UTILIZACIÓN DE LA ANTICUERPOS ANTI-ALFA5BETA1 PARA INHIBIR LA PROLIFERACIÓN DE LAS CÉLULAS CANCEROSAS.

Composición farmacéutica que comprende una formulación líquida que comprende:

1,0 a 15 mg/ml de anticuerpo anti-integrina α5ß1; 22 a 28 mM de citrato;

135 a 165 mM de cloruro sódico; polisorbato (Tween ® ) 80 al 0,04 a 0,06%;

y un pH de 6,3 a 6,7;

en la que la cadena pesada del anticuerpo presenta la secuencia:

y en la que la cadena ligera del anticuerpo presenta la secuencia:

Utilización de los anticuerpos anti-alfa5beta1 para inhibir la proliferación de las células cancerosas.

Campo de la invención La presente invención proporciona unas composiciones farmacéuticas que comprenden un anticuerpo que reconoce específicamente la integrina a5º1 expresada sobre la superficie de las células cancerosas y su utilización para inhibir la proliferación de dichas células cancerosas.

Antecedentes de la invención La asociación de la integrina a5º1 con la angiogénesis tumoral se encuentra bien establecida (ver, por ejemplo, la solicitud publicada de patente US nº 2002/0172675, presentada el 7 de mayo de 1999. La integrina a5º1 es una 15 integrina heterodimérica que se une específicamente al ligando fibronectina. Se expresa sobre la superficie de las células endoteliales y media en la adhesión a la fibronectina y en la migración a la misma. La interacción de unión entre a5º1 y fibronectina se ha demostrado que resulta importante par la angiogénesis tumoral. La angiogénesis dentro de un tumor se inicia cuando la liberación de uno o más factores de crecimiento proangiogénicos (por ejemplo FGF, VEGF, PDGF, etc.) activa localmente las células endoteliales. A continuación, estas células endoteliales activadas forman nuevos vasos sanguíneos mediante la unión, a través de su integrina a5º1, a la fibronectina en la matriz extracelular. Se ha demostrado que los anticuerpos anti-a5º1 inhiben la angiogénesis en modelos tumorales in vivo (ver, por ejemplo, el documento US nº 2002/0172675 A1) .

La terapia del cáncer antiangiogénesis se basa en la inhibición de la vascularización tumoral y, de esta manera, en la prevención del crecimiento tumoral continuado y la metástasis (para revisiones ver, por ejemplo, Marx, "A Boost for Tumor Starvation", Science 301:452, 2003; Sato, "Molecular Diagnosis of Tumor Angiogenesis and Anti-Angiogenic Cancer Therapy", Int. J. Clin. Oncol. 8:200, 2003; Bissachi et al., "Anti-Angiogenesis and Angioprevention: Mechanisms, Problems and Perspectives", Cancer Detec. Prev. 27:229, 2003) . En la actualidad, más de 60 terapéuticos basados en la antiangiogénesis se encuentra en desarrollo clínico para el tratamiento del cáncer. Aunque en algunos cánceres puede resultar posible "someter a ayuno" a un tumor mediante la prevención de su vascularización, la investigación actual demuestra que existen cánceres que aparentemente no son vulnerables al tratamiento antiangiogénesis (ver Sato, supra) . Por ejemplo, el terapéutico anticuerpo anti-VEGF AVASTINTM (bevacizumab) ha tenido éxito en ensayos clínicos para el cáncer de colon, pero no para el cáncer de mama (ver Marx, supra) . Además, los métodos terapéuticos basados en la antiangiogénesis no resultan muy adecuados para el tratamiento en un estadio temprano en el caso de que no se haya iniciado todavía el proceso de vascularización del tumor.

Debido a su acción en la angiogénesis, la integrina a5º1 ha sido propuesta como diana terapéutica para numerosas enfermedades mediadas por procesos angiogénesis, incluyendo el crecimiento tumoral canceroso. Se han desarrollado anticuerpos quiméricos y humanizados contra a5º1 que bloquean la unión específica a la fibronectina. Se ha demostrado que un anticuerpo quimérico de a5º1, M200 (también conocido por su nombre genérico: volociximab) induce in vitro la apoptosis de las células endoteliales activadas con independencia del estímulo de factor de crecimiento.

45 De esta manera, siguen resultando necesarios terapias del cáncer y métodos de tratamiento en estadios tempranos que puedan destruir directamente las células cancerosas antes de que ni siquiera se haya iniciado el proceso de vascularización tumoral, o cuando una terapia focalizada antiangiogénesis haya demostrado su ineficacia.

Sumario de la invención 50 La presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una formulación líquida que comprende:

1, 0 a 15 mg/ml de anticuerpo antiintegrina a5º1, 55 22 mM a 28 mM de citrato;

135 mM a 165 mM de cloruro sódico;

60 polisorbato (Tween®) 80 al 0, 04-0, 06%;

y un pH de entre 6, 3 y 6, 7;

en la que la cadena pesada del anticuerpo presenta la secuencia siguiente: 65

y en la que la cadena ligera del anticuerpo presenta la secuencia:

En una forma de realización preferida, la composición de la invención está destinada a la utilización en la inhibición de la proliferación de una célula cancerosa (o tumoral) que expresa integrina a5 1 sobre su superficie, comprendiendo la puesta en contacto de la célula tumoral con un anticuerpo que se une a la integrina a51

expresada sobre la superficie de la célula tumoral. En una forma de realización preferida, la célula tumoral se encuentra en un paciente con un tumor sólido refractario. En otra forma de realización preferida, la célula tumoral es de un cáncer seleccionado de entre el grupo constituido por: cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer de colon, fibrosarcoma, cáncer de pulmón, melanoma metastásico, cáncer pancreático, cáncer de próstata, cáncer ovárico, carcinoma de células renales y cáncer de bazo.

