Composiciones de anticuerpo contra Ovr110 y procedimientos de uso.

Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 aislado que se une a B7-H4 en una célula de mamífero,

siendo producido dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo por un hibridoma seleccionado entre el grupo queconsiste en los números de acceso a la American Type Culture Collection PTA-6266, PTA-7128 y PTA-7129, ocompitiendo por la unión al mismo epítope que el epítope unido por el anticuerpo monoclonal producido por unhibridoma seleccionado entre el grupo que consiste en los números de acceso a la American Type Culture CollectionPTA-6266, PTA-7128 y PTA-7129.

Composiciones de anticuerpo contra Ovr110 y procedimientos de uso Campo de la invención La presente invención se refiere a composiciones de anticuerpo anti-Ovr110, usos de las mismas y procedimientos in vitro para eliminar células cancerosas de ovario, páncreas, pulmón o mama que expresan Ovr110.

Antecedentes de la invención Cáncer de ovario El cáncer de ovarios es la cuarta causa más común de muerte por cáncer en mujeres en los Estados Unidos, con más de 23.000 nuevos casos y casi 14.000 muertes previstas para el año 2001. Shridhar, V. y col., Cancer Res. 61 (15) : 5895-904 (2001) ; Memarzadeh, S. y Berek, J. S., J. Reprod. Med. 46 (7) : 621-29 (2001) . La American Cancer Society (ACS) estima que habrá aproximadamente 25.580 nuevos casos de cáncer de ovario en 2004 y el cáncer de ovario causará aproximadamente 16.090 muertes en los Estados Unidos. Sitio web ACS: cáncer con la extensión .org del world wide web. Muchas mujeres mueren anualmente de cáncer de ovario que de todas las otras neoplasias ginecológicas combinadas. La incidencia de cáncer de ovario en los Estados Unidos se estima en 14, 2 por 100.000 mujeres al año y 9 mujeres de cada 100.000 mueren cada año de cáncer de ovario. En 2004, aproximadamente el 70-75 % de los nuevos diagnósticos serán carcinoma en fase III y IV con una supervivencia prevista de 5 años de ∼ el 15 %. Jemal y col., Annual Report to the Nation on the Status of Cancer, 1975-2001, with a Special Feature Regarding Survival. Cancer 2004; 101: 3-27. La incidencia del cáncer de ovario es de una gran preocupación en todo el mundo, con una estimación de 191.000 nuevos casos predichos anualmente. Runnebaum, I. B. y Stickeler, E., J. Cancer Res. Clin. Oncol. 127 (2) : 73-79 (2001) . Desafortunadamente, las mujeres con cáncer de ovario normalmente son asintomáticas hasta que la enfermedad ha metastatizado. Como no existe una exploración eficaz para cáncer de ovario, casi el 70 % de las mujeres diagnosticadas tienen una fase avanzada del cáncer con una tasa de supervivencia de cinco años de ∼25-30 %. Memarzadeh, S. y Berek, J. S., supra; Nunns, D. y col., Obstet. Gynecol. Surv. 55 (12) : 746-51. A la inversa, las mujeres diagnosticadas con cáncer de ovario en fase temprana disfrutan de tasas de supervivencia considerablemente mayores. Werness, B. A. y Eltabbakh, G. H., Int'l. J. Gynecol. Pathol. 20 (1) : 48-63 (2001) . Aunque nuestra compresión de la etiología del cáncer de ovario es incompleta, los resultados de investigaciones extensivas en este área apuntan a una combinación de factores de edad, genéticos, reproductivos, y de la dieta/ambientales. La edad es un factor de riesgo clave en el desarrollo de cáncer de ovario: aunque el riesgo de desarrollar cáncer de ovario antes de la edad de 30 es escaso, la incidencia de cáncer de ovario aumenta linealmente entre edades de 30 a 50, aumentando a una velocidad más lenta después de ello, estando la mayor incidencia entre las mujeres septuagenarias. Jeanne M. Schilder y col., Heriditar y Ovarian Cancer: Clinical Syndromes and Management, en Ovarian Cancer 182 (Stephen C. Rubin y Gregor y P. Sutton eds., 2ª ed. 2001) .

