Uso de inhibidores de la degradación de p27, en particular argirina y derivados de la misma, para el tratamiento del cáncer.

Uso de un compuesto de fórmula I:

en la que

R1 y R2 son,

de forma independiente, hidrógeno, alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con OH o alcoxi C1-C4;

R3 es hidrógeno, alquilo C1-C8 que está insustituido o sustituido con OH u OR, en el que R está seleccionado dehidrógeno, alquilo C1-C4, arilo o acetilo,

R4 10 es hidrógeno, halógeno, alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con OH o alcoxi C1-C4;

R5 es hidrógeno o halógeno;

R6 es hidrógeno o alquilo C1-C4; y

X es C≥CH2 o CHR7 en el que R7 es alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con -S-alquilo C1-C4 y sus salesfarmacéuticamente aceptables, para la producción de un medicamento para el tratamiento de cáncer en un sujeto.

Uso de inhibidores de la degradación de p27, en particular argirina y derivados de la misma, para el tratamiento del cáncer

La presente invención se refiere al uso de macrociclos concretos que son inhibidores de la degradación proteasómica de p27, en particular argirina y derivados de la misma, preferentemente argirina A, para el tratamiento del cáncer, así como la derivatización de dichos macrociclos.

Las transiciones entre fases del ciclo celular son catalizadas por una familia de quinasas dependientes de ciclina (Cdk) (Nurse, 1990; Hartwell, 1991) . En algunos organismos, las señales fisiológicas que controlan la transición de G2 a M apuntan a una serie de etapas que activan el Cdk, Cdc2. La activación de Cdc2 está regulada positivamente por la fosforilación en treonina 161 (Booher y Beach, 1986; Krek y Nigg, 1991; Gould y col., 1991; Solomon y col., 1990; 1992) y negativamente mediante fosforilación en tirosina 15 (Gould y Nurse, 1989) . La replicación incompleta de ADN retrasa la desfosforilación de tyr-15 (Dasso y Newport, 1990; Smythe y Newport, 1992) , y las mutaciones en Cdc2 que convierten la tyr-15 en un residuo no fosforilable son letales y producen una mitosis prematura (Gould y Nurse, 1989) . De un modo similar, la sobreexpresión de la tyr-15 fosfatasa, Cdc25 (Enoch y Nurse, 1990; Kumagai y Dunphy, 1991) , o la pérdida de las tyr-15 quinasas (Ludgren y col., 1991) sortean el requisito de que la replicación del ADN se complete antes de que comience la mitosis. Probablemente se requieran niveles de control para explicar completamente el bloqueo de la mitosis producido por la replicación continua del ADN (Sorger y Murray, 1992; Heald y col., 1993; Stueland y col., 1993) . También existen pruebas de que la parada del ciclo celular inducida por los daños en el ADN puede estar relacionada con la inactivación de Cdc2 (Rowley y col., 1992; Walworth y col., 1993) , pero se ha cuestionado el papel de la fosforilación de la tirosina en este contexto (Barbet y Carr, 1993) .

Las células de mamífero, como levaduras, requieren quinasas dependientes de ciclina para la progresión a través de G1 y la entrada en la fase S (D’Urso y col., 1990; Blow y Nurse, 1990; Furukawa y col., 1990; Fang y Newport, 1991; Pagano y col., 1993; Tsai y col., 1993) . Las ciclinas tanto de tipo D como E son limitantes de la velocidad para la transición de G1 a S y ambas reducen, pero no eliminan, el requisito de la célula de factores de crecimiento mitogénico (Ohtsubo y Roberts, 1993; Quelle y col., 1993) .

La reducción de los niveles celulares del inhibidor de la ciclina quinasa p27kipl con frecuencia se encuentra en muchos cánceres humanos y se correlacionan directamente con el pronóstico de los pacientes (Philipp-Staheli, J., Payne, S.R. y Kemp, C.J. p27 (Kipl) : regulation and function of a haplo-insufficient tumour suppressor and its misregulation in cancer. Exp Cell Res 264, 148-68 (2001) ) . Específicamente, se ha demostrado que el recambio proteasómico dependiente de ubiquitina reduce la expresión de p27 en muchos cánceres humanos (Loda, M. y col., Increased proteasome-dependent degradation of the cyclin dependent kinase inhibitor p27 in aggressive colorectal carcinomas. Nat Med 3, 231-4 (1997) ) .

