Un procedimiento de producción de un compuesto macrociclo de acuerdo con la fórmula general (I) siguienteen la que

R1 y R2 son de forma independiente hidrógeno,

alquilo C1-C4 que no está sustituido o está sustituido con OH oalcoxi C1-C4;

R3 es metoxi

R4 es hidrógeno

R5 es hidrógeno

R6 es hidrógeno o alquilo C1-C4;

R7 es hidrógeno o alquilo C1-C4 que no está sustituido o está sustituido con OH o alcoxi C1-C4; y

X es C≥CH2 o CHR8 , en el que R8 es alquilo C1-C4 que no está sustituido o está sustituido con -S-alquilo C1-C4,y los estereoisómeros y sales farmacéuticamente aceptables del mismo, que comprende la síntesis de 4-metoxi-Ltriptófano,

opcionalmente protegido, en el que dicho 4-metoxi-L-triptófano opcionalmente protegido se produce pormedio de una ruta de hidrogenación catalítica estereoselectiva, que comprende las etapas de acuerdo con elesquema siguiente.

Procedimiento de producción de intermedios para la producción de nuevos macrociclos que son inhibidores de la degradación proteasómica de P27, tales como argirina y derivados de la misma, y usos de dichos macrociclos

La presente invención se refiere a macrociclos de argirina que son inhibidores de la degradación proteasómica de p27, para uso en una diversidad de estados patológicos, tales como la inducción de tolerancia inmunitaria, enfermedades autoinmunitarias, infecciones bacterianas y enfermedades proliferativas, tales como cánceres.

La reducción en los niveles celulares del inhibidor de cinasa dependiente de la ciclina p27kip1 se encuentra con frecuencia en muchos cánceres humanos y se relaciona directamente con el pronóstico en el paciente (Philipp-Staheli, J., Payne, S.R. and Kemp, C.J. p27 (Kip1) : regulation and function of a haplo-insufficient tumour suppressor and its misregulation in cancer. Exp Cell Res 264, 148-68 (2001) ) . De forma específica, la renovación del proteasoma dependiente de ubiquitina ha mostrado ser la causa de una menor expresión de p27 en muchos cánceres humanos (Loda, M. et al. Increased proteasome-dependent degradation of the cyclin dependent kinase inhibitor p27 in aggressive colorectal carcinomas. Nat Med 3, 231-4 (1997) ) .

El documento US 6.355.774 divulga la proteína p27 así como un procedimiento para la producción de p27 en células cultivadas. También se proporcionan ensayos in vitro para descubrir agentes que afecten a la actividad de p27. Además, se proporcionan procedimientos de diagnóstico y tratamiento de trastornos hiperproliferativos.

El documento WO 02/055665, en el Ejemplo 8 del mismo, describe ensayos que se han usado para identificar la interacción de Skp2 y p27 in vitro. Se describe que los ensayos son útiles para probar compuestos que inhiben la proliferación celular. Los ensayos se pueden llevar a cabo en presencia o no de moléculas, compuestos, péptidos y dichas moléculas identificadas por los ensayos son fármacos potencialmente útiles descritos como agentes terapéuticos contra el cáncer y trastornos proliferativos. Se describen moléculas específicas tal como se identifican.

El documento GB 2.367.553 divulga macrociclos farmacéuticamente activos (“argirinas”) y preparaciones farmacéuticas respectivas para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias, la inducción de tolerancia inmunitaria o el tratamiento de infecciones bacterianas.

Sasse F et al. (en Sasse F, Steinmetz H, Schupp T, Petersen F, Memmert K, Hofmann H, Heusser C, Brinkmann V, von Matt P, Hofle G, Reichenbach H. Argyrins, immunosuppressive cyclic peptides from myxobacteria. I. Production, isolation, physico-chemical and biological properties. J Antibiot (Tokyo) . 2002 Jun;55 (6) :543-51) describen la producción de un grupo de péptidos cíclicos denominados argirinas, así como sus propiedades biológicas. Vollbrecht et al. (en Vollbrecht L, Steinmetz H, Hofle G, Oberer, L, Rihs G, Bovermann G, and von Matt P. Argyrins, immunosuppressive cyclic peptides from myxobacteria. II. Structure elucidation and stereochemistr y . J Antibiot (Tokyo) . 2002 Aug; 55 (8) :715-721) describen la estructura de dichos péptidos cíclicos.