Con respecto a los factores genéticos, una historia familiar de cáncer de ovario es el factor de riesgo más significativo en el desarrollo de la enfermedad, dependiendo ese riesgo de la cantidad de miembros afectados en la familia, el grado de su relación con la mujer, y que parientes de primer grado particulares están afectados por la enfermedad. Id. Se han asociado mutaciones en varios genes con el cáncer de ovario, incluyendo BRCA1 y BRAC2, ambos cuales desempeñan una tarea clave en el desarrollo de cáncer de mama, así como hMSH2 y hMLH1, ambos cuales están asociados con cáncer de colon sin poliposis hereditario. Katherine Y. Look, Epidemiology, Etiology, y Screening of Ovarian Cancer, en Ovarian Cancer 169, 171-73 (Stephen C. Rubin y Gregor y P: Sutton eds., 2ª ed. 2001) . BRCA1, localizado en el cromosoma 17, y BRCA2, localizado en el cromosoma 13, son genes supresores tumorales implicados en la reparación del ADN; mutaciones en estos genes están ligadas a casi el 10 % de los cánceres de ovario. Id. en 171-72; Schilder y col., supra en 185-86. hMSH2 y hMLH1 están asociados con la reparación de desapareamientos del ADN, y están localizados en los cromosomas 2 y 3, respectivamente; se ha informado que casi el 3 % de los carcinomas de ovario hereditarios se deben a mutaciones en estos genes. Véase, supra en 173; Schilder y col., supra en 184, 188-89.

También se han asociado factores reproductivos con un riesgo aumentado o reducido de cáncer de ovario. La menopausia tardía, la nuliparidad, y la edad temprana en la primera menstruación se han ligado todos con un elevado riesgo de cáncer de ovario. Schilder y col., supra en 182: una teoría hipotetiza que estos factores aumentan la cantidad de ciclos ovulatorios durante el transcurso de la vida de una mujer, conduciendo a una "ovulación incesante", que se cree que es la causa principal de mutaciones en el epitelio del ovario. Id.; Laura J. Havrilesky y Andrew Berchuck, Molecular Alterations in Sporadic Ovarian Cancer, en Ovarian Cancer 25 (Stephen C. Rubin y Gregor y P. Sutton eds., 2ª ed. 2001) . Las mutaciones pueden explicarse por el hecho de que la ovulación provoca la destrucción y reparación de ese epitelio, necesitando una división celular aumentada, aumentando de este modo la posibilidad de que suceda una mutación indetectada. Id. Puede hallarse soporte a esta teoría en el hecho de que el embarazo, la lactancia, y el uso de anticonceptivos orales, todos los cuales suprimen la ovulación, confieren un efecto protector con respecto al desarrollo de cáncer de ovario. Id.

Entre los factores de la dieta/ambientales, parecería que hay una asociación entre la alta ingesta de grasa animal y carne roja y cáncer de ovario, aunque la vitamina A antioxidante, que evita la formación de radicales libres y también ayuda a mantener la diferenciación celular normal, puede ofrecer un efecto protector. Véase, supra en 169. Informes también han asociado asbestos y el trisilicato de magnesio hidro (talco) , el último de los cuales puede estar presente en diafragmas y compresas sanitarias. Id. en 169-70.

