Análogos de ansamicinas que contienen benzoquinona para el tratamiento de cáncer.

Un compuesto de fórmula 3: **Fórmula**

donde

X- es una base conjugada de un ácido farmacéuticamente aceptable.

Análogos de ansamicinas que contienen benzoquinona para el tratamiento de cáncer

Antecedentes de la invención La geldanamicina es un lactamo macrocíclico que es un miembro de la familia de productos naturales de las ansamicinas que contienen benzoquinona. El aislamiento, preparación y los diversos usos de la geldanamicina se describen en la Patente de Estados Unidos Nº 3.595.955. Al igual que la mayoría de los miembros de origen natural de esta clase de moléculas, la geldanamicina se produce típicamente como un producto de fermentación de Streptomyces hygroscopicus var. geldanus var. nova strain (Journal of Antibiotics Vol. 23, Página 442 (1970) ) . Otros análogos y derivados de la geldanamicina se han identificado o sintetizado y su uso como agentes antitumorales se describe en las Patentes de Estados Unidos Nº 4.261.989 y 5.387.584 y en las solicitudes PCT publicadas WO 00/03737 y WO 03/072794. Un miembro de esta familia que se ha examinado con cierto detalle es 17-alilamino-17

demetoxigeldanamicina (“17-AAG”) . Se ha demostrado que la geldanamicina y sus derivados se unen a HSP90 y antagonizan la actividad de las proteínas.

La HSP90 es una proteína muy abundante que es esencial para la viabilidad celular y presenta doble función como proteína acompañante (J. Cell Biol. (2001) 154: 267-273, Trends Biochem. Sci. (1999) 24: 136-141) . Desempeña una función clave en la respuesta al estrés celular interaccionando con muchas proteínas después de haberse modificado su conformación natural mediante diversos estreses ambientales tales como choque térmico, garantizando el plegamiento adecuado de la proteína e impidiendo la agregación no específica (Pharmacological Rev. (1988) 50: 493-513) . Además, resultados recientes sugieren que la HSP90 también puede desempeñar una función amortiguando contra los efectos de mutaciones, presumiblemente corrigiendo el plegamiento inapropiado de proteínas mutantes (Nature (1998) 396: 336-342) . Sin embargo, la HSP90 también tiene una importante función reguladora en condiciones fisiológicas normales y es responsable de la estabilidad conformacional y maduración de diversas proteínas cliente específicas, de las cuales se conocen aproximadamente 40 (véase, Expert. Opin. BiolTher. (2002) 2 (1) : 3-24) . Éstas pueden subdividirse en tres grupos: receptores de hormonas esteroideas, serina/treonina o tirosinas quinasas y un conjunto de proteínas aparentemente no relacionadas, incluyendo la p53 mutante y la subunidad catalítica de la telomerasa hTERT. Todas estas proteínas desempeñan funciones reguladoras en procesos fisiológicos y bioquímicos en la célula.

Los antagonistas de HSP90 se están actualmente explorando en una gran cantidad de contextos biológicos en los que puede obtenerse un efecto terapéutico durante una afección o trastorno inhibiendo uno o más aspectos de la 35 actividad de HSP90. Aunque el enfoque principal ha sido en trastornos proliferativos, tal como cánceres, otras afecciones están demostrando niveles de tratamiento usando antagonistas de HSP90. Por ejemplo, la Solicitud de Patente publicada de Estados Unidos 2003/0216369, divulga el uso de inhibidores de HSP90 para el tratamiento de trastornos virales. Los inhibidores de HSP90 también se han implicado en una amplia diversidad de otras utilidades, incluyendo su uso como agentes antiinflamatorios, agentes para el tratamiento de autoinmunidad, agentes para el tratamiento de ictus, isquemia, trastornos cardiacos y agentes útiles para promover la regeneración de nervios (Véanse, por ejemplo, los documentos WO 02/09696 (PCT/US01/23640) ; WO 99/51223 (PCT/US99/07242) ; las Patentes de Estados Unidos 6.210. 974 B1 y 6.174.875) . En la bibliografía existen informes en los que los trastornos fibrogenéticos que incluyen, pero sin limitación, esclerodermia, polimiositis, lupus sistémico, artritis reumatoide, cirrosis hepática, formación de queloides, nefritis intersticial y fibrosis pulmonar pueden tratarse usando inhibidores 45 de HSP90 (Strehlow, WO 02/02123; PCT/US01/20578) .

La fuerza nanomolar y la selectividad aparente de la geldanamicina para destruir células tumorales, así como el descubrimiento de que su diana principal en células mamíferos es la HSP90, ha suscitado interés en su desarrollo como un fármaco contra el cáncer. Sin embargo, la extremadamente baja solubilidad de estas moléculas y la asociación de hepatotoxicidad con la administración de la geldanamicina ha conducido a dificultar el desarrollo de un agente aprobable para aplicaciones terapéuticos. En particular, la geldanamicina es poco soluble en agua, haciendo que sea difícil de administrar en dosis terapéuticamente eficaces.