En otra forma de realización, la composición de la invención está destinada a la utilización en la inducción de la muerte de una célula tumoral que expresa integrina a5 1 sobre su superficie, comprendiendo la puesta en contacto de la célula tumoral con un anticuerpo que se une a la integrina a5 1 expresada sobre la superficie de la célula tumoral. En una forma de realización preferida, la célula tumoral se encuentra en un paciente que presenta un tumor sólido refractario. En otra forma de realización preferida, la célula tumoral es de un cáncer seleccionado de entre el grupo constituido por cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer de colon, fibrosarcoma, cáncer de pulmón, melanoma metastásico, cáncer pancreático, cáncer de próstata, cáncer ovárico, carcinoma de células reales y cáncer de bazo.

En una forma de realización adicional, la composición de la invención está destinada a la utilización en la inhibición de la proliferación de una célula cancerosa en un paciente en el que la célula cancerosa expresa integrina a51 sobre su superficie. En esta forma de realización, la utilización comprende administrar en el paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de anticuerpo. En la presente memoria se describe un anticuerpo que inhibe competitivamente la unión de M200 a la integrina a5 1 sobre la superficie de la célula cancerosa. El anticuerpo comprende una región variable con una secuencia de aminoácidos sustancialmente idéntica a las secuencias SEC ID nº 2, 4, 6 y 8. En una forma de realización preferida, el anticuerpo administrado en el paciente neutraliza por lo menos una actividad biológica de la integrina a5 1. El anticuerpo administrado en el paciente puede comprender una fracción efectora terapéutica (por ejemplo un conjugado de anticuerpo-fármaco) . En todavía otra forma de realización, el anticuerpo se administra en el paciente, en serie o conjuntamente con otro agente quimioterapéutico.

En otra forma de realización preferida, el anticuerpo se administra en un paciente que presenta un tumor sólido refractario, en serie o conjuntamente con otro agente quimioterapéutico.

En otra forma de realización, la composición de la invención está destinada a la utilización en el tratamiento de un sujeto que se sospecha que está desarrollado un cáncer que expresa a5 1 sobre la superficie de sus células, en el que el sujeto todavía no ha desarrollado un tumor, comprendiendo la administración en el sujeto de una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo que se une a la integrina a5 1. En una forma de realización preferida, el cáncer se selecciona de entre el grupo constituido por cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer de colon, fibrosarcoma, cáncer de pulmón, melanoma metastásico, cáncer pancreático, cáncer de próstata, cáncer ovárico, carcinoma de células renales y cáncer de bazo.

En otra forma de realización, la composición de la invención está destinada a la utilización en el tratamiento de un sujeto con una predisposición genética para un cáncer que expresa la a5 1 en la que el sujeto no ha desarrollado todavía un tumor que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición farmacéutica de una composición farmacéutica que comprende un... [Seguir leyendo]

1. Composición farmacéutica que comprende una formulación líquida que comprende:

1, 0 a 15 mg/ml de anticuerpo anti-integrina a5 1; 22 a 28 mM de citrato; 135 a 165 mM de cloruro sódico;

polisorbato (Tween®) 80 al 0, 04 a 0, 06%; y un pH de 6, 3 a 6, 7; 15 en la que la cadena pesada del anticuerpo presenta la secuencia:

y en la que la cadena ligera del anticuerpo presenta la secuencia:

2. Composición farmacéutica según la reivindicación 1, en la que la composición líquida comprende:

10 mg/ml de anticuerpo anti-integrina a5 1; 25 mM de citrato; 150 mM de cloruro sódico;

polisorbato (Tween®) 80 al 0, 05%; y un pH de 6, 5.

3. Composición farmacéutica según la reivindicación 1, en la que la composición comprende además un agente quimioterapéutico.

4. Composición según la reivindicación 1 para la utilización en la inhibición de la proliferación de una célula cancerosa en un paciente en el que la célula cancerosa expresa la integrina a5 1 sobre su superficie.

5. Composición según la reivindicación 1 para la utilización en el tratamiento de un cáncer que expresa la integrina 5 a5 1, en la que el sujeto no ha desarrollado todavía un tumor.

6. Composición según la reivindicación 1 para la utilización según la reivindicación 4 ó 5, en la que el cáncer se selecciona de entre el grupo constituido por cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer de colon, fibrosarcoma, cáncer de pulmón, melanoma metastásico, cáncer pancreático, cáncer de próstata, cáncer ovárico, carcinoma de células renales y cáncer de bazo.

7. Composición según la reivindicación 1 para la utilización según la reivindicación 4 ó 5, en la que el cáncer es el carcinoma de células renales o el melanoma metastásico.

8. Composición según la reivindicación 1 para la utilización según la reivindicación 4 ó 5, en la que el anticuerpo se encuentra a una dosis terapéuticamente efectiva de 10 mg/kg.