S.; Kitada, S.; Hanada, M. Bcl-2 family proteins: Regulators of cell-death involved in the pathogenesis of cancer and resistance to therapy. J. Cell. Biochem. 1996, 60, 23-32; Reed, J. C. Bcl-2 family proteins: strategies for overcoming chemoresistance in cancer. Advances in Pharmocology 1997, 41, 501-553; Strasser, A.; Huang, D. C. S.; Vaux, D. L. The role of the Bcl-2/ced-9 gene family in cancer and general implications of defects in cell death control for tumorigenesis and resistance to chemotherapy. Biochem. Biophys. Acta 1997, 1333, F151-F189. DiPaola, R. S.; Aisner, J. Overcoming Bcl-2-and p53-mediated resistance in prostate cancer. Semin. Oncol. 1999, 26, 112-116) .

Los miembros de la familia Bcl-2 de proteínas representan reguladores clave de la apoptosis, con función proapoptótica (por ejemplo, Bax, Bak, Bid, Bim, Noxa, Puma) y función anti-apoptótica (por ejemplo, Bcl-2, Bcl-xL, Mcl-1) . La dimerización selectiva y competitiva entre miembros pro y anti-apoptóticos de la familia determina el destino de una célula dados estímulos pro-apoptóticos. Aunque los papeles precisos de Bcl-2 y Bcl-xL en el cáncer no se entienden por completo, hay varias líneas de pruebas que sugieren que Bcl-2 y Bcl-xL no solo contribuyen a la progresión del cáncer previniendo la regeneración celular normal, pero también juegan un papel en la resistencia de las células cancerosas a los tratamientos actuales contra el cáncer. La sobreexpresión experimental de Bcl-2 (Bcl-xL) hace a las células cancerosas resistentes a un amplio espectro de agentes quimioterapéuticos y a la radiación (Bcl-2 family proteins: Regulators of cell-death involved in the pathogenesis of cancer and resistance to therapy. J. Cell. Biochem. 1996, 60, 23-32; Reed, J. C) . Bcl-2 y/o Bcl-xL se sobreexpresan en más del 50 % de todos los tumores, tal como se muestra a continuación (de Wang, S.; Yang, D.; Lippman, M.E. Targeting Bcl-2 and Bcl-xL with nonpeptidic small-molecule antagonists. Seminars in Oncology, 2003, 5, 133-142) .

Tipo de cáncer Sobreexpresión de Bcl-2 (%) Sobreexpresión de Bcl-xL (%)

Próstata 20-40 100

resistente a hormonas 80-100 -

Mama 60-80 40-60

De pulmón no microcítico 20-40 -

De pulmón microcítico 60-80 -

Colorrectal 50-100 83

Melanoma 65 90

Tipo de cáncer Sobreexpresión de Bcl-2 (%) Sobreexpresión de Bcl-xL (%)

Mieloma múltiple (en recaída) - 77

De cabeza y cuello 13 52-75

Pancreático 23 90

Carcinoma hepatocelular - 80

Los enfoques biológicos para modular la función de Bcl-2 usando oligonucleótidos antisentido o anticuerpos monocatenarios han demostrado potenciar la quimiosensibilidad de células tumorales (Ziegler, A.; Luedke, G. H.; Fabbro, D.; Altmann, K. H.; Stahel, R. A.; Zangemeister-Wittke, U. Induction of apoptosis in small-cell lung cancer cells by an antisense oligodeoxynucleotide targeting the Bcl-2 coding sequence. J. Natl. Cancer. Inst. 1997, 89, 1027-1036; Webb, A.; Cunningham, D.; Cotter, F.; Clarke, P. A.; Di Stefano, F.; Ross, P.; Corpo, M.; Dziewanowska, Z. Bcl-2 antisense therapy in patients with non-hodgkin lymphoma. Lancet 1997, 349, 1137-1141; Cotter, F. E. Phase I clinical and pharmacokinetic study of Bcl-2 antisense oligonucleotide therapy in patients with non-hodgkin’s lymphoma. J. Clin. Oncol. 2000, 18, 1812-1823; Piche, A.; Grim, J.; Rancourt, C.; Gomez-Navarro, J.; Reed, J. C.; Curiel, D. T. Modulation of Bcl-2 protein levels by an intracellular anti-Bcl-2 single-chain antibody increases drug-induced cytotoxicity in the breast cancer cell line MCF-7. Cancer Res. 1998, 58, 2134-2140) .

Se ha demostrado que un oligonucleótido antisentido (G3139) (Raynaud, F. I.; Orr, R. M.; Goddard, P. M.; Lacey, H. A.; Lancashire, H.; Judson, I. R.; Beck, T.; Br y an, B.; Cotter, F. E. Pharmacokinetics of G3139, a phosphorothioate oligodeoxynucleotide antisense to Bcl-2, after intravenous administration or continuous subcutaneous infusion to mice.