Más recientemente, la atención se ha centrado en derivados 17-amino de geldanamicina, en particular la 17-AAG,

que presenta hepatotoxicidad reducida conservando al mismo tiempo la unión a HSP90. Véanse las Patentes de Estados Unidos Nos 4.261.989; 5.387.584; y 5.932.566. Al igual que la geldanamicina, la 17-AAG tiene una solubilidad acuosa muy limitada. Esta propiedad requiere el uso de un vehículo solubilizante, por ejemplo, fosfolípido de huevo con DMSO, o Cremophore! (BASK Aktiengesellschaft) , un aceite de ricino polietoxilado; en algunos pacientes, la presencia de cualquiera de estos vehículos produce graves reacciones secundarias. Por consiguiente, aún existe una necesidad de descubrir análogos más solubles de ansamicinas que contienen benzoquinona y procedimientos específicos y generales para crearlas, particularmente geldanamicina y sus análogos, tales como 17-AAG.

El documento WO 95/01342 describe derivados de ansamicina, sales y profármacos farmacéuticamente aceptables 65 de los mismos. Los compuestos son útiles inhibiendo productos oncogénicos y como agentes antitumorales y anticancerosos.

El documento WO 03/013430 describe análogos de ansamicina que contienen benzoquinona útiles para el tratamiento del cáncer y otras enfermedades o afecciones caracterizadas por proliferación celular o híper proliferación no deseada.

El documento GB 2.106.111 describe derivados de macbeina y su producción. Los derivados son útiles como agentes antibacterianos, antifúngicos o antiprozoarios.

El documento WO 93/14215 describe un proceso para la fermentación y aislamiento de la 4, 5-dihidrogeldanimicina y su hidroquinona. Se espera que los compuestos sean útiles contra determinados microorganismos y que tengan utilidad como agentes inmunosupresores contra enfermedades autoinmunes.

Sumario de la invención La presente divulgación proporciona formas reducidas de ansamicinas que contienen benzoquinona, y sales de las mismas en forma aislada y en preparaciones farmacéuticas y usos de las mismas para el tratamiento y modulación de trastornos, tales como el cáncer, asociados con híper proliferación. Generalmente, la presente divulgación proporciona formas farmacológicas estables, solubles, de ansamicinas que contienen benzoquinona. La presente divulgación proporciona análogos reducidos de ansamicinas que contienen benzoquinona, tales como análogos 17amino sustituidos de geldanamicina en forma aislada y en preparaciones farmacéuticas, donde la benzoquinona está

reducida a una hidroquinona y atrapada en una forma estable al aire y aislada, tal como una sal de HCl o H2SO4. Como alternativa, las hidroquinonas pueden atraparse como co-sales con un aminoácido tal como glicina. Dichos análogos son extraordinariamente solubles en agua (1-3 órdenes de magnitud más solubles que la forma no reducida, por ejemplo, 35 ∀g/ml para la 17-AAG frente a 1-3 mg/ml para la hidroquinona de 17-AAG y > 200 mg/ml para sales de derivados de hidroquinona de 17-AAG) y estables; y también pueden aislarse y formularse para la administración a seres humanos sin los problemas asociados con la formulación, conservación e inestabilidad de las formas precursoras no reducidas y otras formulaciones de ansamicinas.

En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto puro y aislado de:

fórmula 3:

donde X-es una base conjugada de un ácido farmacéuticamente aceptable.

En una realización, X-se selecciona entre el grupo que consiste en cloruro, bromuro, yoduro, H2PO4-, HSO4-, metilsulfonato, bencenosulfonato, p-toluenosulfonato, trifluorometilsulfonato y 10-alcanforsulfonato, naftalen-1-ácido sulfónico-5-sulfonato, etan-1-ácido sulfónico-2-sulfonato, sal del ácido ciclámico, sal del ácido tiociánico, naftalen-2sulfonato y oxalato.

Otro aspecto de la invención se refiere a un método para preparar un compuesto de fórmula 3 que comprende: combinar un compuesto de fórmula 1:

con un agente reductor en un disolvente de reacción, seguido de tratamiento con un ácido farmacéuticamente... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de fórmula 3:

donde X-es una base conjugada de un ácido farmacéuticamente aceptable.

2. El compuesto de la reivindicación 1, donde dicho ácido farmacéuticamente aceptable tiene un pKa entre aproximadamente -10 y aproximadamente 7 en agua. 10

3. El compuesto de la reivindicación 1, donde X-se selecciona entre el grupo que consiste en cloruro, bromuro, yoduro, H2PO4-, HSO4-, metilsulfonato, bencenosulfonato, p-toluenosulfonato, trifluorometilsulfonato, 10alcanforsulfonato, naftalen-1-ácido sulfónico-5-sulfonato, etan-1-ácido sulfónico-2-sulfonato, sal del ácido ciclámico, sal del ácido tiociánico, naftalen-2-sulfonato y oxalato.