Los procedimientos de exploración actuales para cáncer de ovario, aunque son de alguna utilidad, están bastante limitados en su capacidad de diagnóstico, un problema que es particularmente agudo en fases tempranas del progreso del cáncer cuando la enfermedad es normalmente asintomática pero se trata más fácilmente. Walter J. Burdette, Cancer: Etiology, Diagnosis, and Treatment 166 (1998) ; Memarzadeh y Berek, supra; Runnebaum y Stickeler, supra; Werness y Eltabbakh, supra. Los ensayos de exploración habitualmente usados incluyen examen pélvico retrovaginal bianual, radioinmunoensayo para detectar el marcador tumoral sérico CA-125, y ultrasonografía transvaginal. Burdette, supra en 166. Actualmente, CA-125 es el único marcador sérico clínicamente aprobado para su uso en cáncer de ovario. CA-125 se halla elevado en la mayoría de los cánceres serosos, pero está elevado en solamente la mitad de aquella mujeres con enfermedad en fase temprana. La aplicación clínica principal de CA-125 es en el control del éxito del tratamiento o la detección de recurrencia en mujeres que experimentan tratamiento para cáncer de ovario. Markman M. The Oncologist; 2: 6-9 (1997) . El uso de CA-125 como marcador de exploración está limitado porque está frecuentemente elevado en mujeres con enfermedades benignas tales como endometriosis. Por tanto, existe una necesidad crítica de nuevos marcadores séricos que sean más sensibles y específicos para la detección de cáncer de ovario cuando se usan solos, o en combinación con CA-125. Bast RC. y col., Early Detection of Ovarian Cancer: Promise and Reality in Ovarian Cancer. Cancer Research and Treatment Vol. 107 (Stack MS, Fishman, DA, eds., 2001) .

El examen pélvico no ha logrado producir cantidades adecuadas de diagnósticos tempranos, y los otros procedimientos no son suficientemente precisos. Id. Un estudio informó de que solamente el 15 % de las pacientes que padecían cáncer de ovario se diagnosticaron con la enfermedad en el momento de su examen pélvico. Véase, supra en 174. Además, el ensayo de CA-125 es propenso a dar falsos positivos en mujeres pre-menopáusicas y se ha informado de que son de bajo valor predictivo en mujeres post-menopáusicas. Id. en 174-75. Aunque la ultrasonografía transvaginal ahora es el procedimiento preferido para explorar el cáncer de ovario, es incapaz de distinguir fiablemente entre tumores benignos y malignos, y tampoco puede localizar las neoplasias peritoneales primarias o el cáncer de ovario si el tamaño del ovario es normal. Schilder y col., supra at 194-95.... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 aislado que se une a B7-H4 en una célula de mamífero, siendo producido dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo por un hibridoma seleccionado entre el grupo que consiste en los números de acceso a la American Type Culture Collection PTA-6266, PTA-7128 y PTA-7129, o compitiendo por la unión al mismo epítope que el epítope unido por el anticuerpo monoclonal producido por un hibridoma seleccionado entre el grupo que consiste en los números de acceso a la American Type Culture Collection PTA-6266, PTA-7128 y PTA-7129.

2. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 1 que se internaliza tras la unión a B7-H4 en una célula de mamífero.

3. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el que el anticuerpo se une a un péptido B7-H4 seleccionado entre las SEC ID Nº 32 y 34.

4. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 3, en el que el péptido B7-H4 contiene una modificación post-traduccional.

5. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la modificación posttraduccional es una fosforilación.

6. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el que el anticuerpo se une al epítope que consiste en la SEC ID Nº 45 ó 46.

7. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, en el que la célula de mamífero es una célula cancerosa.

8. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con cualquier reivindicación precedente que está conjugado con un agente inhibidor del crecimiento y/o un agente citotóxico.

9. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 8, en el que el agente citotóxico se selecciona entre toxinas, antibióticos, isótopos radiactivos y enzimas nucleolíticas.

10. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 9, en el que la toxina se selecciona entre ricina, saponina, maitansinoide y caliqueamicina.

11. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con cualquier reivindicación precedente que es un anticuerpo humano, quimérico o humanizado.

12. Una célula que produce el anticuerpo o fragmento de anticuerpo de cualquier reivindicación precedente.

13. Una composición que comprende un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 y un vehículo.

14. Un procedimiento in vitro para destruir una célula cancerosa que expresa B7-H4, que comprende poner en contacto la célula cancerosa con el anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, destruyendo de este modo la célula cancerosa.

