Anticuerpos que se unen a TGF-alfa y Epiregulina.

Un anticuerpo que se une a TGF-alfa y Epiregulina, que comprende una cadena ligera y una cadena pesada,

en el que la cadena ligera comprende una región variable de cadena ligera (LCVR) y la cadena pesada comprende una región variable de cadena pesada (HCVR), en el que LCVR comprende secuencias de amino ácidos LCDR1, LCDR2 y LCDR3, y HCVR comprende secuencias de amino ácidos HCDR1, HCDR2 y HCDR3, en el que LCDR1 es SEQ Nº ID: 4, LCDR2 es SEQ Nº ID: 5, LCDR3 es SEQ Nº ID: 6, HCDR1 es SEQ. Nº ID: 1, HCDR2 es SEQ. Nº ID: 2 y HCDR3 es SEQ. Nº ID: 3.

Anticuerpos que se unen a TGF-alfa y epiregulina

La presente invención se refiere a anticuerpos que se unen a TGF-alfa y Epiregulina y a usos de los mismos.

TGF-alfa y Epiregulina son dos entre siete ligandos del Receptor de Factor de Crecimiento Epidérmico ("EGFR") que normalmente funciona en la cicatrización de heridas tras lesión. La nefropatía diabética ("DN") es una complicación diabética principal y es la causa que conduce a una enfermedad renal de etapa final ("ESRD"). La proteinuria es un marcador clínico de la disminución de la función renal que acompaña a DN y que se asocia a la evolución de la enfermedad y a un mayor riesgo cardiovascular, tal como insuficiencia cardíaca, enfermedad vascular, arritmia. El patrón de vigilancia de DN incluye los inhibidores ACE y los agentes de bloqueo del receptor de angiotensina ("ARBs") que únicamente ralentizan la evolución de la enfermedad y dejan un riesgo residual considerable.

El bloqueo de EGFR atenúa no solo la proteinuria, sino también la patología renal en modelos animales preclínicos de enfermedad renal. No obstante, los inhibidores de EGFR, tales como ERBITUX®, aunque están aprobados para el cáncer, se asocian a efectos secundarios, tales como exantema cutáneo grave sobre la cara y hombros asociado a la inhibición diana en la piel. De este modo, todavía son necesarias terapias alternativas para DN. Además, es necesaria una terapia de tratamiento más eficaz para DN.

Se han descrito los anticuerpos que se unen a TGF-alfa (por ejemplo, véase el documento US 519858). Además, se han descrito los anticuerpos que se unen a Epiregulina (por ejemplo, véase el documento US 29/324491). El documento WO 21137654 divulga el tratamiento de cáncer con anticuerpos que se unen por un lado a TGF-alfa y por otro, a Epiregulina. U. PANCHAPAKESAN y col., CLINEXPERIMENPHARMACOLPHYSIOL, 211, 38; 84-88, divulga el tratamiento de nefropatía diabética con inhibidores de EGFR.

La presente invención proporciona anticuerpos frente a TGF-alfa y Epiregulina para el tratamiento de DN. Además, la presente invención proporciona anticuerpos frente a TGF-alfa y Epiregulina que se unen a la diana in vivo y que posteriormente provocan una reducción de la proteinuria con una reducción concomitante de la evolución de la enfermedad y el riesgo cardiovascular.

La presente invención proporciona anticuerpos terapéuticamente útiles que se unen por un lado a TGF-alfa y por otro, a Epiregulina, que poseen un número de propiedades deseadas. Los anticuerpos de la presente invención tienen elevada afinidad y son selectivos con una actividad de neutralización completa frente a TGF-alfa humana y Epiregulina humana. Cuando se administran, los anticuerpos de la presente invención también tienen como resultado una disminución de la albuminuria y en patología renal para proteína tubular, fibrosis intersticial, expansión de matriz mesangial y dilatación pélvica ex vivo. Además, los anticuerpos preferidos de la presente invención no provocan toxicidad cutánea observada asociada a la inhibición completa de EGFR.