J. Pharmacol. Exp. Ther. 1997, 281, 420-427) , diseñado para hibridar con la secuencia de ARNm de Bcl-2, inhibe la expresión de Bcl-2, induce la apoptosis e inhibe el crecimiento celular en células de cáncer de mama humano que tienen sobreexpresión de Bcl-2 (Chen, H. X., Marchall, J. L., Trocky, N., Baidas, S., Rizvi, N., Ling, Y., Bhagava, P., Lippman, M. E., Yang, D., y Hayes, D. F. A Phase I study of Bcl-2 antisense G3139 (Genta) and weekly docetaxel in patients with advanced breast cancer and other solid tumors. Proceedings of American Society of Clinical Oncology, 2000) . De manera importante, se observaron efectos sinérgicos y la completa regresión tumoral in vivo en los tratamientos combinados de G3139 con docetaxel. Por tanto, Bcl-2 representa una diana elevadamente atractiva para el desarrollo de una nueva terapia para el tratamiento de diversas formas de cáncer.

Las limitaciones asociadas con el uso de moléculas grandes, tales como oligonucleótidos, proteínas y polipéptidos, como agentes terapéuticos incluyen una pobre disponibilidad oral, poca estabilidad in vivo, y un coste elevado. Los agentes terapéuticos más deseables serían moléculas pequeñas no peptídicas, permeables a células que se unen a Bcl-2 y bloquean la función anti-apoptótica en el cáncer y promueven la muerte celular en tumores.

Varias moléculas pequeñas han demostrado que inhiben la función de Bcl-2. Por ejemplo, se demostró que las sulfonamidas de acilo inhiben la función de Bcl-2 y Bcl-xL en ensayos bioquímicos e in vitro. Nature (2005) 435, 677-681. Sin embargo, existe la necesidad de moléculas orgánicas pequeñas adicionales que se unan a Bcl-2 y bloqueen su función anti-apoptótica en el cáncer y promueven la muerte celular en tumores. La presente invención cumple esta necesidad y tiene otras ventajas relacionadas.

Sumario de la invención Un aspecto de la presente invención se refiere a compuestos de isoxazolidina. En determinadas casos, el átomo de nitrógeno del anillo de isoxazolidina está unido a un grupo aralquilo sustituido. En determinadas casos, el... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto seleccionado entre el grupo que consiste en:

y

2. Una composición farmacéutica, que comprende un compuesto de la reivindicación 1; y al menos un excipiente 15 farmacéuticamente aceptable.

3. El compuesto de la reivindicación 1 para su uso como un medicamento.

4. El compuesto de la reivindicación 3, para su uso en el tratamiento del cáncer, preferentemente en donde el cáncer

es linfoma folicular, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de células del manto, leucemia linfocítica crónica, cáncer de próstata, cáncer de mama, neuroblastoma, carcinoma colorrectal, de endometrio, ovárico, cáncer de pulmón, hepatocelular, mieloma múltiple, cáncer de cabeza y cuello o testicular.

5. El compuesto de la reivindicación 4, para su uso en el tratamiento del cáncer que sobreexpresa una proteína Bcl o 25 donde el cáncer depende de una proteína Bcl para su crecimiento y supervivencia.

6. El compuesto de la reivindicación 5, para dicho uso en donde dicha proteína Bcl es Bcl-2 o en donde dicha proteína Bcl es Bcl-xL.

7. El compuesto de la reivindicación 4 para su uso en donde el cáncer muestra una traslocación cromosómica t (14;18) .

8. El compuesto de la reivindicación 3, en donde dicho uso es para tratar un trastorno mediado por Bcl.

9. El compuesto de la reivindicación 8, donde en dicho uso, el trastorno mediado por Bcl es cáncer o una enfermedad

neoplásica, preferentemente, en donde dicho cáncer o enfermedad neoplásica se selecciona del grupo que consiste en leucemia aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielocítica aguda, mieloblástica, promielótica, mielomonocítica, monocítica, eritroleucemia, leucemia crónica, leucemia mielocítica (granulocítica) crónica, leucemia linfocítica crónica, policitemia vera, enfermedad de Hodgkin, enfermedad no de Hodgkin, mieloma múltiple, macroglobulinemia de Waldenstrom, enfermedad de la cadena pesada, fibrosarcoma, mixosarcoma, liposarcoma,