De igual similar, Ley et al. (en Ley SV, Priour A, Heusser C. Total synthesis of the cyclic heptapeptide Argyrin B: a new potent inhibitor of T-cell independent antibody formation. Org Lett. 2002 Mar 7;4 (5) :711-4) describen la síntesis de argirina B y su función como inhibidor de la formación de anticuerpos.

El documento EP 07004185.0 describe el uso de los macrociclos del documento GB 2.367.553 para la producción de un medicamento para el tratamiento de cáncer en un sujeto.

Por tanto, la argirinas y los macrociclos relacionados son candidatos de interés para el posterior desarrollo de medicamentos para el tratamiento en una serie de estados patológicos, tales como la inducción de tolerancia inmunitaria, enfermedades autoinmunitarias, infecciones bacterianas y enfermedades proliferativas, tales como cánceres.

No obstante, el aprovechamiento completo del potencial farmacéutico de las argirinas y sus derivados relacionados es difícil debido a su estructura química relativamente compleja, que requiere importantes esfuerzos para aislar cantidades suficientes de los compuestos (por ejemplo, a partir de microorganismos) y limita el número de compuestos eficaces de esta familia que están disponibles fácilmente para estudios y tratamiento.

Por tanto, un objeto de la presente invención es proporcionar procedimientos mejorados para la producción de compuestos de la familia de las argirinas, e intermedios respectivos. Otro objeto de la presente invención es proporcionar además nuevos miembros de la familia de las argirinas que se puedan usar como agentes terapéuticos para el tratamiento en una diversidad de estados patológicos, tales como la inducción de tolerancia inmunitaria, enfermedades autoinmunitarias, infecciones bacterianas y enfermedades proliferativas, tales como cánceres.

De acuerdo con un primer aspecto de la presente invención, el objeto anterior se soluciona con un procedimiento para producir un compuesto macrociclo de acuerdo con la siguiente fórmula general (I)

en la que R1 y R2 son de forma independiente hidrógeno, alquilo C1-C4 que no está sustituido o está sustituido con OH o alcoxi C1-C4;

R3 es metoxi R4 es hidrógeno R5 es hidrógeno R6 es hidrógeno o alquilo C1-C4; R7 es hidrógeno o alquilo C1-C4 que no está sustituido o está sustituido con OH o alcoxi C1-C4; y

X es C=CH2 o CHR8, en el que R8 es alquilo C1-C4 que no está sustituido o está sustituido con -S-alquilo C1-C4, y los estereoisómeros y sales farmacéuticamente aceptables del mismo. Se prefiere adicionalmente un procedimiento para la producción de un compuesto macrociclo de acuerdo con la presente invención, en el que dicho compuesto macrociclo está seleccionado de una argirina, tal como argirina A-F, B/F, y Ala alfa y Ala beta, y los estereoisómeros aislados del mismo.

Otro aspecto de la presente invención se refiere además a un compuesto macrociclo como el producido de acuerdo con la presente invención, que está seleccionado del grupo de argirinas Ala-beta y Ala-alfa. Otro aspecto más de la presente invención se refiere además a un procedimiento para la producción de un compuesto macrociclo de acuerdo con la presente invención que comprende el uso de 4-metoxi-L-triptófano, opcionalmente protegido, en el que dicho 4-metoxi-L-triptófano opcionalmente protegido se produce por medio de

una ruta de hidrogenación catalítica estereoselectiva, que comprende las etapas de acuerdo con el esquema siguiente Hasta ahora, el 4-metoxi-L-triptófano solo se podía producir por medio de una resolución enzimática (Ley, S. V.; Priour, A. Eur. J. Org. Chem. 2002, 3995-4004; Ley, S. V.; Priour, A.; Heusser, C. Org. Lett. 2002, 4, 711-714) . Los rendimientos que se pueden obtener en general nunca superan el 50%. En la práctica, solo se alcanzaron

rendimientos de tan solo entre un 10 y un 40%.