La presente invención proporciona un anticuerpo que se une a TGF-alfa y Epiregulina, que comprende una cadena ligera y una cadena pesada, en el que la cadena ligera comprende una región variable de cadena ligera (LCVR) y la cadena pesada comprende una región variable de cadena pesada (HCVR), en la que LCVR comprende secuencias de amino ácidos LCDR1, LCDR2 y LCDR3, y HCVR comprende secuencias de amino ácidos HCDR1, HCDR2 y HCDR3, en las que LCDR1 es SEQ N° ID: 4, LCDR2 es SEQ N° ID: 5, LCDR3 es SEQ N° ID:6, HCDR1 es SEQ N° ID: 1, HCDR2 es N° ID: 2 y HCDR3 es SEQ N° ID: 3.

La presente invención también proporciona una composición farmacéuticamente aceptable que comprende un anticuerpo de la presente invención, como se describe en la presente memoria, y al menos un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

La presente invención proporciona un anticuerpo de la presente invención, como se describe en la presente memoria, para su uso en el tratamiento de nefropatía diabética.

A través de la presente divulgación, un anticuerpo de la presente invención, como se describe en la presente memoria, se une a TGF-alfa y Epiregulina y comprende una cadena ligera y una cadena pesada, en la que la cadena ligera comprende una región variable de cadena ligera (LCVR) y la cadena pesada comprende una región variable de cadena pesada (HCVR), en el que LCVR comprende secuencias de amino ácidos LCDR1, LCDR2 y LCDR3, y HCVR comprende secuencias de amino ácidos HCDR1, HCDR2 y HCDR3, en las que LCDR1 es SEQ N° ID: 4, LCDR2 es SEQ N° ID: 5, LCDR3 es SEQ N° ID:6, HCDR1 es SEQ N° ID: 1, HCDR2 es N° ID: 2 y HCDR3 es SEQ N° ID: 3.

La presente invención proporciona un anticuerpo, como se describe en la presente memoria, en el que el anticuerpo es selectivo frente a TGF-alfa humana y Epiregulina humana. Además, la presente invención proporciona un anticuerpo, como se describe en la presente memoria, en el que el anticuerpo tiene una actividad de neutralización completa frente a TGF-alfa humana y Epiregulina humana. De forma más preferida, la presente invención proporciona un anticuerpo, como se describe en la presente memoria, en el que el anticuerpo es selectivo y tiene una actividad de neutralización completa frente a TGF-alfa humana y Epiregulina humana.

La presente invención proporciona un anticuerpo, como se describe en la presente memoria, en el que el anticuerpo tiene una constante de equilibrio de disociación, Kd, entre ,1 x 1"9 M y 1, x 1'9 M para TGF-alfa (SEQ N° ID: 18). De forma más preferida, un anticuerpo de la presente invención, como se describe en la presente memoria, tiene una constante de equilibrio de disociación, Kd, entre ,5 x 1"9 M y ,8 x 1'9 M para TGF-alfa. Los valores de Kd se establecen por medio de equilibrio de unión a 25 °C como se describe en el Ejemplo 2.

La presente invención también proporciona un anticuerpo, como se describe en la presente memoria, en el que el anticuerpo tiene una constante de equilibrio de disociación, Kd, entre ,1 x 1"9 M y 3 x 1'9 M para Epiregulinamet- humana (SEQ N° ID: 22). De forma más preferida, un anticuerpo de la presente invención, como se describe en la presente memoria, tiene una constante de equilibrio de disociación, Kd, entre ,5 x 1'9 M y 1 x 1"9 M para Epiregulina humana. Los valores de Kd se establecen por medio de equilibrio de unión a 25 °C como se describe en el Ejemplo 2.

La presente invención proporciona un anticuerpo, como se describe en la presente memoria, en el que el anticuerpo tiene una constante de equilibrio de disociación, Kd, entre, ,1 x 1"9 y 1, x 1"9 para TGF-alfa humana (SEQ N° ID: 18) y un valor de Kd entre ,1 x 1"9 M y 3 x 1"9 M para Epiregulinamet-humana (SEQ N° ID: 22). De forma más preferida, un anticuerpo de la presente invención, como se describe en la presente memoria, tiene una constante de equilibrio de disociación, Kd, entre ,5 x 1"9 M y ,8 x 1'9 para TGF-alfa humana y un valor de Kd entre ,5 x 1'9 y 1 x 1"9 para Epiregulina humana. Los valores de Kd se establecen por medio de equilibrio de unión a 25 °C como se describe en el Ejemplo 2.