El documento US 5, 688, 665 describe una proteína que tiene un peso molecular aparente de aproximadamente 27 kD y capaz de unirse a un complejo ciclina E-Cdk2, designado p27, y de inhibir la activación. Además se describen procedimientos de determinar si un agente es capaz de inhibir o potenciar específicamente la capacidad de la proteína p27 para inhibir la activación del complejo ciclina E-Cdk2. Asimismo, el documento US 6, 355, 774 divulga la proteína p27 así como un procedimiento para producir p27 en células cultivadas. También se proporcionan ensayos in Vitro para descubrir agentes que afecten a la actividad de p27. Además se proporcionan procedimientos de diagnóstico y tratamiento de trastornos hipoproliferativos.

Porter y col. (Porter PL, Barlow WE, Yeh IT, Lin MG, Yuan XP, Donato E, Sledge GW, Shapiro CL, Ingle JN, Haskell CM, Albain KS, Roberts JM, Livingston RB, Hayes DF. p27Kip1 and Cyclin E Expression and Breast Cancer Survival After Treatment With Adjuvant Chemotherapy. J Natl Cancer Inst. 2006 Dec 6;98 (23) :1723-31.) describen que la expresión anormal de las proteínas reguladoras del ciclo celular p27 (Kip1) (p27) pueden estar asociadas con la supervivencia y recaída del cáncer de mama. Una expresión menor de p27 se asoció con una peor supervivencia global y supervivencia sin enfermedad que la expresión de p27 mayor. La expresión menor de p27 parece estar asociada con un mal pronóstico, especialmente entre pacientes con tumores positivos a receptores de esteroides.

El documento WO 02/055665 del ejemplo 8 del mismo describe ensayos que se han usado para identificar la interacción de Skp2 y p27 in vitro. Los ensayos se describen como útiles para analizar compuestos que inhiban la proliferación celular. Los ensayos se pueden llevar a cabo en presencia o ausencia de moléculas, compuestos, péptidos y las moléculas identificadas por los ensayos se describen como fármacos potencialmente útiles como agentes terapéuticos contra el cáncer y trastornos proliferativos. No se describen moléculas específicas como se han identificado.

De un modo similar, el documento US 2006-35280 describe una rápida detección selectiva de grandes bibliotecas de compuestos usando un ensayo de fluorescencia resuelta con tiempo homogéneo para la identificación de inhibidores de la unión de Cksl-Skp2 que desempeña un papel crítico en la degradación dependiente de ubiquitina de p27.

Pohl y col., (Pohl G, Rudas M, Dietze O, Lax S, Markis E, Pirker R, Zielinski CC, Hausmaninger H, Kubista E, Samonigg H, Jakesz R, Filipits M. High p27Kip1 expression predicts superior relapse-free and overall survival for premenopausal women with early-stage breast cancer receiving adjuvant treatment with tamoxifen plus goserelin. J Clin Oncol. 2003 Oct 1;21 (19) :3594-600.) describen que una expresión alta de p27Kip1 predecía independientemente una supervivencia sin recaídas y una supervivencia global superiores en pacientes tratados con la terapia endocrina de combinación. Por tanto, la expresión alta de p27Kip1 puede ser útil para la selección de mujeres premenopáusicas con cáncer de mama positivo para receptor hormonal en estadio temprano para la terapia endocrina de combinación adyuvante.

El documento GB 2, 367, 553 divulga macrociclos farmacéuticamente activos y las respectivas preparaciones farmacéuticas para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias, la inducción de inmunotolerancia o el tratamiento de infecciones bacterianas.

Es un objeto de la presente invención proporcionar compuestos que se pueden usar y estrategias que se pueden perseguir con el fin de estabilizar p27, con el objetivo de usarlos como agentes terapéuticos para el tratamiento de enfermedades cancerosas.

De acuerdo con un primer aspecto de la presente invención, este objeto se resuelve mediante el uso de un compuesto de fórmula general I

(fórmula I)

en la que R1 y R2 son hidrógeno, alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con OH o alcoxi C1-C4; R3 es hidrógeno, alquilo C1-C8 que está insustituido o sustituido con OH u OR, en el que R está seleccionado de hidrógeno, alquilo C1-C4, arilo o acetilo,

R4 es hidrógeno, halógeno, alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con OH o alcoxi C1-C4; R5 es hidrógeno o halógeno; R6 es hidrógeno o alquilo C1-C4; y X es C=CH2 o CHR7 en el que R7 es alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con -S-alquilo C1-C4 y sus sales farmacéuticamente aceptables,

para la producción de un medicamento para el tratamiento del cáncer en un sujeto.

