Composiciones y métodos por PCR altamente multiplexada.

Un método de amplificar loci diana en una muestra de ácido nucleico,

el método comprende:

a)poner en contacto una muestra de ácido nucleico que comprende loci diana con una biblioteca de cebadores de prueba que comprende al menos 1.000 diferentes pares de cebadores para producir una mezcla de reacción en un volumen de reacción; donde cada par de cebadores incluye un cebador de prueba directo y un cebador de prueba inverso que se hibridan en el mismo locus diana, y donde los cebadores no incluyen sondas de inversión molecular (MIPs);

b)someter la mezcla de reacción a las condiciones de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para producir productos amplificados que incluyen amplicones diana; donde la concentración de cada cebador de prueba es inferior a 10 nM; donde la longitud del paso de reformación térmica de las condiciones de reacción es superior a 10 minutos; donde al menos 1.000 loci diana diferentes se amplifican simultáneamente; y donde (i) menos de un 20% de los productos amplificados son dímeros del cebador de prueba, (ii) al menos un 80% de los productos amplificados son amplicones diana, y (iii) al menos un 80% de los loci diana están amplificados; y

c) secuenciar los productos amplificados.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2012/066339.

Solicitante: Natera, Inc.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 201 Industrial Road Suite 410 San Carlos, CA 94070 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: ZIMMERMANN, BERNHARD, DR., HILL,MATTHEW M, LACROUTE,PHILIPPE GILBERT, DODD,MICHAEL.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2625079_T3.pdf

 

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