condrosarcoma, sarcoma osteogénico, cordoma, angiosarcoma, endoteliosarcoma, linfangiosarcoma, linfangioendoteliosarcoma, sinovioma, mesotelioma, tumor de Ewing, leiomiosarcoma, rabdomiosarcoma, carcinoma de colon, cáncer de páncreas, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de próstata, carcinoma de células escamosas, carcinoma ce células basales, adenocarcinoma, carcinoma de las glándulas sudoríparas, carcinoma de las glándulas sebáceas, carcinoma papilar, adenocarcinomas papilares, estadenocarcinoma, carcinoma medular,

carcinoma broncogénico, carcinoma de células renales, hepatoma, carcinoma del conducto biliar, coriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrionario, tumor de Wilms, cáncer de cuello de útero, cáncer uterino, tumor testicular, carcinoma de pulmón, carcinoma microcítico de pulmón, carcinoma de vejiga, carcinoma epitelial, glioma, astrocitoma, meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico,

oligodendroglioma, meningioma, melanoma, neuroblastoma, retinoblastoma y cáncer de endometrio.

10. El compuesto de la reivindicación 3, en donde el compuesto se administra conjuntamiente con un agente quimioterapéutico; siendo el uso tratar un trastorno mediado por Bcl, preferentemente cáncer o una enfermedad neoplásica, seleccionada lo más preferentemente del grupo que consiste en leucemia aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielocítica aguda, mieloblástica, promielótica, mielomonocítica, monocítica, eritroleucemia, leucemia crónica, leucemia mielocítica (granulocítica) crónica, leucemia linfocítica crónica, policitemia vera, enfermedad de Hodgkin, enfermedad no de Hodgkin, mieloma múltiple, macroglobulinemia de Waldenstrom, enfermedad de la cadena pesada, fibrosarcoma, mixosarcoma, liposarcoma, condrosarcoma, sarcoma osteogénico, cordoma, angiosarcoma, endoteliosarcoma, linfangiosarcoma, linfangioendoteliosarcoma, sinovioma, mesotelioma, tumor de Ewing, leiomiosarcoma, rabdomiosarcoma, carcinoma de colon, cáncer de páncreas, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de próstata, carcinoma de células escamosas, carcinoma ce células basales, adenocarcinoma, carcinoma de las glándulas sudoríparas, carcinoma de las glándulas sebáceas, carcinoma papilar, adenocarcinomas papilares, estadenocarcinoma, carcinoma medular, carcinoma broncogénico, carcinoma de células renales, hepatoma, carcinoma del conducto biliar, coriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrionario, tumor de Wilms, cáncer de cuello de útero, cáncer uterino, tumor testicular, carcinoma de pulmón, carcinoma microcítico de pulmón, carcinoma de vejiga, carcinoma epitelial, glioma, astrocitoma, meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma, meningioma, melanoma, neuroblastoma, retinoblastoma y cáncer de endometrio.

11. El compuesto de la reivindicación 10, para dicho uso en donde el trastorno mediado por Bcl sobreexpresa una proteína Bcl o depende de una proteína Bcl para su crecimiento y supervivencia.

12. El compuesto de la reivindicación 11, para dicho uso en donde dicha proteína Bcl es Bcl-2 o en donde dicha proteína Bcl es Bcl-xL.

13. El compuesto de la reivindicación 10, para dicho uso en donde el trastorno mediado por Bcl muestra una traslocación cromosómica t (14;18) .

14. El compuesto de las reivindicaciones 4, 8 o 10, para dicho uso en el que dichos compuesto o compuestos se administran por vía parenteral o se administran por vía intramuscular, intravenosa, subcutánea, oral, tópica o intranasal o se administran por vía sistémica.

15. El compuesto de las reivindicaciones 4, 8 o 10, para dicho uso en donde dicho paciente es un mamífero, preferentemente un primate, más preferentemente un ser humano.

16. Uso del compuesto de la reivindicación 1, en la fabricación de un medicamento para tratar el cáncer, preferentemente en donde el cáncer es linfoma folicular, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de células del manto, leucemia linfocítica crónica, cáncer de próstata, cáncer de mama, neuroblastoma, carcinoma colorrectal, de endometrio, ovárico, cáncer de pulmón, hepatocelular, mieloma múltiple, cáncer de cabeza y cuello o testicular.

17. Uso de acuerdo con la reivindicación 16 en donde el medicamento es para tratar un cáncer que sobreexpresa una proteína Bcl o en donde el cáncer depende de una proteína Bcl para su crecimiento y supervivencia.

18. Uso de acuerdo con la reivindicación 17, en el que el medicamento es para el uso en donde dicha proteína Bcl es Bcl-2 o en donde dicha proteína Bcl es Bcl-xL.

19. Uso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que el medicamento es para el uso en donde el cáncer muestra una traslocación cromosómica t (14;18) .

20. Uso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que el medicamento es para tratar un trastorno mediado por Bcl.

