Conjugados con biomoléculas de los (4S, 8S)- y (4R,8R)- ácidos 4-p-bencil-8-metil-3,6,9-triaza-3N,6N,9N-tricarboximetil-1, 11-undecanodioicos, puros en cuanto a enantiómeros, procedimientos para su preparación y su utilización para la preparación de agentes farmacéuticos.

Conjugados de las formulas generales VIIa y VIIb

en las que Z representa un atomo de hidrogeno o un equivalente de un ion metalico de un elemento con los numeros atomico.

21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 46, 47, 49, 58-71, 75, 77, 82 u 83,

A representa un grupo -COO,

R representa una biomolécula unida a través de un grupo funcional, o un radical alquilo de C1-C25 lineal o ramificado, saturado o insaturado y eventualmente interrumpido por uno hasta seis átomos de O, o respectivamente por grupos fenileno,

-NHCO, -CONH-,

y/o -NH-(C=S)-NH, que eventualmente está sustituido en un sitio arbitrario con uno hasta seis grupos carboxilo, grupos hidroxilo, grupos amino u otros grupos funcionales, a través de los cuales pueden estar unidas las biomoléculas, así como sus sales con bases orgánicas o inorgánicas, con las condiciones de que el radical alquilo ha de contener por lo menos una biomolécula unida a través de una grupo funcional y de que por lo menos dos Z han de representar un equivalente de un ion metálico.

Conjugados con bi omoleculas de los (4S, 8S) - y (4R, 8R) -acidos 4-p-bencil-8-metil-3, 6, 9-triaza-3N, 6N, 9Ntricarboximetil-1, 11-undecanodioicos, puros en cuanto a enantiomeros, procedimientos para su preparacion y su utilizacion para la preparacion de agentes farmaceuticos El invento se refiere a los objetos caracterizados en las reivindicaciones: a conjugados con biomoleculas de los (4S, 8S) - y (4R, 8R) -acidos 4-p-bencil-8-metil-3, 6, 9-triaza-3N, 6N, 9N-tricarboximetil-1, 11-undecanodioicos, puros en cuanto a enantiomeros, a procedimientos para su preparacion y a su utilizacion para la preparacion de agentes farmaceuticos destinados al radiodiagnostico, a la radioterapia o al diagnostico por RMN. El uso de radiofarmacos para finalidades diagnosticas y terapeuticas se conoce desde hace mucho tiempo en el sector de la investigacion biologica y medica. En particular, los radiofarmacos se utilizan para representar determinadas estructuras tales como, por ejemplo, el esqueleto, los organos o los tejidos. El uso diagnostico tiene como premisa el uso de tales agentes radiactivos que, despues de su aplicacion, se enriquecen especificamente en las estructuras existentes en un paciente, que deben de ser investigadas. Estos agentes radiactivos, que se enriquecen l ocalmente, pueden ser rastreados, registrados o escintigrafiados por medio de unos detectores adecuados, tales como por ejemplo camaras de escintilacion u otros procedimientos adecuados de registro. La distribucion y la intensidad relativa del agente radiactivo detectado caracterizan al sitio de una estructura, en la que se encuentra el agente radiactivo, y puede representar la presencia de anomalias en estructuras y en funciones, modificaciones patologicas, etc. De un modo similar, se pueden administrar unos radiofarmacos como agentes terapeuticos, para irradiar determinados tejidos o zonas enfermos/as. Tal tratamiento requiere la preparacion de agentes terapeuticos radiactivos, que se enriquecen en determinadas estructuras, organos o tejidos. Un radiofarmaco desarrollado por la entidad IDEC Pharmaceuticals Corp. para la terapia del "linfoma no de Hodgkin" es Zevalin® (vease p.ej. Cancer (2002) febrero 15: 94, (supl. 4) :1.349-57) . El ion radiante es en este caso el 90Y que emite rayos º, que esta unido a un a nticuerpo especifico para un tumor a traves de un compuesto quelante (un derivado sustituido con metilo de acido dietilen-triamina-pentaacetico (MX-DTPA) ) . La resonancia magnetica nuclear (RMN) es hoy en dia un metodo, que se usa ampliamente y que se aprovecha para la generacion de imagenes in vivo, con el que se pueden representar vasos corporales y tejidos corporales (inclusive tumores) a traves de la medicion de las propiedades magneticas de los protones en el agua del cuerpo. Para esto se emplean p.ej. unos agentes de contraste, que dan lugar a un refuerzo del contraste en las imagenes resultantes o respectivamente que h ace legibles a estas imagenes tan solo a traves de la influencia sobre determinados parametros de RMN de los protones del cuerpo (p.ej. los periodos de tiempo de relajacion T1 y T2) . Sobre todo pasan a usarse unos compuestos complejos de iones paramagneticos, tales como p.ej. unos compuestos complejos que contienen gadolinio (p.ej. Magnevist®) , debido al efecto de los iones paramagneticos sobre el acortamiento de los periodos de tiempo de relajacion. Tanto los iones paramagneticos, tales como p.ej.: Gd3+, Mn 2+, Cr3+, Fe3+ y Cu2+ asi como tambien muchos radionuclidos metalicos, se pueden administrar en una forma libre como soluciones, ya que son altamente toxicos. Con el fin de hacer adecuados a estos iones para un uso in vivo, por regla general ellos se convierten en compuestos complejos. Por ejemplo, en el documento de solicitud de patente europea EP-A-0 071 564 se describe, entre otras cosas, la sal de meglumina del compuesto complejo con gadolinio (III) del acido dietilen-triaminapentaacetico (DTPA) como agente de contraste para la tomografia por RMN. Un preparado, que contiene este compuesto complejo, fue autorizado internacionalmente bajo el nombre de Magnevist® como primer agente de contraste de RMN. Este agente de contraste se distribuye extracelularmente despues de una aplicacion por via intravenosa y es segregado por via renal mediante secrecion glomerular. Practicamente no se observa ningun paso del mismo a traves de membranas celulares intactas. El Magnevist® es especialmente bueno para la representacion de zonas patologicas (p.ej. inflamaciones y tumores) . No obstante, los agentes radioterapeuticos y agentes de contraste conocidos no se pueden emplear satisfactoriamente para todos los casos de uso. Asi, muchos de estos agentes se distribuyen por todo el espacio extracelular del cuerpo. Con el fin de aumentar la eficiencia de estos agentes en el diagnostico in vivo y en la terapia, se intenta aumentar su especificidad y su selectividad, por ejemplo, para celulas dianas o para deseadas zonas y estructuras del cuerpo. Un mejoramiento de estas propiedades se puede conseguir, por ejemplo, mediante acoplamiento de los compuestos complejos con metales a biomoleculas segun el principio de direccion de farmacos hacia dianas (en ingles "drug-targeting") . Como biomoleculas se ofrecen proteinas plasmaticas, anticuerpos, sus fragmentos, hormonas, factores de crecimiento y substratos de receptores y enzimas (p.ej. vease el documento de solicitud de patente internacional W0 97/12850, Institut fur Diagnostikforschung an der FU Berlin (Instituto para la investigacion del diagnostico en la Universidad Libre de Berlin) . Sin embargo, hasta ahora, p.ej. la especificidad para un tumor (el enriquecimiento en tumores) en muchos casos todavia no es lo suficientemente alta, lo que constituye un objetivo importante especialmente en el caso de la radioinmunoterapia.