4. El compuesto de la reivindicación 1, donde X-es cloruro.

5. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto como se define en una cualquiera de las

reivindicaciones 1 a 4, y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. 20

6. La composición farmacéutica de la reivindicación 5, que comprende además uno o más seleccionados entre: un antioxidante; un agente tamponante; y un quelante metálico.

7. La composición farmacéutica de la reivindicación 6, donde dicho antioxidante es ascorbato, clorhidrato de cisteína,

bisulfito sódico, metabisulfito sódico, sulfito sódico, tioglicerol, mercaptoacetato sódico, sulfoxilato de formaldehído sódico, palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado, lecitina, galato de propilo o alfatocoferol.

8. La composición farmacéutica de la reivindicación 6, donde dicho agente tamponante es citrato, ascorbato, fosfato,

bicarbonato, carbonato, fumarato, acetato, tartarato, malato, succinato, lactato, maleato, glicina u otros α-o βaminoácidos naturales.

9. La composición farmacéutica de la reivindicación 6, donde dicho quelante metálico es ácido cítrico, ácido etilendiamin tetraacético (EDTA) y su sal, DTPA (ácido dietilen-triamin-penta-acético) y su sal, EGTA y su sal, NTA

(ácido nitriloacético) y su sal, sorbitol y su sal, ácido tartárico y su sal, N-hidroxiiminodiacetato y su sal, ácido hidroxietil-etilendiamin-tetra-acético y su sal, ácido 1-y 3-propanodiamin-tetra-acético y sus sales, ácido 1-y 3diamin-2-hidroxi propano-tetra-acético y sus sales, gluconato sódico, ácido hidroxietano-di-fosfónico y su sal, o ácido fosfórico y su sal.

10. La composición farmacéutica de la reivindicación 6, donde dicho agente tamponante es citrato, dicho antioxidante es ascorbato y dicho quelante metálico es EDTA.

11. La composición farmacéutica de la reivindicación 10, donde la proporción molar de dicho EDTA con respecto a dicho compuesto está en el intervalo de aproximadamente 0, 001 a aproximadamente 0, 1. 45

12. La composición farmacéutica de la reivindicación 10, donde la proporción molar de dicho ácido ascórbico con respecto a dicho compuesto está en el intervalo de aproximadamente 0, 001 a aproximadamente 1.

13. La composición farmacéutica de la reivindicación 10, donde la proporción molar de dicho citrato con respecto a 50 dicho compuesto está en el intervalo de aproximadamente 0, 05 a aproximadamente 2.

14. La composición farmacéutica de la reivindicación 10, donde la proporción molar de dicho EDTA con respecto a dicho compuesto está en el intervalo de aproximadamente 0, 001 a aproximadamente 0, 1; y la proporción molar de dicho ácido ascórbico con respecto a dicho compuesto está en el intervalo de aproximadamente 0, 001 a aproximadamente 1.

15. La composición farmacéutica de la reivindicación 6, que comprende un antioxidante y un quelante metálico.

16. La composición farmacéutica de la reivindicación 15, donde el antioxidante es ascorbato y el quelante metálico es EDTA.

17. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 16, comprendiendo adicionalmente un agente solubilizador.

18. La composición farmacéutica de la reivindicación 17, donde dicho agente solubilizador es ésteres de ácidos

grasos de polioxietilensorbitán, estearatos de polioxietileno, alcohol bencílico, alcohol etílico, polietilenglicoles, propilenglicol, glicerina, ciclodextrina o poloxámeros.

19. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 18, comprendiendo adicionalmente un agente anti-neoplásico.

20. La composición farmacéutica de la reivindicación 19, donde dicho agente antineoplásico es docetaxel, paclitaxel, mesilato de imatinib, gemcitebina, Velcade (bortezomib) , cisplatino, carboplatino o 5-fluorouracilo.

21. La composición farmacéutica de la reivindicación 20, donde dicho agente antineoplásico es docetaxel o 25 paclitaxel.

22. La composición farmacéutica de la reivindicación 20, donde dicho agente antineoplásico es docetaxel.

23. La composición farmacéutica de la reivindicación 20, donde dicho agente antineoplásico es paclitaxel.

24. La composición farmacéutica de la reivindicación 20, donde dicho agente antineoplásico es mesilato de imatinib.

25. La composición farmacéutica de la reivindicación 20, donde dicho agente antineoplásico es Velcade

(bortezomib) . 35

26. Un compuesto o composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores para su uso en el tratamiento del cáncer.