21. Uso de acuerdo con la reivindicación 20, en el que el medicamento es para su uso, el trastorno mediado por Bcl es cáncer o una enfermedad neoplásica, preferentemente, en donde dicho cáncer o enfermedad neoplásica se selecciona del grupo que consiste en leucemia aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielocítica aguda, mieloblástica, promielótica, mielomonocítica, monocítica, eritroleucemia, leucemia crónica, leucemia mielocítica (granulocítica) crónica, leucemia linfocítica crónica, policitemia vera, enfermedad de Hodgkin, enfermedad no de Hodgkin, mieloma múltiple, macroglobulinemia de Waldenstrom, enfermedad de la cadena pesada, fibrosarcoma, mixosarcoma, liposarcoma, condrosarcoma, sarcoma osteogénico, cordoma, angiosarcoma, endoteliosarcoma, linfangiosarcoma, linfangioendoteliosarcoma, sinovioma, mesotelioma, tumor de Ewing, leiomiosarcoma, rabdomiosarcoma, carcinoma de colon, cáncer de páncreas, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de próstata, carcinoma de células escamosas, carcinoma ce células basales, adenocarcinoma, carcinoma de las glándulas sudoríparas, carcinoma de las glándulas sebáceas, carcinoma papilar, adenocarcinomas papilares, estadenocarcinoma, carcinoma medular, carcinoma broncogénico, carcinoma de células renales, hepatoma, carcinoma del conducto biliar, coriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrionario, tumor de Wilms, cáncer de cuello de útero, cáncer uterino, tumor testicular, carcinoma de pulmón, carcinoma microcítico de pulmón, carcinoma de

vejiga, carcinoma epitelial, glioma, astrocitoma, meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma, meningioma, melanoma, neuroblastoma, retinoblastoma, y cáncer de endometrio.

22. Uso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que el compuesto se administra conjuntamiente con un agente quimioterapéutico; en el que el medicamento es para tratar un trastorno mediado por Bcl, preferentemente cáncer o una enfermedad neoplásica, más preferentemente seleccionada entre el grupo que consiste en leucemia aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielocítica aguda, mieloblástica, promielótica, mielomonocítica, monocítica, eritroleucemia, leucemia crónica, leucemia mielocítica (granulocítica) crónica, leucemia linfocítica crónica, Policitemia vera, enfermedad de Hodgkin, enfermedad no de Hodgkin, mieloma múltiple, macroglobulinemia de Waldenstrom, enfermedad de la cadena pesada, fibrosarcoma, mixosarcoma, liposarcoma, condrosarcoma, sarcoma osteogénico, cordoma, angiosarcoma, endoteliosarcoma, linfangiosarcoma, linfangioendoteliosarcoma, sinovioma, mesotelioma, tumor de Ewing, leiomiosarcoma, rabdomiosarcoma, carcinoma de colon, cáncer de páncreas, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de próstata, carcinoma de células escamosas, carcinoma ce células basales, adenocarcinoma, carcinoma de las glándulas sudoríparas, carcinoma de las glándulas sebáceas, carcinoma papilar, adenocarcinomas papilares, estadenocarcinoma, carcinoma medular, carcinoma broncogénico, carcinoma de células renales, hepatoma, carcinoma del conducto biliar, coriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrionario, tumor de Wilms, cáncer de cuello de útero, cáncer uterino, tumor testicular, carcinoma de pulmón, carcinoma microcítico de pulmón, carcinoma de vejiga, carcinoma epitelial, glioma, astrocitoma, meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma, meningioma, melanoma, neuroblastoma, retinoblastoma y cáncer de endometrio.

23. Uso de acuerdo con la reivindicación 22, en el que el medicamento es para su uso en donde el trastorno mediado por Bcl sobreexpresa una proteína Bcl o depende de una proteína Bcl para su crecimiento y supervivencia.

24. Uso de acuerdo con la reivindicación 23, en el que el medicamento es para el uso en donde dicha proteína Bcl es Bcl-2 o en el que dicha proteína Bcl es Bcl-xL.

25. Uso de acuerdo con la reivindicación 22, en el que el medicamento es para el uso en donde el trastorno mediado por Bcl muestra una traslocación cromosómica t (14;18) .

26. Uso de acuerdo con las reivindicaciones 16, 20 o 22, en el que el medicamento es para el uso en donde dichos compuesto o compuestos se administran por vía parenteral o se administran por vía intramuscular, intravenosa, subcutánea, oral, tópica o intranasal o se administran por vía sistémica.

27. Uso de acuerdo con las reivindicacions 16, 20 o 22, en el que el medicamento es para el uso en donde dicho paciente es un mamífero, preferentemente un primate, más preferentemente un ser humano.