Ademas, es deseable poner a disposicion agentes para el diagnostico y la terapia, que junto a una especificidad lo mas alta que sea posible para una diana, posean una gran estabilidad in vivo para los iones metalicos convertidos en complejos, que en la mayoria de los casos son toxicos.

Una mision del invento consistio, por consiguiente, en poner a disposicion nuevos agentes para el radiodiagnostico y el diagnostico por RMN, asi como para la radioterapia, que no tengan lasmencionadas desventajas y en particular que tengan una alta estabilidad in vivo, una buena compatibilidad y sobre todo unas propiedades especificas para ciertos organos. Por una parte, la retencion en los tejidos tumorales o en los organos que se han de investigar, debe de ser suficiente para poder conseguir con una pequefa dosificacion la calidad de las imagenes o respectivamente una su ficiente i rradiacion, que se nec esitan para un d iagnostico y u na t erapia ef icientes. P or o tra par te, a continuacion se debe de garantizar una segregacion de los metales, lo mas rapida y ampliamente completa que sea posible, desde el cuerpo. Ademas, los agentes de contraste de RMN deben de mostrar una alta relaxividad para protones y, por consiguiente, en el caso de un aumento de la intensidad de las sefales, deben de permitir una reduccion de las dosis.

Se emprendieron diferentes ensayos para m ejorar las propiedades de unos derivados de DTPA bioacoplables mediante la introduccion de ciertos sustituyentes.

Cummins y colaboradores describen p.ej. una sintesis detallada de derivados de DTPA sustituidos con metilo, que se pueden acoplar, por ejemplo, con anticuerpos ("A Convenient Synthesis of Bifunctional Chelating Agents Based 20 on Dietilenetriaminepentaacetic Acid and Their Coordination Chemistr y with Yttrium" (Una sintesis conveniente de agentes quelantes bifuncionales, que se basan en el acido dietilen-triamina-pentaacetico, y su quimica de coordinacion con itrio", Bioconjugate Chemistr y , (1991) , 180-186. Brechbiel y colaboradores, "Synthesis of (1- (pisothiocyanatobenzyl) derivatives of DTPA and EDTA. Antibody Labeling and Tumor-Imaging Studies" (Derivados de 1- (p-isotiocianatobencilo) de DTPA y EDTA. Marcacion con anticuerpos y estudios de representacion en imagenes de t umores) , I norg. C hem. ( 1986) , 25, 2. 772-2.781) . E n l a so licitud de pat ente i nternacional W 0 88/ 01618 de Gansow y colaboradores se divulga un DTPA, que esta provisto de un sustituyente metilo en la posicion 8 y de un sustituyente bencilo funcionalizado en para en la posicion 4.

