Una sal de fosfato cristalina de 8-fluoro-2-{4-[ (metilamino) metil]fenil}1,

3, 4, 5-tetrahidro-6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6ºna, en la que la sal es un polimorfo sustancialmente puro de la Forma I con un patrón de difracción de rayos X en polvo que comprende picos a unos ángulos de difracción (28) de 10, 9, 19, 3, 22, 9 y 25, 0, y en la que dicho polimorfo es un hidrato.

Formas polimorías de la sal de fosfato de 8-fluoro-2-{4-[ (metilamino) metil]fenil}-1, 3, 4, 5-tetrahidro-6h-acepin[5, 4, 3cd]indol-6-ona.

Esta solicitud reivindica el beneficio de la Solicitud Provisional de EE.UU. Nº 60/612.459 presentada el 22 de septiembre de 2004 y de la Solicitud Provisional de EE.UU. Nº 60/679.296 presentada el 9 de mayo de 2005.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a nuevas formas polimorías de la sal de fosfato de 8-fluoro-2-{4[ (metilamino) metil]fenil}-1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6-ona, y a métodos para su preparación. La invención también se dirige a composiciones farmacéuticas que contienen al menos una forma polimórfica y al uso terapéutico o profiláctico de dichas formas polimorías y composiciones.

Antecedentes de la invención

El compuesto 8-fluoro-2-{4-[ (metilamino) metil]fenil}-1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6-ona representado por la fórmula 1

es una pequeña molécula inhibidora de la polimerasa de poli (ADP-ribosa) (PARP) . El compuesto de fórmula 1 y las sales del mismo pueden prepararse según se describe en la patente de EE.UU. Nº 6.495.541; en la Solicitud PCT Nº PCT/IB2004/000915, en la Publicación Internacional Nº WO 2004/087713; y en la Solicitud Provisional de Patente de EE.UU. Nº 60/612.457.

Hasta la fecha se han identificado dieciocho enzimas en la familia de las PARP mediante su homología en las secuencias de ADN, y se han investigado las propiedades bioquímicas y enzimáticas de siete de ellas: PARP-1 y PARP-2 son estimuladas por la ruptura de las hebras de ADN, PARP-3 interactúa con PARP-1 y el centrosoma, PARP-4, también conocida como PARP de bóveda (vault PARP, VPARP) , es la PARP más grande y se asocia con bóvedas citoplasmáticas, las tanquirasas 1 y 2 (PARP-5a y 5b) se asocian con proteínas teloméricas, y la función de la PARP-7 (TiPARP) no está clara actualmente pero se cree que está implicada en la función de los linfocitos T y puede poli (ADP-ribosilar) histonas (Ame JC, Splenlehauer C y de Murcia G., The PARP Superfamily. Bioessays 26 882-893 (2004) ) . Los estudios farmacológicos han demostrado que el compuesto de fórmula 1 es un inhibidor de la PARP-1 (Ki = 1, 4 nM) y la PARP-2 (Ki = 0, 17 nM) . Basándonos en las similitudes estructurales en las secuencias de aminoácidos entre las enzimas PARP, el compuesto de fórmula 1 probablemente se una asimismo con alta afinidad a los otros miembros de la familia.

La reparación mediada por enzimas de rupturas en hebras simples o dobles del ADN es un mecanismo potencial de resistencia a la radioterapia y a fármacos citotóxicos, cuyo mecanismo depende del daño al ADN. La inhibición de 40 las enzimas reparadoras del ADN es por tanto una estrategia para la potenciación de estos agentes. La PARP-1, el miembro mejor caracterizado de la familia de las PARP, es una enzima nuclear que, tras su activación por un daño al ADN, media en la transferencia de fragmentos de ADP-ribosa desde el NAD+ hacia varias proteínas aceptoras. Dependiendo del grado del daño producido al ADN, la activación de la PARP-1 y la subsiguiente poli (ADPribosil) ación median en la reparación del ADN dañado o inducen la muerte celular. Cuando el daño al ADN es 45 moderado, la PARP-1 juega un papel significativo en el proceso de reparación del ADN. Por el contrario, en el caso de un daño masivo al ADN, la excesiva activación de la PARP-1 agota las reservas de ATP (en un esfuerzo por reponer el NAD+) , que finalmente conduce a la mortalidad celular por necrosis (Tentori L, Portarena I, Graziani G. Potential applications of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibitors. Pharmacol Res 2002, 45, 73-85) . Esta activación de la PARP también puede dar lugar a la liberación de AIF (factor inductor de la apoptosis, apoptosis