Por tanto, una característica y ventaja particular de la presente invención es que la combinación de los grupos protectores divulgados en el presente documento, y una desprotección ácida final produce argirina, y en particular argirina F. No es trivial que los grupos protectores t-butilo (tBu) que se requieren para la argirina, y en particular para la argirina F, se puedan desproteger al final, sin comprometer el doble enlace.

La invención incluye también el procedimiento mejorado para producir el aminoácido 4-metoxi-L-triptófano sin resolución enzimática, y usos del producto para la síntesis de macrociclos, tales como argirinas.

Se prefiere un procedimiento para la producción de un compuesto macrociclo de acuerdo con la presente invención

o 4-metoxi-L-triptófano como antes, en el que el rendimiento de la síntesis se encuentra que es mayor de un 90%.

Se prefiere un procedimiento para la producción de un compuesto macrociclo de acuerdo con la presente invención 15 o 4-metoxi-L-triptófano como antes, en el que el la síntesis se lleva a cabo sin el uso de enzimas.

Otro aspecto de la presente invención es un macrociclo.

Nuevos compuestos preparados usando el procedimiento de la invención son: y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Otro... [Seguir leyendo]

1. Un procedimiento de producción de un compuesto macrociclo de acuerdo con la fórmula general (I) siguiente

en la que

R1 y R2 son de forma independiente hidrógeno, alquilo C1-C4 que no está sustituido o está sustituido con OH o alcoxi C1-C4; R3 es metoxi R4 es hidrógeno R5 es hidrógeno

R6 es hidrógeno o alquilo C1-C4; R7 es hidrógeno o alquilo C1-C4 que no está sustituido o está sustituido con OH o alcoxi C1-C4; y X es C=CH2 o CHR8 , en el que R8 es alquilo C1-C4 que no está sustituido o está sustituido con -S-alquilo C1-C4, y los estereoisómeros y sales farmacéuticamente aceptables del mismo, que comprende la síntesis de 4-metoxi-Ltriptófano, opcionalmente protegido, en el que dicho 4-metoxi-L-triptófano opcionalmente protegido se produce por

medio de una ruta de hidrogenación catalítica estereoselectiva, que comprende las etapas de acuerdo con el esquema siguiente

2. El procedimiento de producción de un compuesto macrociclo de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende

una etapa final de desprotección ácida del grupo protector t-butilo (tBu) que es requerida para argirina, y en particular argirina F.

3. El procedimiento de producción de un compuesto macrociclo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones

1 a 2, en el que dicho compuesto macrociclo a preparar se selecciona de una argirina, tal como argirina A-F, B/F, y 5 Ala-alfa y Ala-beta, y los estereoisómeros aislados de las mismas.

4. El procedimiento de producción de un compuesto macrociclo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que la síntesis se lleva a cabo sin el uso de enzimas.

5. El procedimiento de producción de un compuesto macrociclo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que la síntesis comprende síntesis de péptidos en fase sólida.

6. Un compuesto macrociclo que está seleccionado de las siguientes fórmulas:

y estereoisómeros y sales farmacéuticamente aceptables del mismo.

7. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto macrociclo de acuerdo con la reivindicación 6, 15 junto con vehículos y/o excipientes farmacéuticamente aceptables.

8. El compuesto macrociclo de acuerdo con la reivindicación 6 o la composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 7 para el tratamiento de estados patológicos y enfermedades en un sujeto, en el que dicha enfermedad o afección está seleccionado preferentemente de inducción de tolerancia inmunitaria, enfermedades autoinmunitarias, infecciones bacterianas y enfermedades proliferativas, tales como psoriasis o cánceres, tal como

cáncer de mama, carcinoma hepatocelular, mieloma, carcinoma de cuello de útero, carcinoma de pulmón y cáncer de colon.

Figura 1

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