Se prefiere el uso de acuerdo con la presente invención, en el que R1, R2 y R3 son, de forma independiente, hidrógeno, alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con OH o alcoxi C1-C4; R4 es hidrógeno, halógeno, alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con OH o alcoxi C1-C4;

R5 es hidrógeno o halógeno;

R6 es hidrógeno o alquilo C1-C4; y X es C=CH2 o CHR7 en el que R7 es alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con -S-alquilo C1-C4 y sus sales farmacéuticamente aceptables, para la producción de un medicamento para el tratamiento del cáncer en un sujeto.

Se entenderá que los compuestos definidos anteriormente pueden llevar sustituyentes dentro de su estructura, por ejemplo pueden llevar sustituyentes de restos amino adecuados.

Los grupos y restos alquilo en los compuestos de fórmula I pueden ser de cadena lineal o ramificada. Los grupos alquilo son, adecuadamente, de cadena... [Seguir leyendo]

1. Uso de un compuesto de fórmula I:

(fórmula I)

en la que R1 y R2 son, de forma independiente, hidrógeno, alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con OH o alcoxi C1-C4; R3 es hidrógeno, alquilo C1-C8 que está insustituido o sustituido con OH u OR, en el que R está seleccionado de hidrógeno, alquilo C1-C4, arilo o acetilo,

R4 es hidrógeno, halógeno, alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con OH o alcoxi C1-C4; R5 es hidrógeno o halógeno; R6 es hidrógeno o alquilo C1-C4; y X es C=CH2 o CHR7 en el que R7 es alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con -S-alquilo C1-C4 y sus sales farmacéuticamente aceptables, para la producción de un medicamento para el tratamiento de cáncer en un sujeto.

2. Uo de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R1, R2 y R3 son, de forma independiente, hidrógeno, alquilo C1-C8 que está insustituido o sustituido con OH o alcoxi C1-C4; R4 es hidrógeno, halógeno, alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con OH o alcoxi C1-C4; R5 es hidrógeno o halógeno;

R6 es hidrógeno o alquilo C1-C4; y X es C=CH2 o CHR7 en el que R7 es alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con -S-alquilo C1-C4 y sus sales farmacéuticamente aceptables.

3. Uso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en el que R1 es hidrógeno o alquilo C1-C4 insustituido, por ejemplo metilo;

R2 es hidrógeno o alquilo C1-C4 que está insustituido o sustituido con OH, por ejemplo metilo o hidroximetilo; R3 es hidrógeno o alquilo C1-C4, por ejemplo metoxi; R4 representa hidrógeno o alquilo C1-C4 insustituido, por ejemplo metilo; R5 es hidrógeno o bromo; R6 es hidrógeno o metilo; y

X es C=CH2 o CHR7 en el que R7 es metilo que está insustituido o sustituido con -S-etilo y sus sales farmacéuticamente aceptables.

4. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R1 es hidrógeno o metilo; R2 es metilo o hidroximetilo; R3 es hidrógeno o metoxi;

5. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el compuesto tiene la fórmula siguiente Y sus sales farmacéuticamente aceptables 6. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicho compuesto es argirina F y sales farmacéuticamente aceptables de la misma.

7. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que el sujeto es un mamífero, tal como, por ejemplo, un ser humano.

8. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que el tratamiento del cáncer comprende bloquear el crecimiento de las células tumorales y/o destruir la vasculatura tumoral existente, el tratamiento del cáncer de mama, el tratamiento del carcinoma hepatocelular, el tratamiento del carcinoma cervical, el tratamiento del

carcinoma pulmonar, el tratamiento del mieloma múltiple y/o el tratamiento del cáncer de colon.

9. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que el medicamento comprende además ingredientes antitumorales adicionales farmacéuticamente activos, tales como paclitaxel.

10. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que el compuesto se administra a una dosis

de 0, 01 mg a 200 mg/kg, preferentemente a una dosis de 0, 01 mg a 100 mg/kg, más preferentemente a una dosis 25 de 0, 02 mg a 10 mg/kg.