50 inducing factor) desencadenando una vía apoptótica independiente de la caspasa (Hong SJ, Dawson TM y Dawson VL, Nuclear and mitochondrial conversations in cell death: PARP-1 and AIF. Trends in Pharmacological Sciences 25 259-264 (2004) ) .

Como resultado del doble papel de la PARP-1, los inhibidores de esta enzima, tales como la 8-fluoro-2-{455 [ (metilamino) metil]fenil}-1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6-ona representada por la fórmula 1, pueden tener un papel como agentes quimiosensibilizantes (evitando la reparación del ADN, por ejemplo, después de una terapia anticancerosa) , o como tratamientos para varias enfermedades y estados tóxicos que implican un estrés oxidativo o inducido por óxido nítrico, y la subsiguiente hiperactivación de la PARP. Dichos estados incluyen alteraciones neurológicas y neurodegenerativas (por ejemplo, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer) (Love S, Barber R, Wilcock GK. Increased poly (ADP-ribosyl) ation of nuclear proteins in Alzheimer's disease. Brain 1999; 122: 247-53; Mandir AS, Przedborski S, Jackson-Lewis V, y col., Poly (ADP-ribose) polymerase activation mediates 1-methyl-4-phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine (MPTP) -induced parkinsonism. Proc Natl Acad Sci EE.UU. 1999; 96: 5774-9) ; alteraciones cardiovasculares (por ejemplo, infarto de miocardio, lesión por isquemia y reperfusión) (Pieper AA, Walles T, Wel G, y col., Myocardial postischemic injur y is reduced by poly (ADP-ribose) polymerase-1 gene disruption. J Mol Med 2000; 6: 271-82; Szab6 G, Bährle S, Stumpf N, y col., Poly (ADP-ribose) polymerase inhibition reduces reperfusion injur y after heart transplantation. Circ Res 2002; 90: 100-6; patente de EE.UU. 6.423.705) ; enfermedades inflamatorias, (Szab6 C, Dawson V., Role of poly (ADP-ribose) synthetase in inflammation and ischaemia-reperfusion. TIPS 1998; 19: 287-98) ; alteraciones vasculares diabéticas (Soriano FG, Virág L, Szab6 C., Diabetic endothelial dysfunction: role of reactive oxygen and nitrogen species production and poly (ADP-ribose) polymerase activation. J Mol Med 2001; 79: 437-48) ; artritis (Szab6 C, Virág L, Cuzzocrea S, y col., Protection against peroxynitrite-induced fibroblast injur y and arthritis development by inhibition of poly (ADP-ribose) synthase. Proc Natl Acad Sci EE.UU. 1998; 95: 3867-72) ; y nefrotoxicidad inducida por cisplatino (Racz I, Tor y K, Gallyas F, y col., BGP-15 - a novel poly (ADP-ribose) polymerase inhibitor - protects against nephrotoxicity of cisplatin without compromising its antitumor activity. Biochem Pharmacol 2002; 63: 1099-111) . Adicionalmente, se demostró que las células tumorales deficientes en BRCA2 son muy sensibles a los inhibidores de la PARP-1 solos (Br y ant HE, Schultz N, Thomas HD, Parker KM, Flower D, Lopez E, Kyle S, Meuth M, Curtin NJ y Helleday T., "Specific killing of BRCA2 deficient tumors with inhibitors of poly (ADP-ribose) polymerase, " Nature: en la prensa) . Los inhibidores de la PARP también están implicados en el amento de la inducción de la expresión del gen Reg en células p y del gen HGF, y consecuentemente, promueven la proliferación de células ß pancreáticas de los islotes de Langerhans y suprimen la apoptosis de las células (Publicación de Solicitud de Patente de EE.UU. 2004/0091453; Publicación PCT Nº WO 02/00665) . Además, los inhibidores de la PARP también se usan en preparaciones cosméticas, especialmente en lociones para después del sol (Publicación PCT Nº WO 01/82877) . Actualmente no hay comercializados inhibidores de la PARP.