15. Una composición para aliviar un cáncer que expresa B7-H4 en un mamífero, que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11.

16. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 14 o una composición de acuerdo con la reivindicación 15, en el que el cáncer se selecciona entre el grupo que consiste en cáncer de ovario, pancreático, pulmonar y de mama.

17. Un procedimiento o composición de acuerdo con la reivindicación 16, en el que el cáncer de ovario es adenocarcinoma metastásico o seroso, el cáncer de mama es cáncer metastásico o carcinoma ductal infiltrante, el cáncer pancreático es cáncer metastásico o el cáncer pulmonar es cáncer metastásico.

18. Una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 15 a 17, en la que la composición se administra junto con al menos un agente quimioterapéutico.

19. Una composición de acuerdo con la reivindicación 18, en la que el agente quimioterapéutico es paclitaxel o derivados del mismo.

20. Un procedimiento para determinar si las células de una muestra expresan B7-H4, que comprende

(a.) poner en contacto una muestra de células con un anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 en condiciones adecuadas para la unión específica del anticuerpo contra B7-H4 a B7-H4 y (b.) determinar el nivel de unión del anticuerpo o fragmento de anticuerpo a las células de la muestra, o el nivel de internalización del anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 por parte de las células de dicha muestra,

en el que la unión del anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 a las células de la muestra o la internalización del anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 por parte de las células de la muestra indica que las células de la muestra expresan B7-H4.

21. Un procedimiento para detectar la sobre-expresión de B7-H4 en una muestra celular de ensayo o en un sujeto, comprendiendo el procedimiento:

(a) combinar una muestra celular de ensayo o una muestra sérica con un anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 en condiciones adecuadas para la unión específica del anticuerpo contra B7-H4 a B7-H4 expresado por las células de dicha muestra de ensayo o muestra sérica,

(b) determinar el nivel de unión del anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 a las células de la muestra de ensayo o el nivel de B7-H4 en la muestra sérica,

(c) comparar el nivel de anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 unido a las células en la etapa (b) con el nivel de unión del anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 a las células de una muestra celular de control,

en el que un aumento en la unión del anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 en la muestra celular de ensayo o en el nivel de B7-H4 en la muestra sérica en comparación con el control es indicativo de sobre-expresión de B7-H4 por las células de la muestra celular de ensayo, o en el sujeto.

22. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 21, en el que la muestra celular de ensayo es una muestra celular cancerosa o el sujeto tiene cáncer.

23. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 22, en el que el cáncer es un cáncer de mama, de ovario, pancreático o pulmonar.

24. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 23, en el que el cáncer de ovario es adenocarcinoma metastásico o seroso, el cáncer de mama es cáncer metastásico o carcinoma ductal infiltrante, el cáncer pancreático es cáncer metastásico o el cáncer pulmonar es cáncer metastásico.

25. Un procedimiento de exploración para anticuerpos que se unan a un epítope que une un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, comprendiendo el procedimiento,

(a.) combinar una muestra que contiene B7-H4 con un anticuerpo de ensayo y un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 para formar una mezcla, (b.) determinar el nivel de anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 unido a B7-H4 en la mezcla y (c.) comparar el nivel de anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 unido en la mezcla de la etapa (a) con una mezcla de control,

en el que el nivel de unión del anticuerpo o fragmento de anticuerpo contra B7-H4 a B7-H4 en la mezcla en comparación con el control es indicativo de la unión del anticuerpo de ensayo a un epítope que une el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-B7-H4 de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11.

26. Una composición para modular la señalización de un receptor de B7-H4 celular inmune de señalización negativa uniendo B7-H4 con el anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 reduciendo de este modo una función inmune suprimida, comprendiendo la composición un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11.

27. Una composición para aliviar una enfermedad autoinmune que expresa B7-H4 en un mamífero, comprendiendo la composición una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo o fragmento de anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11.

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