La presente Invención proporciona anticuerpos que se unen a TGF-alfa humana y Epiregulina, y provocan una disminución de albuminuria dependiente de la dosis, reducción de la creatlnlna en suero y nitrógeno de urea en sangre ("BUN") in vivo en un modelo residual de riñón de ratón y un modelo db/db de uninefroctomía de ratón como se describe en el Ejemplo 5 y Ejemplo 6, respectivamente.

La presente invención proporciona anticuerpos que se unen a TGF-alfa humana y Epiregulina, y provocan una reducción de la patología renal para proteína tubular y fibrosis intersticial y una disminución de la expansión de la matriz mesangial y dilatación pélvica in vivo en un modelo residual de riñón de ratón y un modelo db/db de uninefroctomía de ratón como se describe en el Ejemplo 5 y Ejemplo 6, respectivamente.

La presente invención proporciona anticuerpos que se unen a TGF-alfa humana y Epiregulina, y se piensa que provocan una reducción de la protelnurla con una reducción concomitante de la evolución de la enfermedad y el riesgo cardiovascular en humanos. Además, la presente invención proporciona anticuerpos que se unen a TGF-alfa humana y Epiregulina, y se piensa que son eficaces en el tratamiento de nefropatía diabética en humanos.

La presente invención proporciona anticuerpos que se unen a TGF-alfa humana y Epiregulina, y no provocan toxicidad cutánea observada en un estudio de toxicidad en macacos de Java como se describe en el Ejemplo 7.

La presente invención proporciona un anticuerpo que se une a TGF-alfa... [Seguir leyendo]

1.- Un anticuerpo que se une a TGF-alfa y Epiregulina, que comprende una cadena ligera y una cadena pesada, en el que la cadena ligera comprende una región variable de cadena ligera (LCVR) y la cadena pesada comprende una región variable de cadena pesada (HCVR), en el que LCVR comprende secuencias de amino ácidos LCDR1, LCDR2 y LCDR3, y HCVR comprende secuencias de amino ácidos HCDR1, HCDR2 y HCDR3, en el que LCDR1 es SEQ N° ID: 4, LCDR2 es SEQ N° ID: 5, LCDR3 es SEQ N° ID: 6, HCDR1 es SEQ. N° ID: 1, HCDR2 es SEQ. N° ID: 2 y HCDR3 es SEQ. N° ID: 3.

2. El anticuerpo de la Reivindicación 1, en el que la secuencia de amino ácidos de LCVR es SEQ N° ID: 9 o SEQ N° ID: 1.

3. El anticuerpo de cualquiera de las Reivindicaciones 1 o 2, en el que la secuencia de amino ácidos de HCVR es SEQ N° ID: 7.

4. El anticuerpo de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 3, en el que la secuencia de amino ácidos de LCVR es SEQ N° ID: 9 y la secuencia de amino ácidos de HCVR es SEQ N° ID: 7.

5. El anticuerpo de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 4, en el que la secuencia de amino ácidos de la cadena ligera es SEQ N° ID: 13 o SEQ N° ID: 14.

6. El anticuerpo de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 5, en el que la secuencia de amino ácidos de la cadena pesada es SEQ N° ID: 12.

7. El anticuerpo de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 6, que comprende dos cadenas ligeras en las que la secuencia de amino ácidos de cada cadena ligera es SEQ N° ID: 13, y dos cadenas pesadas en las que la secuencia de amino ácidos de cada cadena es SEQ N° ID: 12.

8. El anticuerpo de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 3 o las Reivindicaciones 5 a 6, que comprende dos cadenas ligeras en las que la secuencia de amino ácidos de cadena ligera es SEQ N° ID: 14, y dos cadenas pesadas en las que la secuencia de amino ácidos de cada cadena pesada es SEQ N° ID: 12.

9. Una composición farmacéutica que comprende el anticuerpo de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 8, y al menos un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

1. Un anticuerpo de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 8, para su uso en terapia.

11. Un anticuerpo de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 8, para su uso en el tratamiento de nefropatía diabética.

12. Un fragmento de unión a antígeno de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 8.

13. Una composición farmacéutica que comprende el fragmento de unión a antígeno de la Reivindicación 12, y al menos un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

14. Un fragmento de unión a antígeno de la Reivindicación 12 para su uso en terapia.

15. Un fragmento de unión a antígeno de la Reivindicación 12, para su uso en el tratamiento de nefropatía diabética.