El cáncer sigue siendo una enfermedad con muchas necesidades médicas no cubiertas. La quimioterapia citotóxica sigue siendo el pilar de la terapia sistémica para la mayoría de los cánceres, particularmente en enfermedades en etapas tardías. Sin embargo, para los pacientes con enfermedades avanzadas o metastásicas, pocos de los agentes o regímenes quimioterapéuticos citotóxicos han sido eficaces para aumentar la supervivencia global. Adicionalmente, la pequeña ventana terapéutica asociada con los agentes citotóxicos da como resultado una significativa toxicidad junto con una eficacia subóptima. Por lo tanto, un quimiosensibilizante que aumente la eficacia de los fármacos citotóxicos a dosis bien toleradas cubriría una necesidad crítica para los pacientes oncológicos. Las solicitudes de patente provisionales de EE.UU. Nº 60/612.458 y 60/683.006, tituladas "Combinaciones terapéuticas que comprenden inhibidores de las primerasas de poli (ADP-Ribosa) " describen combinaciones farmacéuticas de 8fluoro-2-{4-[ (metilamino) metil]fenil}-1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6-ona.

Para preparar composiciones farmacéuticas que contienen 8-fluoro-2-{4-[ (metilamino) metil]fenil}-1, 3, 4, 5-tetrahidro6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6-ona para su administración a mamíferos,... [Seguir leyendo]

1. Una sal de fosfato cristalina de 8-fluoro-2-{4-[ (metilamino) metil]fenil}1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6ºna, en la que la sal es un polimorfo sustancialmente puro de la Forma I con un patrón de difracción de rayos X en polvo que comprende picos a unos ángulos de difracción (28) de 10, 9, 19, 3, 22, 9 y 25, 0, y en la que dicho polimorfo es un hidrato.

2. Una sal de fosfato cristalina de 8-fluoro-2-{4-[ (metilamino) metil]fenil}1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6ºna, en la que la sal es un polimorfo sustancialmente puro de la Forma II con un patrón de difracción de rayos X en polvo que comprende picos a unos ángulos de difracción (28) de 11, 2, 14, 0, 20, 1 y 23, 1, y en la que dicho polimorfo es anhidro.

3. Una sal de fosfato cristalina de 8-fluoro-2-{4-[ (metilamino) metil]fenil}1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6ºna, en la que la sal es un polimorfo sustancialmente puro de la Forma III con un patrón de difracción de rayos X en polvo que comprende picos a unos ángulos de difracción (28) de 10, 7, 11, 0, 19, 4, y 25, 1, y en la que dicho polimorfo es un hidrato.

4. Una sal de fosfato cristalina de 8-fluoro-2-{4-[ (metilamino) metil]fenil}1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6ºna, en la que la sal es un polimorfo sustancialmente puro de la Forma V con un patrón de difracción de rayos X en polvo que comprende picos a unos ángulos de difracción (28) de 10, 8, 14, 8, 21, 6, y 25, 8, y en la que dicho polimorfo es un hidrato.

5. Una sal de fosfato cristalina de 8-fluoro-2-{4-[ (metilamino) metil]fenil}1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-acepin[5, 4, 3-cd]indol-6ºna, en la que la sal es un polimorfo sustancialmente puro de la Forma VI con un patrón de difracción de rayos X en polvo que comprende picos a unos ángulos de difracción (28) de 14, 8, 20, 0, 22, 3, y 23, 5.

6. Una forma sólida de la sal de fosfato de 8-fluoro-2-{4-