El compuesto I fue designado MX-DTPA, mx-DTPA o tambien 1B4M-H5DTPA. La solicitud de patenteinternacional W0 01/41743 de la entidad IDEC PharmaceuticalsCorporation describe una sintesis regioselectiva del compuesto I, que parte de una (S) -p-nitrofenil-alanina protegida con Boc y de una diamina monoprotegida. El centro estereogenico en la posicion 4 de este compuesto se describe como de configuracion S; el centro... [Seguir leyendo]

1. Conjugados de las formulas generales VIIa y VIIb

en las que Z representa un atomo de hidrogeno o un equivalente de un ion metalico de un elemento con los numeros atomico.

2. 29, 31, 32.

3. 39.

4. 44, 46, 47, 49.

5. 71, 75, 77, 82 u 83, A representa un grupo -C00, R representa una biomolecula unida a traves de un grupo funcional, o un radical alquilo de C1-C25 lineal o ramificado, saturado o insaturado y eventualmente interrumpido por uno hasta seis atomos de 0, o respectivamente por grupos fenileno, -NHC0, -C0NH-, y/o -NH- (C=S) -NH, que eventualmente esta sustituido en un sitio arbitrario con uno hasta seis grupos carboxilo, grupos hidroxilo, grupos amino u ot ros grupos funcionales, a t raves de l os cuales pue den est ar uni das las biomoleculas, asi como sus sales con bases organicas o inorganicas, con las condiciones de que el radical alquilo ha de contener por lo menos una biomolecula unida a traves de una grupo funcional y de que por lo menos dos Z han de representar un equivalente de un ion metalico.

2. Conjugados de acuerdo con la reivindicacion 1, en los que por lo menos dos de los radicales Z representan un equivalente de un ion metalico de un elemento paramagnetico con los numeros atomico.

2. 29, 42, 44 .

5. 70.

3. Conjugados de acuerdo con la reivindicacion 1, en los que por lo menos dos de los radicales Z representan un equivalente de un ion metalico de un elemento radiactivo con los numeros atomicos 26, 27, 29, 31, 32.

3. 39, 43, 46, 25 47, 49, 61, 62, 64, 70, 71, 75, 77, 82 y 83.

a traves del cual esta unida una biomolecula.

a traves del cual esta unida una biomolecula.

6. Conjugados de acuerdo con la reivindicacion 1, en los que R representa un grupo carboxilo, carboxilo activado, amino, nitro, isocianato, isotiocianato, hidrazino, semicarbazido, tiosemicarbazido, cloroacetamido, bromoacetamido, yodoacetamido, acrilo, acilamino, de anhidridos mixtos, azido, de cloruro de aci do, de hidroxido, de cloruro de sulfonilo, vinilsulfono, carbodiimido, maleimido o diazo, a traves del cual esta unida una biomolecula.

7. Compuestos de acuerdo con la reivindicacion 6, enlos que el grupo carboxilo activado se escoge entre el conjunto que se compone de

8. Conjugados de acuerdo con la reivindicacion 1, en los que la biomolecula se escoge entre el conjunto que se compone de:

biopolimeros, proteinas, tales como las proteinas que tienen una funcion biologica, HSA, BSA, etc., proteinas y peptidos, que se enriquecen en determinados sitios en el organismo (p.ej. junto a receptores, membranas celulares, canales etc.) , peptidos disociables por proteasas, peptidos con sitios sinteticos de rotura preestablecida (p.ej. esteres y am idas labiles, et c.) , pept idos, que s on disociados por m etaloproteasas, peptidos con engarzadores fotodisociables, peptidos con grupos disociables con agentes oxidantes (oxidasas) , peptidos con aminoacidos naturales y no naturales, glicoproteinas (glicopeptidos) , proteinas de sefal, proteinas antiviricas yapoctosis (de muerte celular programada) , biopolimeros modificados sinteticamente, tales como unos biopolimeros derivatizados con engarzadores, metaloproteasasmodificadas y oxidasas derivatizadas, etc., hidratos de carbono (mono-hasta polisacaridos) , t ales como a zucares derivatizados, azu cares disociables en el or ganismo, ci clodextrinas y s us derivados, aminoazucares, quitosano, polisulfatos y derivados de acido acetilneuraminico, anticuerpos, tales como anticuerpos m onoclonales, f ragmentos de ant icuerpos, anticuerpos p oliclonales, m inicuerpos, c adenas unicas (tambien aquellas que estan unidades con engarzadores para formar fragmentos multiples) , globulos rojos y otros componentes de la sangre, marcadores del cancer (p.ej. CAA) y otras sustancias que median en la adhesion entre celulas (p.ej. Lewis X y derivados anti-Lewis X) , fragmentos de ADN y ARN, tales como ADN's y ARN's derivatizados (p.ej. aquellos que fueron encontrados por el procedimiento SELEX) , ARN y ADN sinteticos (tambien con bases no naturales) , PNAs (de Hoechst) y antisentido, -aminoacidos (de Seebach) , aminas vectoras para la infiltracion en la celula, am inas bi ogenicas, c ompuestos farmaceuticos, pr eparados oncologicos, p olimeros sinteticos, que estan dirigidos hacia una diana biologica (p.ej. un receptor) , esteroides (naturales y modificados) , prostaglandinas, taxol y sus derivados, endotelinas, alcaloides, acido folico y sus derivados, lipidos bioactivos, grasas, esteres de acidos grasos, mono-, di- y trigliceridos modificados sinteticamente, liposomas, que estan derivatizados en la superficie, micelas a base de acidos grasos naturales o de compuestos de perfluoroalquilo, porfirinas, texafrinas, porfirinas ampliadas, citocromos, inhibidores, neuraminidasas, neuropeptidos, inmunomoduladores, tales como FK 506, CAPE y gliotoxina, endoglicosidasas, substratos que son activados por enzimas, tales como la calmodulina cinasa, la caseina cinasa II, la glutation-S-transferasa, la heparinasa, metaloproteasas de la matriz, la cinasa del receptor de insulina, la UDP-galactosa 4-epimerasa, fucosidasas, proteinas G, galactosidasas, glicosidasas, glicosil transferasas y l a xi losidasa, ant ibioticos, vi taminas y c ompuestos analogos a vi taminas, hor monas, i ntercaladores de A DN, nucleosidos, nucleotidos, lectinas, vitamina B12, Lewis X y compuestos afines, psoralenos, antibioticos del tipo de dieno-trienos, carbaciclinas, VEGF (acronimo del ingles "vascular endothelial growth factor" (factor de crecimiento endotelial vascular) ) , somatostatina y sus derivados, derivados de biotina, antihormonas, proteinas especificas para tumores y compuestos sinteticos especificos para tumores, polimeros, que se enriquecen en zonas de caracter acido o basico del cuerpo (distribucion controlada por el valor del pH) , mioglobinas, apomioglobinas, etc., peptidos de neurotransmisores, factores de necrosistumoral, peptidos, que se enriquecen en tejidos inflamados, reactivos para agrupaciones de sangre, proteinas transportadoras de aniones y cationes, poliesteres (p.ej. del acido lactico) , poliamidas y polifosfatos.

9. Procedimiento par a l a p reparacion d e unos conjugados de l as formulas V IIa y V IIb d e ac uerdo co n l a en las que Z' tiene el significado de Z o de un grupo protector de carboxilo, R' representa un grupo funcional y A

representa un grupo -C00, eventualmente despues de la separacion de los gruposprotectores de carboxilo, se hacen reaccionar de un modo en si conocido con una biomolecula, y a continuacion (eventualmente despues de la separacion de los grupos protectores de carboxilo) , los acidos obtenidos de esta manera se hacen reaccionar de uno modo en si conocido con por lo menos un oxido metalico o una sal metalica de un elemento que tiene los numeros atomico.

2. 29, 31, 32.

3. 39.

4. 44, 46, 47, 49.

5. 71, 75, 77, 82 u 83, y a continuacion, en caso deseado, los atomos de hidrogeno acidos presentes, se transforman con compuestos organicos y/u organicos o con aminoacidos en sales fisiologicamente compatibles.

10. Estuche para la produccion de radiofarmacos, que comprende un conjugado de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que Z es un atomo de hidrogeno, y representa un compuesto de un elemento radiactivo con los numeros 15 atomicos 26, 27, 29, 31, 32.

3. 39, 43, 46, 61, 62, 64, 67, 70, 71, 75, 77, 82 y 83.

11. Agentes farmaceuticos, que contienen por lo menos un compuesto fisiologicamente compatible de acuerdo con la reivindicacion 2.

12. Agentes farmaceuticos, que contienen por lo menos un compuesto fisiologicamente compatible de acuerdo con la reivindicacion 3.

13. U tilizacion de un c ompuesto de acuerdo c on l a r eivindicacion 2 par a l a pr eparacion de a gentes par a e l diagnostico por RMN. 25

14. U tilizacion de un c ompuesto de acuerdo c on l a r eivindicacion 3 par a l a pr eparacion de a gentes par a e l radiodiagnostico o la radioterapia.