27. Un compuesto para su uso en el tratamiento del cáncer, donde dicho tratamiento es junto con un agente antineoplásico, donde dicho compuesto es como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.

28. Un compuesto de la reivindicación 27, donde dicho agente antineoplásico es docetaxel, paclitaxel, mesilato de imatinib, gemcitebina, Velcade (bortezomib) , cisplatino, carboplatino o 5-fluorouracilo.

29. Un compuesto de la reivindicación 27, donde dicho agente antineoplásico es docetaxel.

30. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 27 a 29, donde dicho tratamiento es por administración secuencial de dicho compuesto y dicho agente antineoplásico.

31. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 27 a 29, donde dicho tratamiento es por administración simultánea de dicho compuesto y dicho agente antineoplásico.

32. El compuesto de la reivindicación 26, donde dicho tratamiento es por administración de dicho compuesto

mediante un modo seleccionado entre inhalación, oral, intravenoso, sublingual, ocular, transdérmico, rectal, vaginal, 55 tópico, intramuscular, intraarterial, intratecal, subcutáneo, bucal o nasal.

33. El compuesto de la reivindicación 32, donde dicho modo es intravenoso.

34. El compuesto de la reivindicación 26, donde el tratamiento es junto con radioterapia.

35. Un compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde dicho cáncer es un cáncer del sistema hematopoyético, sistema inmunitario, sistema endocrino, pulmonar, sistema gastrointestinal, sistema musculoesquelético, sistema reproductor, sistema nervioso central o sistema urológico, o donde el cáncer se localiza en los tejidos mieloides del mamífero, tejidos linfoides, tejidos pancreáticos, tejidos tiroideos, pulmones, tejidos del

colon, tejidos del recto, tejidos del ano, tejidos hepáticos, piel, hueso, tejidos de ovario, tejidos uterinos, tejidos de cuello uterino, mama, próstata, tejidos testiculares, cerebro, tronco cerebral, tejidos de las meninges, riñón o vejiga.

36. Un compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde dicho cáncer es cáncer de mama, mieloma múltiple, cáncer de próstata, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, carcinoma de células renales, melanoma maligno, cáncer pancreático, cáncer pulmonar, carcinoma colorrectal, cáncer de colon, cáncer cerebral,

cáncer renal, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de vejiga, cáncer tiroideo, cáncer de ovario, cáncer de cuello uterino o síndrome mielodisplásico.

37. Un compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde el cáncer del mamífero es cáncer de mama, leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, melanoma, adenoma múltiple, cáncer 10 microcítico pulmonar, cáncer de ovario o cáncer de próstata.

38. Un compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde dicho cáncer es cáncer pulmonar.

39. Un compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde dicho cáncer es un cáncer no microcítico pulmonar.

40. El compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde el cáncer es cáncer de mama.

41. El compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde el cáncer es leucemia mieloide aguda.

42. El compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde el cáncer es leucemia mieloide crónica. 25

43. El compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde el cáncer es cáncer de ovario.

44. El compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde el cáncer es cáncer de colon.

45. El compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde el cáncer es mieloma múltiple.

46. El compuesto o composición de cualquiera de las reivindicaciones 26 a 34, donde el cáncer es cáncer microcítico pulmonar.

47. Un método de preparación de un compuesto de fórmula 3 que comprende:

combinar un compuesto de fórmula 1:

con un agente reductor, en un disolvente de reacción, seguido de tratamiento con un ácido farmacéuticamente 40 aceptable para dar dicho compuesto de fórmula 3:

donde X-es una base conjugada de un ácido farmacéuticamente aceptable.

48. El método de la reivindicación 47, donde dicho agente de reducción es hidrosulfito sódico, cinc, ácido ascórbico,

o una reducción electroquímica.

49. El método de la reivindicación 47, donde dicho disolvente de reacción es diclorometano, cloroformo,

dicloroetano, clorobenceno, THF, 2-MeTHF, éter dietílico, diglima, 1, 2-dimetoxietano, MTBE, THP, dioxano, 210 etoxibutano, metil butil éter, acetato de etilo, acetato de metilo, 2-butanona, agua o mezclas de los mismos.

50. El método de la reivindicación 47, donde dicho ácido es HCl, HBr, H2SO4, ácido metanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido p-toluenosulfónico, ácido tríflico, ácido canforsulfónico, ácido naftalen-1, 5-disulfónico, ácido etan-1, 2-disulfónico, ácido ciclámico, ácido tiociánico, ácido naftalen-2-sulfónico o ácido oxálico.

51. El método de la reivindicación 47, donde dicho ácido se disuelve en un disolvente orgánico, seleccionado entre el grupo que comprende: EtOAc, DCM, IPA o dioxano.

52. Una sal-Co de un compuesto de la fórmula: